国家自然科学基金(39830010)
- 作品数:18 被引量:31H指数:4
- 相关作者:谭华荣聂丽平贾君永田宇清陈蔚更多>>
- 相关机构:中国科学院辽宁师范大学四川大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家杰出青年科学基金The Royal Society更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 天蓝色链霉菌分化调控基因scrX的功能研究被引量:5
- 2000年
- 克隆天蓝色链霉菌中一个新基因scrX并进行了序列分析,利用基因破坏策略 进行了该基因的功能研究.结果表明,scrX基因由660个碱基组成,编码产物是一个220 个氨基酸残基的蛋白质;该基因含有3个在链霉菌中的稀有密码子──AAA,AAA和 ATA,是典型的在翻译水平上受到严紧调控的分化调控基因.氨基酸序列同源性比较 结果表明,scrX编码蛋白属于原核生物转录调控蛋白Ic1R家族.基因功能研究结果揭示, scrX基因在天蓝色链霉菌孢子形成中可能起正调控作用.
- 杨海花田宇清贾君永谭华荣K.F.Chater
- 关键词:天蓝色链霉菌
- 圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质
- 2002年
- 圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶基因naoA在大肠杆菌中获得了成功表达 ,从含有重组质粒pNA1 0 1 (pET2 3b∷naoA)的工程菌株BL2 1 (DE3 )中分离纯化了硝基烷类氧化酶 ,SDS PAGE检测为均一。对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。底物为 1 硝基丙烷、2 硝基丙烷和硝基乙烷时 ,在 0 4mol L的磷酸缓冲液中 ,酶的最适反应pH值为 7~ 8,最适反应温度为48℃~ 5 6℃。室温保存 6d后 ,酶的活性保持了 43 3 % ,但对 6 0℃以上的高温敏感。硫醇化合物如巯基乙醇、还原型谷胱甘肽不同程度地抑制酶活性 ,特别是NADH ,其浓度为 1mmol L时 ,酶活性几乎全部丧失。以 1 硝基丙烷为底物时 ,NaoA的Km 为 3 5 7mmol L ,Vmax 为0 1 99μmol (μg .min) 。
- 张集慧马文勃谭华荣
- 关键词:圈卷产色链霉菌分离纯化酶学性质
- 圈卷产色链霉菌分化早期基因——samfR的研究被引量:2
- 1999年
- 以链霉菌发育调控启动子PTH4 直接控制的下游部分基因片段为探针 ,在圈卷产色链霉菌中克隆到 1个 4.6kb的DNA片段 ,该片段除含有sawD基因外 ,其中1 .4kb的PvuⅡDNA片段对圈卷产色链霉菌的分化有促进作用 .序列分析及同源性比较表明 ,开放阅读框架 (ORF)由 6 39个核苷酸组成 ,编码 2 1 3个氨基酸的蛋白 ,该蛋白与红球菌 (Rhodococcusgloberulus) 3_羟苯丙基丙酸 ( 3HPP)代谢合成的调控基因hppR所编码的蛋白有 36 %的氨基酸完全相同和 5 2 %的氨基酸类似 ,该基因称之为samfR基因 .基因功能研究表明 ,samfR基因的破坏使圈卷产色链霉菌不能形成气生菌丝和孢子 ,而发育分化停止在基质菌丝阶段 ,出现光秃型的表型 .
- 田宇清刘钢聂丽平贾君永谭华荣K.F.Chater
- 关键词:基因调控
- 图卷产色链霉菌分化基因-sawB的结构与功能
- 1999年
- 聂丽平王韫恂贾君永田宇清谭华荣
- 关键词:天蓝色链霉菌突变株圈卷产色链霉菌转录调控基因克隆
- 圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因-sanA的克隆、结构和功能
- 1999年
- 贾君永李文利陈蔚聂丽平谭华荣
- 关键词:圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因生物合成途径转化子开放阅读框架
- 天蓝色链霉菌分化调控基因-scrX的功能研究被引量:1
- 1999年
- 杨海花田宇清贾君永谭华荣K.F.Chater
- 关键词:天蓝色链霉菌分化调控稀有密码子发育分化基因破坏圈卷产色链霉菌
- 圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因——sanH和sanI的研究被引量:8
- 2000年
- 通过反向遗传学方法克隆到圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇中约 7 0kb的DNA片段。该片段除含有尼可霉素生物合成基因sanF外 ,对sanF上游约 2 2kb的BglⅡDNA片段进行序列测定及分析表明 ,还含有两个完整的开放阅读框 (ORF)。ORF1由 1 2 33个核苷酸组成 ,ORF2由 1 95个核苷酸组成 ,它们分别编码由 41 0个氨基酸残基和 64个氨基酸残基组成的蛋白质 ,依次命名为sanH和sanI。蛋白序列数据库比较结果表明 ,SanH和SanI与浅灰链霉菌 (Streptomycesgriseolus)中共转录的细胞色素P450 (cytochromeP450 )和铁氧还蛋白 (ferredoxin)有较高的同源性 ,一致性分别为 46%和 56% ,相似性分别为 62 %和70 %。基因功能研究表明 ,sanH基因的破坏虽不影响圈卷产色链霉菌产生的尼可霉素的生物活性 ,但该基因可能参与了尼可霉素羟基化反应的生物合成。
- 陈蔚田宇清杨海花谭华荣
- 关键词:圈卷产色链霉菌
- 圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因sanA的克隆、结构和功能被引量:3
- 2000年
- 圈卷产色链霉菌是尼可霉素产生菌 ,经紫外线诱变后 ,以赤星灰霉为指示菌筛选到遗传稳定的尼可霉素生物合成阻断突变株 ,选择其中的NBB1 9为受体 ,以质粒pIJ70 2为克隆载体 ,从野生型圈卷产色链霉菌的DNA文库中克隆到了 6kb的DNA片段 ,能互补NBB1 9使之恢复尼可霉素的产生能力 .对 6kbDNA片段中的部分片段进行了序列分析 ,结果表明 2 71 0bpDNA片段包含一个 1 36 5bp的完整开放阅读框架 ,编码一个由 45 4个氨基酸残基组成的蛋白质 ,该基因命名为sanA .蛋白序列数据库比较结果表明 ,sanA编码的蛋白质氨基酸序列与Pyrococcushorikoshii的甲基转移酶有较高的同源性 ,35 3个氨基酸残基中有 2 5 %的一致性 .用基因破坏策略研究了sanA的功能 ,野生型菌株sanA基因被破坏后导致失去合成尼可霉素的能力 ,表明sanA是尼可霉素生物合成中的一个新的重要基因 .
- 贾君永李文利陈蔚聂丽平谭华荣
- 关键词:链霉菌尼可霉素生物合成基因克隆抗生素
- 圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因sanB的克隆、结构和功能被引量:1
- 2000年
- 从圈卷产色链霉菌 7100中克隆到 6 kb与尼可霉素合成有关的 DNA片段,对其中的部分片段进行了序列分析,其中 1.9 kb的 Tthl111I片段含有一个 1740 bp的完整可读框,起始密码子为100 bp处的 GTG,终止密码子为 1840 bp处的 TGA,编码一个由 580个氨基酸残基组成的蛋白质该基因命名为sanB.蛋白序列数据库同源性比较结果表明,sanB的编码产物与天蓝色链霉菌中组氨酸磷酸氨基转移酶有31%的一致性和47%的相似性.采用基因破坏策略研究了sanB的功能,发现sanB基因的破坏导致野生型菌株失去合成尼可霉素的能力,结果揭示sanB是尼可霉素生物合成中一个新的重要基因.
- 李文利贾君永胡永松王忠彦谭华荣
- 关键词:圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因克隆
- 尼可霉素(Nikkomycins)多组分结构及其生物合成相关基因的研究进展被引量:9
- 2000年
- 尼可霉素是一种新的抗真菌抗生素 ,在分离到的 2 0多种活性单组分中 ,X、Z、I、J为主要生物活性组分。本文介绍了尼可霉素的结构 。
- 陈蔚谭华荣
- 关键词:尼可霉素生物活性生物合成基因抗生素