国家林业局948项目(991020)
- 作品数：4 被引量：69H指数：3
- 相关作者：沈桂芳李轶女苏宁孙萌倪丕冲更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所浙江大学中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 丙型肝炎病毒融合抗原基因NS3CE对番茄的遗传转化被引量：14
- 2003年
- 丙型肝炎病毒是危害人类健康重要的病源之一 ,研制安全、经济、有效和易于推广使用的抗病毒疫苗是预防和控制 HCV的有效手段。本实验用 PCR方法克隆了 HCV中能够产生中和性抗体、具有很好免疫原性的非结构 N S3区基因片段及核心抗原 CE基因片段 ,并在两段基因之间加入连接肽 SPGS的密码子序列 ,构建成融合抗原基因 N S3- CE。将该融合基因连接到载体 p BI12 1上 ,构建植物表达载体 p BINS3CE。通过根癌农杆菌 EHA10 5介导获得转基因番茄。并进行了 PCR扩增、Southern杂交及 RT- PCR等分子检测 ,结果证明外源基因已整合到转基因番茄的基因组中 ,并在转录水平得到表达。
- 李轶女张中林苏宁孙萌倪丕冲沈桂芳
- 关键词：丙型肝炎病毒番茄转基因番茄
- 蛋白质剪接及在蛋白质工程中的应用被引量：3
- 2004年
- 蛋白质剪接是蛋白质内含肽介导的,一种在蛋白质水平上翻译后的加工过程,它由一系列分子内的剪切-连接反应组成。蛋白质内含肽是一个蛋白质前体中的多肽序列,可以催化自身从蛋白质前体中断裂,使两侧的蛋白质外显肽连接成成熟的蛋白质。蛋白质内含肽的发现,不仅丰富了遗传信息翻译后加工的理论,在实践中也有广泛的应用前景。
- 赫冬梅钱凯先沈桂芳
- 关键词：蛋白质剪接蛋白质工程
- 水稻叶绿体表达体系的建立及抗PPT叶绿体转化植株的获得被引量：22
- 2007年
- 【目的】建立外源基因在水稻叶绿体中的表达体系。【方法】通过分析已公布的水稻叶绿体基因组全序列及其基因分布特点,选择ndhF与trnL的基因间序列作为除草剂PPT抗性基因bar定点整合的位点。以水稻叶绿体基因组DNA为模板,采用PCR方法克隆了两个适于水稻叶绿体基因组遗传转化的同源片段,构建了含水稻叶绿体16S高效表达启动子、外源基因bar、psbA基因的3′序列(终止子)以及两个同源片段的水稻叶绿体特异表达载体pRB。【结果】采用基因枪法转化水稻品种中花10号幼穗诱导的愈伤组织,并再生植株,获得转化体后代种子。对转化植株进行的分子检测结果表明,外源基因bar可能被整合到水稻叶绿体基因组中。后代种子的遗传学分析显示,外源基因bar可正常表达并遗传。【结论】利用所建立的水稻叶绿体外源基因表达体系,外源基因bar既可在水稻叶绿体基因组中正常表达,还可作为转化体筛选时的除草剂抗性选择标记。
- 李轶女孙丙耀苏宁孟祥勋张志芳沈桂芳
- 关键词：水稻BAR基因叶绿体转化
- 水稻叶绿体16S启动子克隆改造、载体构建及转化研究被引量：31
- 2003年
- 利用PCR方法从水稻叶绿体基因组DNA中分离 1 6S启动子 ,并在其下游加入rbcL基因SD序列 ,以增强该启动子的翻译能力 ;序列分析表明 ,除加入的SD序列外 ,扩增片段与水稻 (Oryzasativa)叶绿体基因组DNA序列 1 6S启动子相应区域同源性为 1 0 0 %。将 1 6S启动子与bar基因和gfp基因的融合基因连接 ,以psbA基因的 3′序列为终止子 ,并以烟草叶绿体trnH_psbA和trnK为同源片段构建了烟草叶绿体表达载体pR1 6S。用基因枪转化烟草 ,转化植株经Southern、Northern检测及后代遗传学分析 ,发现1 6S启动子具有启动活性 。
- 苏宁孙萌李轶女倪丕冲沈桂芳
- 关键词：水稻叶绿体克隆
