吉林省科技发展计划基金(20070923)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- APP基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的稳定表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建淀粉样前体蛋白(APP)基因真核表达载体,转染SH-SY5Y细胞,建立稳定转染细胞系。方法从质粒pcDNAs-APP中经PCR扩增出APP基因,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染SH-SY5Y细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,通过印迹法(Western blot)检测APP的表达。结果 pcDNA3.1(+)-APP重组体经PCR扩增后片段大小约为2 300 bp,与预期相同。测序结果与目的序列相同,重组体载体构建成功。Western印迹检测到SH-SY5Y细胞中APP的表达。结论成功构建pcDNA3.1(+)-APP真核表达载体并稳定转染SH-SY5Y细胞,成功表达了目的基因,为进一步研究阿尔茨海默病分子学机制奠定了基础。
- 孙立伟姜锐
- 关键词：APP真核表达载体阿尔茨海默病
