国家自然科学基金(30700186)
- 作品数：9 被引量：32H指数：3
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- ^99Tc^m—His10—Annexin Ⅴ探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨^99Tc^m标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ（His10-Annexin Ⅴ）探测荷非小细胞肺癌（NSCLC）裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性。方法用^99Tc^m直接标记His10-Annexin Ⅴ。荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只，按体表面积以100mg／m^2剂量紫杉醇化疗诱导，分成未治疗（对照）、化疗诱导后24，48，72h共4组.^99Tc^m-His10-AnnexinⅤ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡，计算肿瘤／对侧正常肌肉组织放射性比值（T／NT），测定每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。以^99Tc^m-IgG显像为对照，确定肿瘤的非特异性摄取。用流式细胞术（FCM）测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3），光学显微镜HE及原位末端标记法（TUNEL）染色测定凋亡指数。采用SPSS12．0软件进行统计学处理，运用单因素方差分析和直线相关分析（Pearson）。结果”^99Tc^m -His10-Annexin Ⅴ放化纯为（98．01±1．67）％。注射^99Tc^m- His10-Annexin Ⅴ后2h即可得到清晰图像，化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚，化疗后24，48，72h组的T／NT值分别为2．63±0．76，3．41±0．90，3．85±0．62；对照组T／NT值为1．42±0．19，F值分别为12．064，23．322，70．177，P均〈0．01。未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取，为（1．09±0．18）％ID／g，化疗后肿瘤摄取明显增加，24，48，72h肿瘤摄取分别为（2．55±0．73）、（3．60±1．09）、（3．73±0．97）％ID／g，明显高于未治疗组（F值分别为18．733，20．624，35．626，P均〈0．01）。^99Tc^m-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚。未治疗组活化Caspase-3为（3．70±0．74）％，化疗后24，48，72h分别为（23．46±2．23）％、（62．85±6．13）％、（70．44±6．09）％，3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义（F值分别为354．610，459．438，591．052�
- 郑玉民王自正颜珏杨翔华子春方纬孟庆乐王峰
- 关键词：细胞凋亡
- ^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT探测乳腺癌化疗后细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的 合成新型凋亡显像剂^99Tc^m-半胱氨酸-膜联蛋白V（TP5-3）,研究其在小鼠体内生物分布和药代动力学特点,探讨^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT检测乳腺癌单次化疗后肿瘤早期细胞凋亡的可行性.方法 以直接还原法对TP5-3进行^99Tc^m标记,HPLC检测产物的标记率;进行正常小鼠体内^99Tc^m-TP5-3的生物分布及药代动力学研究.建立荷MDA-MB-231人乳腺癌裸鼠模型,取10只分为2组,化疗组单次腹腔内注射紫杉醇（每只40 mg/kg）,对照组注射等体积生理盐水,48 h后由尾静脉注射37 MBq ^99Tc^m-TP5-3,进行microSPECT/CT图像采集,显像后立即处死、取材,比较2组肿瘤的放射性摄取（％ID/g）、T/NT（NT取肌肉）;采用流式细胞术和病理学检测肿瘤凋亡细胞.采用单因素方差分析、两样本t检验和直线相关分析数据.结果^99Tc^m-TP5-3标记率＞95％,室温放置4h放化纯仍保持在（96.0±1.5）％,稳定性好.正常小鼠注射显像剂后30 min肾脏放射性摄取最高[（8.48±1.07） ％ID/g],其他脏器分布较少;血液清除快,注射后4h血液放射性摄取[（2.07±0.35） ％ID/g]较注射后5 min[（13.74±4.21） ％ID/g]减少了85％（F=11.310,P＜0.05）;显像剂主要浓聚于肾、肝和胃,经肾脏排泄.化疗后99^Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT显像示化疗组T/NT为4.21±0.06,对照组T/NT仅1.57±0.67（f=12.820,P＜0.05）;化疗后生物分布实验示,化疗组肿瘤放射性摄取明显高于对照组,分别为（4.82±0.54） ％ID/g和（1.44±0.38） ％ID/g（t=0.679,P＜0.05）.肿瘤放射性摄取与流式细胞仪测定的凋亡细胞百分比呈正相关（r=0.985,P＜0.05）.HE染色示化疗后肿瘤组织有大量凋亡细胞,而对照组仅有少量.结论 ^99Tc^m-TP5-3标记方法简单,生物分布理想,具备优良的药代动力学特性;^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT可用于早期检测荷乳腺癌裸鼠模型化疗后的肿瘤细胞凋亡水平.
- 罗瑞王峰侯彦杰付彤华子春张建平章英剑
- 关键词：膜联蛋白V
- N-琥珀酰亚胺4-18F-氟苯甲酸酯的全自动化合成及用于突触结合蛋白C2A-GST的标记被引量：3
- 2010年
- 目的 建立和优化全自动化合成N-琥珀酰亚胺-4-18F-氟苯甲酸酯（18F-SFB）的方法,并用其进行突触结合蛋白C2A-谷胱甘肽S转移酶（GST）的标记,评价其用于探测肿瘤模型化疗后凋亡的价值.方法 对美国GE TRACERlab FXFDG和TRACERlab FXr-N合成模块进行硬件改造和程序编写,用2个模块全自动化合成18F-SFB并计算产率,高效液相色谱（HPLC）分析合成产物;18F-SFB与C2A-GST突触结合蛋白反应后,用HPLC分析标记产物并计算标记率;将37 MBq 18F-FB-C2A-GST经耳缘静脉注入2只化疗后原位VX-2肺肿瘤新西兰大白兔体内,于注射后0.5,1和2 h行PET/CT显像,显像结束后处死兔,取肿瘤和对侧肺组织行病理检查.结果 18F-SFB合成时间约87 min,其中4-18F-氟苯甲酸（18F-FBA）用时48 min,放化产率达（76.41±4.00）%（n=10）;18F-SFB的校正放化产率为（45.43±5.90）%,放化纯为95%左右;合成的18F-SFB易与C2A-GST反应,标记率可达80%～90%,纯化后18F-FB-C2A-GST的比活度为（1.33～3.33）×109MBq/mol,放化纯可达99%.荷瘤兔PET/CT显像示18F-FB-C2A-GST主要经肾排泄,血液清除快,心肌、正常肺和肝无明显放射性摄取;化疗后的2只荷瘤兔CT所示肿瘤和增厚胸膜部位PET显像呈放射性浓聚,病理检查见大量凋亡小体形成.结论 应用常规生产18F-FDG的GE合成模块为平台可全自动化合成18F-SFB;18F-SFB易与突触结合蛋白C2A-GST反应;18F-FB-C2A-GST兔PET/CT显像示其生物分布理想,能有效探测化疗后肿瘤凋亡.
- 侯彦杰刘标王自正徐绪党李少华田伟王峰
- 关键词：苯甲酸盐类氟放射性同位素谷胱甘肽转移酶类
- 99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（tricine）的制备及对胰腺癌荷瘤鼠显像研究被引量：2
- 2011年
- 目的制备99Tcm-（联肼尼克酰胺-蛙皮素类似肽）（N-三羟甲基甘氨酸）（三苯基膦三间磺酸钠盐）[（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）]三重配位化合物，评价其在正常小鼠及胰腺癌荷瘤裸小鼠的生物分布。方法双功能螯合剂HYNIC与[Lys3]-BBS偶联（pH值9．0），以SnCl2为还原剂，tricine和TPPTS为协同配体，进行99Tcm-标记，合成三重配位化合物99Tcm-（HYNIC-[Lys。]-BBS）（tricine）（TPPTS）。用Sep-PakC18cartridge和HPLC对其纯化和分析，测定其标记率和放化纯，研究其在人血清中的稳定性，并进行正常小鼠体内的生物分布研究以及胰腺癌荷瘤裸小鼠活体显像。结果99Tcm-（HYNIC_[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）标记率为（90±2）％，放化纯〉95％，在人血清中放置4h其放化纯仍大于85％。正常小鼠体内分布结果表明，99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）血液清除迅速，2h血液中放射性为（0．07±0．01）％ID／g，主要经。肾排泄，肝、胃肠道摄取较少，2h时肝放射性为（0．27±0．03）％ID／g，胃为（0．06±0．03）％ID／g，肠为（0．04±0．00）％ID／g。胰腺癌荷瘤裸小鼠吖显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影，2h后肿瘤与对侧正常肌肉的T／NT比值最高达3．71±0．57。结论99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）三重配位化合物制备成功，所用标记方法可行，标记物稳定性较好，标记率和放化纯较高，生物分布特性良好，有望用于胰腺癌的显像研究。
- 田伟王峰李少华邵国强侯彦杰王自正
- 关键词：蛙皮素锝胰腺肿瘤放射性核素显像
- 乳腺癌荷瘤鼠^(99m)Tc-DOTANOC显像与生长抑素受体表达水平的相关性研究
- 2009年
- 目的:探讨乳腺癌荷瘤鼠模型中肿瘤组织中的生长抑素受体(SSTR)的表达水平与99mTc-DOTANOC显像的相关性研究。方法:配体交换法标记99mTc-DOTANOC,通过尾静脉注射乳腺癌荷瘤鼠模型,行99mTc-DOTANOC显像,勾画ROI计算肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值并测定肿瘤及主要脏器单位组织的放射性摄取百分值(%ID/g),采用逆转录聚合酶反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中各SSTR亚型mRNA的表达水平,对SSTR亚型表达水平与T/NT放射性摄取比值进行相关性研究。结果:99mTc-DOTANOC乳腺癌荷瘤鼠模型显像示肿瘤部位有较高的放射性浓聚,与对侧正常组织T/NT比值较高,4h达到2.41±0.21;99mTc-DOTANOC荷瘤鼠体内生物分布示药物在肿瘤部位有较高的摄取;RT-PCR示乳腺癌组织中有着丰富的SSTR表达,SSTR3和SSTR2亚型表达水平较高,两者mRNA的表达水平与荷瘤鼠显像T/NT比值呈正相关(两者分别r=0.94,r=0.81,P<0.05)。结论:乳腺癌细胞株MDA-MB-435高表达SSTR2和SSTR3,其中SSTR3和SSTR2 mRNA表达水平与肿瘤组织对99mTc-DOTANOC的摄取呈正相关。第三代生长抑素类似物99mTc-DOTANOC受体显像对乳腺癌有较好的影像诊断价值。
- 高玉婷王峰张乐乐孟庆乐王自正
- 关键词：生长抑素乳腺癌生长抑素受体
- 5-Aza-CdR对肺癌A549细胞DNA甲基转移酶活性的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycitydine,5-Aza-CdR)处理肺癌细胞株A549后,DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferase,Dnmts)转录水平及其活性的变化,以及细胞生长状态的改变。方法:5-Aza-CdR处理A549细胞株,半定量RT-PCR检测癌细胞Dnmts的mRNA转录水平;酶活性连续循环比色法检测Dnmts的催化活性;流式细胞仪(FCM)及MTT法检测细胞的生长状态。结果:Dnmts的转录水平5-Aza-CdR处理前后水平分别为:Dnmt1(1.23±0.253,1.15±0.166)、Dnmt3b(0.760±0.164,0.649±0.181),两组无显著性差异(P>0.05)。两组Dnmts催化活性分别为:Dnmt1(0.195±0.030,0.153±0.041)、Dnmt3b(0.172±0.029,0.116±0.050),药物组催化活性下降(P<0.05)。FCM结果提示细胞周期阻滞于G1/G0期,两组凋亡率分别为0.62±0.56,7.60±1.92,凋亡率明显增加(P<0.01)。MTT结果示药物组细胞生长受抑制。结论:5-Aza-CdR抑制A549细胞株增殖,促进凋亡,对Dnmts的抑制作用是通过降低催化活性实现,不影响其转录水平。
- 赵莹孙丽华杨振华王锋
- 关键词：肺癌甲基化
- ^68Ga—NOTA-Duramycin实验研究的标记与生物分布被引量：7
- 2012年
- 目的制备^68Ga-1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸-耐久霉素（NOTA-Duramycin），探讨其在小鼠体内生物分布及在评价猪心肌缺血再灌注损伤模型心肌细胞凋亡中的价值。方法采用固相法合成NOTA—Duramycin，再于常温下标记、合成^68Ga．NOTA—Duramycin，用HPLC法测定其标记率和放化纯，观察标记物体外稳定性及在正常小鼠体内的生物分布。制备猪心肌缺血再灌注损伤模型（n=6），注射^68Ga—NOTA—Duramycin37．0MBq后1h，行PET／CT显像，探测心肌细胞凋亡；显像结束后，将其处死，取其心脏行凋亡病理分析。结果^68Ga—NOTA．Duramycin标记率为（92．5±2．1）％，放化纯〉90％，体外稳定性好。正常小鼠体内生物分布实验显示，早期相（5min）^68Ga—NOTA—Duramycin在血液、心、肝、脾、肺和肾的放射性摄取分别为（23．50±15．38）％ID／g、（8．53±4．52）％ID／g、（8．26±2．24）％ID／g、（2．12±0．28）％ID／g、（5．02±1．46）％ID／g和（50．62-I-54．24）％ID／g，延迟相（60min）放射性摄取分别降为（1．83±0．31）％ID／g、（1．05±0．31）％ID／g、（0．97±0．28）％ID／g、（0．68±0．27）％ID／g、（2．15±O．90）％ID／g和（8．12±2．74）％ID／g，表明该显像剂主要经肾排泄。在猪心肌缺血再灌注损伤模型中，^68Ga-NOTA—DuramycinPET／CT显像示缺血心肌部位呈局灶性放射性浓聚，病理证实该缺血部位有大量心肌细胞发生凋亡。结论^68Ga—NOTA—Duramycin标记方法简单，反应条件温和，稳定性好，可有效探测猪心肌缺血再灌注损伤模型的心肌细胞凋亡，有望成为一种新型细胞凋亡显像剂。
- 黄斌方纬田伟王峰李少华付彤孟庆乐王自正
- 关键词：药代动力学细胞凋亡小鼠
- Hcy和hs-CRP在急性脑血管疾病中的诊断意义被引量：11
- 2009年
- 目的:检测急性脑梗死患者血清同型半胱氨酸(Hcy)和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)含量,探讨Hcy和hs-CRP在急性脑缺血和脑梗死中的临床意义和诊断价值。方法:112例(男79,女33)急性脑梗死患者,年龄(62.8±10.5)岁和正常健康人对照组53例(男35,女18),年龄47岁～76岁,平均(60.7±12.3)岁,放射免疫分析(RIA)测定CRP,时间偏振荧光化学分析测定血清Hcy水平,比较急性脑梗死组患者与正常对照组之间血清含量的差异并和脑梗死患者神经功能缺失程度作相关性分析。结果:轻、中和重度组脑功能损害组与正常对照组之间血清CRP及Hcy水平均有显著性差异(P<0.01),脑梗死患者中轻度脑功能障碍组和重度脑功能受损组之间,Hcy水平也有显著性差异(P<0.05);脑梗死患者神经功能缺失程度与血清Hcy水平呈显著正相关(r=0.47,P<0.05)。脑梗死患者与健康对照组之间血清CRP水平有显著性差异(P<0.001),脑梗死患者各组之间CRP水平也有显著性差异(P<0.01),且血清CRP水平与NIHSS评分有显著相关性(r=0.89,P<0.01)。结论:脑梗死患者血中Hcy和hs-CRP水平均显著升高,并与脑梗死严重程度密切相关,Hcy和hs-CRP有望成为判断脑梗死病情严重程度和转归的预测因子。
- 武婕周俊山瞿卫傅雷杨雪梅王峰潘雷杜同信王自正
- 关键词：脑梗死C-反应蛋白同型半胱氨酸
- 生长抑素类似物介导靶向显像及治疗的研究现状和进展被引量：1
- 2009年
- 放射性核素标记生长抑素类似物对神经内分泌肿瘤进行靶向诊断和靶向治疗已得到临床广泛认可。大多数生长抑素类似物仅对生长抑素受体2具有较高的亲和力，限制了其在临床中的应用。新一代生长抑素类似物如：1，4，7，10-四氮杂环十二烷-N，N′，N″，N″′-四乙酸-1-萘丙氨酸-奥曲肽（DOTA—NOC）等，可与更多亚型的生长抑素受体结合且具有更高的亲和力，可由发射不同射线的多种核素标记，已引起广泛重视。该文在介绍常规生长抑素类似物的基础上，着重讨论新的生长抑素类似物、新的螫合剂、新的标记核素及其新的组合，展望生长抑素受体介导肿瘤显像及治疗的前景。
- 高玉婷王自正
- 关键词：生长抑素受体放射性核素显像放射疗法
