江苏省自然科学基金(BK2011680)
- 作品数:5 被引量:19H指数:3
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- 两种猪肺炎支原体原位杂交检测方法的应用
- 2012年
- 为了比较研究3种猪肺炎支原体(Mhp)的检测方法,利用已建立的显色原位杂交(CISH)和量子点荧光原位杂交(QD-FISH),并结合PCR方法,检测人工感染Mhp的试验猪、自然感染Mhp的试验猪和疑似感染Mhp的临床样品。结果显示,3种检测方法对人工感染组和自然感染组的检测率均为100%;对临床样品,PCR的检测率为90%,CISH的检测率为70%,QD-FISH的检测率为75%。结果表明,用于检测Mhp感染,PCR是最佳检测方法,但CISH和QD-FISH在Mhp检测和致病机理研究方面具有一定的应用价值。
- 王占伟熊褀琰冯志新刘茂军白方方邵国青
- 关键词:猪肺炎支原体PCR显色原位杂交
- 猪鼻拭子样品采集及制备方法的标准化被引量:11
- 2013年
- 为了黏膜样本采集所用材料及方法标准,并增强所检测样本数据的可比性与稳定性。以猪鼻拭子样品为研究对象,结合猪鼻腔的解剖结构以及所采集样品的特殊性,对猪鼻拭子的采集与处理方法进行探讨并标准化。结果表明:通过标化的方法对所采集的116份猪鼻拭子样本进行总蛋白浓度测定,发现所有鼻拭子样本的总蛋白均值为(6.92±0.41)mg/mL,变异系数为32.58%;对其中7头猪在不同时间采集鼻拭子测定总蛋白,结果同一头猪的检测数据变异系数除1头为13.95%外,其余均>10%。表明标化的猪鼻拭子采集及制备方法使检测结果具备较好的稳定性与科学性。
- 冯志新张亚华利忠甘源韦艳娜邵国青
- 关键词:样品采集
- 猪IgA双抗夹心ELISA检测方法的建立及应用被引量:1
- 2013年
- 随着人们对黏膜免疫认识程度的加深,黏膜免疫系统的研究不仅为传统的免疫学增加新内容,也为很多疾病的致病机理、病原与宿主的关系、疾病诊治及新型疫苗与预防制剂等的研究提供了思路与方法。黏膜免疫和黏膜一起构成了机体防御外来病原入侵的第一道屏障。
- 张亚冯志新姚景霆华利忠甘源刘占军韦艳娜邵国青
- 关键词:夹心ELISA
- 猪鼻拭子与支气管肺泡灌洗液用于呼吸道分泌性抗体检测被引量:3
- 2013年
- 黏膜免疫是机体抵抗细菌或病毒感染的第一道防线[1]。因此,检测黏膜免疫反应对评估黏膜接种方案和病原与宿主之间的相互关系具有重要的意义[2]。目前,支气管。肺泡灌洗液样本(BALF)在下呼吸道样本的采集中占有重要的地位,也是目前评价呼吸道黏膜免疫的常用样本。
- 冯志新张亚华利忠甘源刘茂军王海燕韦艳娜白昀王占伟邵国青
- 关键词:支气管肺泡灌洗液抗体检测
- 猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内免疫机制研究被引量:8
- 2012年
- 为研究猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫机制,通过肺内接种免疫5~10日龄仔猪,并于免疫后不同时间点检测血清中IgG抗体效价、全血中淋巴细胞转化效率、呼吸道局部的IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度,于免疫后28 d剖杀采集呼吸道上皮组织,通过扫描电镜法与原位杂交检测法观察疫苗株在呼吸道的存留以及对纤毛的影响情况。结果发现,免疫后猪血液中淋巴细胞转化增强1.52~2.01倍,支气管表面IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度持续增加,但血清抗体一直未检测到。扫描电镜与原位杂交检测结果发现疫苗株能有效地黏附在支气管纤毛上皮细胞上,但对纤毛的影响较小。由此表明,猪支原体肺炎活疫苗(168株)通过肺内免疫可有效激活全身细胞免疫及呼吸道局部的黏膜免疫与细胞免疫反应,而且还可以通过黏附支气管纤毛上皮细胞产生占位效应而对上皮组织不产生损伤。
- 冯志新刘茂军熊祺琰华利忠王海燕甘源韦艳娜苏国东邵国青
- 关键词:猪支原体肺炎活疫苗免疫机制