国家自然科学基金(81072138)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
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- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海交通大学更多>>
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- 微小RNA-7抑制人卵巢癌细胞株增殖及侵袭能力的研究被引量：8
- 2012年
- 目的:探讨微小RNA-7(miR-7)对低转移人卵巢癌细胞株HO-8910、高转移人卵巢癌细胞株HO-8910pm增殖及侵袭转移能力的影响。方法:检测两种细胞株的miR-7表达情况,构建miR-7质粒,通过lipofectmin 2000瞬时转染miR-7低表达的细胞株,通过实时PCR检测转染前后细胞株miR-7以及EGFR mRNA表达情况,Western blot法检测EGFR蛋白表达。细胞划痕实验、transwell实验检测细胞体外迁移及侵袭能力;CCK-8检测增殖能力变化。结果:HO-8910细胞miR-7表达为HO-8910pm的(2.517±0.508)倍;转染后HO-8910pm的miR-7表达提高了(8.015±0.1805)倍,同时抑制EGFRmRNA及蛋白表达,抑制侵袭、迁移、增殖能力(P<0.05);而miR-7表达相对高的HO-8910体外迁移、侵袭及增殖能力均低于HO-8910pm。结论:miR-7可通过调控EGFR的表达抑制HO-8910、HO-8910pm的增殖及侵袭转移能力,miR-7可能为临床治疗卵巢癌提供新靶标。
- 周星辰邱丽华
- 关键词：卵巢肿瘤表皮生长因子受体增殖
- 卵巢癌转移相关微小RNA研究进展
- 2012年
- 微小RNA是一种内源性非编码小RNA,能在转录后水平负调节靶基因的表达。而肿瘤相关的微小RNA有类似于癌基因或抑癌基因的作用。近年研究发现,一些微小RNA可以通过不同的途径作用于靶基因,对卵巢癌的侵袭转移有促进或抑制作用。明确这些微小RNA及其在卵巢癌侵袭转移方面的作用机制将为卵巢癌的治疗提供新靶点。
- 周星辰邱丽华
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤侵润肿瘤转移微小RNAS
- DNA甲基化在卵巢癌中的研究进展被引量：1
- 2012年
- 卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤之一,病死率居妇科肿瘤之首。因早期多无明显症状体征且缺乏敏感和特异的筛选手段,70%以上的患者发现时已为晚期,多伴有腹水、盆腹腔广泛转移,恶性程度高,预后极差,故卵巢癌的早发现早诊断在提高生存率方面显得尤为重要。近年表观遗传学的研究进展迅速,在卵巢癌发生发展治疗等方面具有重要的指导意义,为卵巢癌的早期诊断、优化治疗、改善预后指明新方向。DNA甲基化是最常见也是目前研究最清楚的表观遗传修饰形式,能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,调控基因表达,在肿瘤的发生发展中扮演重要角色。就DNA甲基化在卵巢癌表观遗传学中的研究进展作一综述。
- 王文文邱丽华
- 关键词：DNA甲基化卵巢肿瘤基因CPG岛
- 微小RNA-7调控EGFR抑制上皮性卵巢癌细胞上皮间质转化的研究被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨微小RNA-7(miR-7)调控人上皮性卵巢癌(EOC)细胞上皮间质转化,抑制肿瘤侵袭转移的作用及机制。方法:选取EOC细胞株HO-8910pm、ES-2,用li-pofectmin 2000体外瞬时转染miR-7质粒,分别通过实时PCR和Western blot检测转染前后细胞株miR-7及EGFR蛋白表达情况;Western blot法检测转染前后细胞株上皮标记β-catenin、间质标记Vimentin及EGFR下游信号通路AKT、ERK蛋白磷酸化水平;实时PCR检测转染前后EMT相关转录因子Snail、Slug、ZEB1、ZEB2的表达。Transwell肿瘤细胞侵袭实验检测转染前后细胞体外侵袭能力。结果:转染miR-7质粒后,HO-8910pm细胞miR-7的表达水平提高了(8.015±0.181)倍,ES-2细胞miR-7表达提高了(28.03±1.253)倍;EGFR蛋白表达均显著下降;转染后细胞的侵袭能力显著下降,HO-8910pm与ES-2的侵袭抑制率分别为62.33%、71.32%;转染后两种细胞的β-catenin蛋白表达均升高,而Vimentin蛋白表达降低;转录因子Snail、Slug的表达较未转染前显著降低(P<0.05),转染前后ZEB1、ZEB2无显著差异;转染后细胞p-AKT,p-ERK1/2表达均下降。结论:miR-7可通过调控EGFR的表达抑制其下游AKT和ERK1/2信号通路的活化以及逆转EMT,从而抑制EOC细胞的侵袭转移能力。
- 周星辰邱丽华
- 关键词：卵巢肿瘤上皮间质转化信号通路
- HsamiR-7慢病毒表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞HO8910-PM中表达的有效性
- 2013年
- 目的:构建Hsa miR-7的慢病毒表达载体,感染人卵巢癌细胞HO8910-PM后检测微小RNA 7(miR-7)及其靶基因血管内皮生长因子受体(EGFR)的表达,为研究miR-7在HO8910-PM中的生物学功能奠定基础。方法:将聚合酶链反应(PCR)扩增得到的miR-7前体序列pre-miR-7和慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1经酶切后连接产生pLVX-miR-7-IRES-ZsGreen1,经酶切及测序鉴定正确后在HEK293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染HO8910-PM用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测感染后的HO8910-PM中pre-miR-7和miR-7的表达,qPCR及蛋白质印迹(Western blot)方法检测其靶基因EGFR的表达。结果:酶切及测序结果示慢病毒表达载体pLVX-miR-7-IRES-ZsGreen1构建正确,病毒浓缩液感染HO8910-PM后能有效提高pre-miR-7的表达(t=17.909,P=0.004)和miR-7的表达(t=35.320,P=0.024),并能有效降低其靶基因EGFR的mRNA的表达(t=8.83,P=0.005)及蛋白的表达(t=22.14,P=0.002)。结论:成功构建了pLVX-miR-7-IRES-ZsGreen1慢病毒表达载体及稳定表达miR-7的HO8910-PM细胞亚系。
- 王文文邱丽华
- 关键词：微小RNAS慢病毒属卵巢肿瘤
- 微小RNA-7在上皮性卵巢癌原发灶及转移灶中表达的研究被引量：4
- 2014年
- 目的:检测上皮性卵巢癌组织原发灶、转移灶中miR-7及其靶标EGFR蛋白的表达,探讨miR-7及EGFR与卵巢癌转移的关系。方法:采用显色原位杂交(CISH)检测miR-7在卵巢癌组织原发灶、转移灶石蜡切片中的表达;采用免疫组化检测EGFR蛋白表达。结果:上皮性卵巢癌转移灶中miR-7表达显著低于原发灶(P<0.05),而EGFR表达显著高于原发灶(P<0.05);miR-7与EGFR表达具有相关性(r=-0.441,P<0.05)。结论:miR-7可能通过EGFR抑制卵巢癌的转移,miR-7可能成为治疗卵巢癌的新靶标。
- 楼微华周星辰邱丽华
- 关键词：上皮性卵巢癌表皮生长因子受体
