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半夏泻心汤对糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞及干细胞因子的影响被引量：8: 2013年; 目的观察半夏泻心汤对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠胃窦Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的影响。方法将60只健康雄性DM大鼠随机分成对照组、模型组、半夏泻心汤组(中药组)和多潘立酮组(西药组)。一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,55 mg/kg)制作糖尿病大鼠模型。中药组给予半夏泻心汤[5.4 g/(kg·d)]灌胃,西药组给予多潘立酮[5 mg/(kg·d)]灌胃,模型组及对照组每天给予等体积蒸馏水,持续灌胃8周后,检测各组大鼠体重及血糖,给予半固体营养糊灌胃测定胃残留率,利用免疫组化和图像分析观察胃窦c-kit阳性ICCs及SCF表达。结果与对照组比较,模型组体重减轻,血糖及胃残留率升高,c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值显著降低(P<0.05)。与模型组比较,两个用药组多饮、多食及多尿症状减轻,精神状态好转,体重、c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值明显增加(P<0.05),胃残留率降低(P<0.05);中药组血糖降低(P<0.05),且中药组c-kit阳性ICCs平均光密度高于西药组(P<0.05)。结论半夏泻心汤可以促进糖尿病大鼠胃窦肌间神经丛c-kit ICCs及SCF的表达,对受损的DM大鼠胃窦ICCs、SCF有部分恢复作用,可改善糖尿病大鼠的胃动力障碍。; 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民; 关键词：糖尿病半夏泻心汤 CAJAL间质细胞干细胞因子

内脏高敏感大鼠结肠特异背根神经节神经元TRPV1表达和电生理特征变化被引量：3: 2015年; 背景:内脏高敏感被认为是肠易激综合征的主要病理生理机制之一。目的:探讨内脏高敏感大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元上的TRPV1表达及其电生理特征。方法:20只10 d龄大鼠随机分为模型组和对照组,模型组以结直肠内灌注乙酸诱导内脏高敏感模型,对照组灌注等量0.9%NaC l溶液。以结肠壁注射DiI荧光染料逆行标记DRG神经元(即结肠特异DRG神经元),免疫荧光法检测DRG神经元上的TRPV1表达,膜片钳技术记录神经元电生理特征。结果:模型组结肠特异DRG神经元上的TRPV1表达阳性率明显高于对照组(46.1%对36.6%,P<0.01),平均阈电流值明显低于对照组[(57.80±1.32)pA对(73.45±4.51)pA,P<0.05],2倍阈电流刺激下动作电位频率明显高于对照组[(8.20±1.10)Hz对(4.54±0.66)Hz,P<0.05],差异均有统计学意义。模型组60 mm Hg结直肠扩张压力下的腹壁回撤反射(AWR)评分与TRPV1表达阳性率、2倍阈电流刺激下动作电位频率呈正相关(r=0.87和r=0.73,P<0.01),与阈电流值呈负相关(r=-0.81,P<0.01)。结论:结肠特异DRG神经元TRPV1表达上调、细胞兴奋性增加,可能是内脏高敏感形成的重要环节。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民王烈成; 关键词：内脏高敏感背根神经节瞬时受体电位通道 TRPV1 膜片钳术

内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究被引量：4: 2013年; 目的探讨内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究。方法取出生10d的大鼠，结肠内给予0．5％乙酸溶液制备内脏高敏感大鼠模型（AA组），对照组（NS组）给予等量0．9％生理盐水。对成年后的大鼠进行结直肠扩张（CRD），用腹部回撤反射（AWR）值来评估内脏敏感性。在结肠壁上注射1，1’-二（十八烷基）-3，3，3’，3’-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐（DiI）逆行标记的背根神经节（DRG）神经元为结肠特异DRG神经元，酶解分离神经节成单细胞后，荧光显微镜下观察细胞形态并计数。采用全细胞膜片钳技术记录神经元的阈电位和动作电位频率。结果与NS组比较，AA组大鼠在相同结直肠扩张压力（5．332、7．998、10．664kPa）下AWR值明显增高（P〈O．05）；AA组结肠特异DRG神经元细胞直径为35～45在μm，Ns组为25～35μm；AA组神经元阈电流低于NS组（P〈0．05），2倍阈电流刺激下，引发出的AA组动作电位频率高于NS组（P〈0．05）。结论大鼠结肠特异背根神经节神经元在内脏高敏感后细胞增大且兴奋性增加，这有利于今后更深层次地研究内脏敏感性增高的神经机制。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民王烈成; 关键词：内脏高敏感背根神经节形态学膜片钳

吉西他滨耐药的胰腺癌SW1990细胞株的建立及相关特性检测被引量：2: 2015年; 目的探讨对吉西他滨(GEM)耐药的胰腺癌SW1990细胞诱导方法,以期进一步认识胰腺癌耐药的发生机制,并对诱导的GEM耐药的胰腺癌细胞与其亲本细胞的生物学特性进行比较。方法采用逐步浓度递增法诱导对GEM耐药的细胞株SW1990-GZ。MTT法检测SW1990和SW1990-GZ的半数致死量(IC50)、耐药系数(R),并观察其生长差异。采用高效液相色谱法(HPLC)检测不同时间点SW1990和SW1990-GZ对GEM药物的摄取情况。结果SW1990和SW1990-GZ的IC50为(0.07±0.002 1)、(87.50±3.240 0)μg/ml,R=1 250;在不同浓度GEM作用下,诱导后耐药的SW1990-GZ对GEM的敏感性明显降低。细胞生长曲线显示耐药细胞SW1990-GZ相对于SW1990生长缓慢。不同时间点GEM孵育后,SW1990-GZ细胞对GEM药物的摄取较SW1990细胞降低。结论成功诱导了耐GEM药物的SW1990-GZ细胞株,耐药性能稳定、明显。SW1990-GZ细胞可能存在着一定的机制使得细胞摄取GEM降低。; 贾一夫丁飞余跃高萌杨显珠王均

结肠特异背根神经节神经元P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用被引量：3: 2015年; [目的]通过观察内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元P_2X_3受体表达和电生理特征,探讨P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用。[方法]10只幼鼠分为2组,经结直肠分别灌注乙酸诱导内脏高敏感模型(内脏高敏感组)、0.9%氯化钠溶液作对照(对照组);在结肠壁上注射1,1'-二(十八烷基)-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(DiI)逆行神经标记的DRG神经元为结肠特异DRG神经元,用免疫荧光技术观察其P_2X_3受体表达变化和膜片钳技术进行电生理记录。[结果]内脏高敏感组与对照组大鼠比较,结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体免疫阳性率明显增加(45.47%∶32.15%,P<0.01)、结肠特异DRG神经元静息电位和阈电流降低(P<0.05)、动作电位频率增高(P<0.05)。AWR评分值与结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体阳性率(r=0.86,P<0.01)、2倍阈电流刺激下动作电位频率(r=0.82,P<0.01)呈正相关,与阈电流值(r=-0.77,P<0.01)呈负相关。[结论]P_2X_3受体在结肠特异DRG神经元上表达上调且DRG神经元兴奋性增加与内脏高敏感的形成有密切关系。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民; 关键词：内脏高敏感背根神经节膜片钳

胎儿正常胰腺组织Stathmin1的免疫组化和原位杂交研究: 2015年; 目的探讨Stathmin1在胎儿正常胰腺组织中的表达情况。方法收集2012至2014年不同周龄胎儿解剖标本中正常胰腺组织10例,应用免疫组织化学法和原位杂交检测Stathmin1及其mRNA的表达。结果 <24周胎儿正常胰腺组织中Stathmin1已有表达,阳性表达率显著低于>24周胎儿胰腺的正常组织(54.72%vs 82.41%,P<0.05);且<24周胎儿正常胰腺组织中Stathmin1 mRNA也已有表达,阳性表达率显著低于>24周胎儿胰腺的正常组织(48.33%vs 73.64%,P<0.05)。结论胎儿正常胰腺组织Stathmin1已有表达,随着胎儿的发育而发生变化,其可能参与了胎儿胰腺组织的生长发育。; 黄敏张旭余跃高萌贾一夫胡闻; 关键词：胎儿胰腺组织原位杂交免疫组化

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安徽省自然科学基金(1208085MH174)

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