您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(81072254)

作品数：26 被引量：109H指数：6
相关作者：杨方魏中秋徐洪孙月邓海静更多>>
相关机构：河北联合大学华北理工大学唐山工人医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 26篇中文期刊文章

领域

  • 26篇医药卫生

主题

  • 10篇肺成纤维细胞
  • 9篇N-乙酰基-...
  • 7篇蛋白
  • 7篇通路
  • 7篇转化生长因子...
  • 7篇矽肺
  • 6篇纤维细胞
  • 6篇激酶
  • 6篇胶原
  • 6篇成纤维细胞
  • 6篇PEROXI...
  • 5篇矽肺大鼠
  • 5篇细胞
  • 5篇纤维化
  • 5篇介导
  • 4篇天门冬氨酰
  • 4篇转化生长因子
  • 4篇纤维细胞增殖
  • 4篇化生
  • 4篇肌成纤维细胞

机构

  • 19篇河北联合大学
  • 7篇华北理工大学
  • 3篇唐山工人医院
  • 2篇河北医科大学
  • 2篇唐山市妇幼保...
  • 2篇河北省煤矿卫...
  • 1篇天津医院
  • 1篇青县人民医院

作者

  • 19篇杨方
  • 15篇魏中秋
  • 14篇徐洪
  • 10篇孙月
  • 8篇邓海静
  • 6篇王瑞敏
  • 6篇马文东
  • 6篇程华
  • 6篇李淑钰
  • 6篇袁媛
  • 6篇杨奕
  • 4篇张丽娟
  • 4篇于婉莹
  • 3篇李世峰
  • 3篇孙影
  • 2篇李倩
  • 2篇刘宝欣
  • 2篇袁瑗
  • 2篇贾艳春
  • 2篇胡亚萍

传媒

  • 7篇中华劳动卫生...
  • 6篇解剖学杂志
  • 3篇广东医学
  • 2篇中国职业医学
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国动脉硬化...
  • 1篇山东医药
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇中国新药与临...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇重庆医学
  • 1篇环境与职业医...

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2017
  • 2篇2016
  • 6篇2015
  • 6篇2014
  • 5篇2013
  • 3篇2012
  • 2篇2011
共 26 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
细胞外信号调节激酶1/2通路在Peroxiredoxin-1抑制转化生长因子-β_1诱导的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达中的作用被引量：6
2015年
目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白中的作用,及新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对该作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞随机分为4组:对照组(0.4%血清)、TGF-β1组(5μg/L)、阴性转染组(TGF-β1+阴性对照si RNA)和Prx-1 si RNA转染组(TGF-β1+Prx-1 si RNA)。采用脂质体转染法转染si RNA,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后Prx-1 m RNA表达;Western blot检测Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ERK1/2及Prx-1表达;2,7-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平。结果 Prx-1 si RNA转染肺成纤维细胞后,Prx-1 m RNA表达明显降低,最大抑制率为92%。与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及Prx-1蛋白的表达水平均明显提高。与TGF-β1组比较,阴性转染组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、ROS、p-ERK1/2水平进一步提高,而Prx-1蛋白的表达被抑制。结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并促进ERK1/2通路的激活,导致Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成增加,而Prx-1 si RNA可通过提高ROS水平进一步促进TGF-β1该作用。
孙影贾艳春魏中秋冯莉范玉磊梁婷婷杨方
关键词：细胞外信号调节激酶1/2转化生长因子-Β1
Prx-1基因沉默对TGF-β_1诱导肺成纤维细胞增殖、ROS水平、p-AKT蛋白表达的影响被引量：4
2016年
目的观察硫氧还原蛋白过氧化物酶1(Prx-1)基因沉默对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞增殖、活性氧簇(ROS)水平及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的影响。方法体外培养肺成纤维细胞MRC-5,并分为对照组、TGF-β1组、阴性转染组和实验组。阴性转染组和实验组分别通过脂质体Lipofectamine2000转染阴性对照siRNA及设计好的3个Prx-1 siRNA(Prx-1 siRNA-209、Prx-1 siRNA-289、Prx-1 siRNA-453),培养48 h,real-time PCR法检测Prx-1 mRNA,选取转染Prx-1 siRNA-453的细胞用于后续实验。除对照组外,其余三组给予TGF-β1(5μg/L)刺激。TGF-β1刺激24 h后,MTT实验观察细胞增殖情况,2,7-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)实验检测ROS水平;TGF-β1刺激45min后,Western blotting法检测p-AKT蛋白。结果对照组、TGF-β1组、阴性转染组、实验组OD值分别为0.56±0.07、0.81±0.10、0.88±0.18、1.16±0.18,ROS水平分别为2 922±291、4 348±484、4 660±375、5 415±436;实验组细胞增殖情况及ROS水平与其余三组相比,P均<0.01;TGF-β1组、阴性转染组与对照组相比,P均<0.01。对照组、TGF-β1组、阴性转染组、实验组细胞中p-AKT蛋白相对表达量分别为0.45±0.05、0.60±0.07、0.57±0.07、0.77±0.09;实验组与其余三组相比,P均<0.01;TGF-β1组与对照组相比,P<0.01。结论Prx-1基因沉默可增强TGF-β1对肺成纤维细胞的增殖诱导作用,上调细胞内ROS水平和p-AKT蛋白表达。
刘宝欣刘英宇魏中秋梁婷婷范玉磊杨方孙影
关键词：肺成纤维细胞基因沉默活性氧簇
Peroxiredoxin-1基因沉默对转化生长因子β1促进肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响被引量：4
2016年
目的探讨Peroxiredoxin-1(Prx-1)基因沉默对转化生长因子β1(TGF-β1)促进肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型胶原的影响及其作用机制。方法体外培养肺成纤维细胞分为4组:对照组(0.4%血清),TGF-β1组(5μg/L),TGF-β1+阴性转染组(5μg/L TGF-β1+阴性对照siRNA),TGF-β1+Prx-1siRNA转染组(5μg/L TGF-β1+Prx-1siRNA)。利用脂质体Lipo2000将阴性对照siRNA和Prx-1siRNA分别转染到TGF-β1+阴性转染组和TGF-β1+Prx-1siRNA转染组的肺成纤维细胞中,转染48h后用于后续实验。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测转染后各组的Prx-1mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Akt(p-Akt)及Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白水平,2,7-二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平。结果 (1)Prx-1siRNA转染肺成纤维细胞后,TGF-β1+Prx-1siRNA转染组的Prx-1mRNA表达明显降低。(2)与对照组比较,TGF-β1组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-Akt蛋白水平均明显增加(0.34±0.06 vs.0.58±0.06、0.42±0.05 vs.0.56±0.06、2 988±379 vs.4 315±580和0.29±0.05 vs.0.66±0.07,差异有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β1组比较,TGF-β1+阴性转染组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及pAkt水平无明显变化(P>0.05),但TGF-β1+Prx-1siRNA转染组Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-Akt蛋白水平均进一步增高(0.58±0.06 vs.0.79±0.09、0.56±0.06 vs.0.77±0.08、4 315±580 vs.5 841±782和0.66±0.07 vs.0.93±0.15,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并由此促进Akt的激活和肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型胶原;而沉默Prx-1基因可激活ROS/Akt通路,从而有助于TGF-β1促进肺成纤维细胞合成胶原。
刘宝欣刘英宇魏中秋梁婷婷范玉磊杨方孙影
关键词：转化生长因子-Β1
新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1对大鼠肺成纤维细胞增殖和JNK通路的影响被引量：5
2014年
目的探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;空转染组:利用脂质体Lipo2000将空载体转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;Prx-1转染组:Prx-1真核表达质粒转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞。质粒转染采用脂质体转染法;免疫荧光检测质粒转染和8-OhdG(DNA氧化产物)的水平;MTT法检测FB增殖;Western blot检测JNK和Prx-1的表达情况。结果质粒成功转染入FB,转染Prx-1真核表达质粒使Prx-1在FB内蛋白表达水平增高。与对照组比较,TGF-β1组的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表达均明显增加。与TGF-β1组比较,空转染组中的上述观察指标无明显变化,但在Prx-1转染组,这些指标均明显下降。结论 TGF-β1能够诱导FB生成反应性氧物质(ROS),并由此促进JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1诱导的FB增殖。
孙影魏中秋胡亚萍郑素琴刘宝欣贾艳春杨方
关键词：C-JUN氨基末端激酶转化生长因子-Β1
Ac-SDKP对AngⅡ诱导的人胚肺MRC-5细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用
2014年
目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用.方法 实验分为2部分：（1）采用不同浓度AngⅡ诱导48 h,采用100 nmol/L AngⅡ诱导不同时间点,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;（2）实验分组为对照组、AngⅡ诱导组、Ac-SDKP干预组、cAMP直接激活的交换蛋白（Epac）蛋白特异性激活剂（8-Me-cAMP）干预组,免疫细胞化学染色法观察α-SMA的表达,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原、α-SMA、血清反应因子（SRF）及其转录辅因子肌相关转录因子（MRTF）-A、Epac 1、2的表达.结果 AngⅡ能够明显诱导MRC-5细胞Ⅰ型胶原和α-SMA的表达,并具有一定的剂量和时间依赖效应.免疫细胞化学染色可见AngⅡ诱导组细胞质内出现明显的α-SMA阳性显色,同时诱导组SRF、MRTF-A、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调,分别是对照组的3.4、3.5、3.3、6.8倍,Epac1蛋白表达下调,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与AngⅡ诱导组比较,8-Me-cAMP干预组和Ac-SDKP干预组胞质内α-SMA阳性显色减弱,同时SRF、MRTF-A、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达下调,Epac1蛋白表达上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Ac-SDKP能够通过上调Epac1蛋白抑制AngⅡ诱导人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞分化.
李世峰杜世璞薛新新徐丁洁徐洪孙月邓海静杨奕魏中秋田景瑞杨方
关键词：肺纤维化
AKT通路在Peroxiredoxin-1抑制转化生长因子β_1诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用被引量：1
2015年
目的探讨AKT通路在转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用,及硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对此作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞,随机分为4组:(1)对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液孵育培养;(2)TGF-β_1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞;(3)TGF-β_1+转染对照组:空质粒载体转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞;(4)TGF-β_1+Prx-1转染组:Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞。脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞,Western blot法检测Prx-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原、磷酸化AKT(p-AKT)表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平。结果 (1)Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞后,Prx-1蛋白表达高于TGF+β_1+转染对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)与对照组比较,TGF-β_1组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS水平及p-AKT蛋白表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与TGF-β_1组比较,TGF-β_1+转染对照组的Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT水平无明显变化(P>0.05),但TGF-β_1+Prx-1转染组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β_1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并由此促进AKT的激活和肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β_1的作用。
贾艳春刘英宇孙影范玉磊梁婷婷杨方
关键词：AKT胶原肺成纤维细胞
TGF-β_1介导的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纤维细胞分化中的调节作用被引量：21
2013年
目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)介导的RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路在调控肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程中的作用。方法:胰酶消化法获得原代培养的肺成纤维细胞,进行以下实验:(1)观察TGF-β1诱导肺成纤维细胞不同时间后p-RhoA、ROCK、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基(pMBS)、血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型和III型胶原蛋白表达变化;(2)将细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组和Y-27632(ROCK通路阻滞剂)干预组,免疫细胞化学染色与Western blotting法分别观察与检测ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白在细胞内的定位分布与表达。结果:(1)经TGF-β1诱导24 h后,大鼠肺成纤维细胞胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝。随着TGF-β1诱导刺激时间的延长,p-RhoA、ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达逐渐增高,其中RhoA/ROCK信号(p-RhoA、ROCK、p-MBS)、SRF和α-SMA蛋白分别在诱导后6 h、12 h和24 h达到高峰。I型胶原和III型胶原蛋白表达均在24 h达高峰,分别为诱导前的2.19和3.04倍(P<0.05)。(2)与TGF-β1诱导分化组比较,当给予Y-27632干预后,在相应时点ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1通过ROCK信号转导通路的活化,刺激了大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,进而促进了胶原蛋白的合成,可能在(矽)肺纤维化形成过程中发挥着重要作用。
马文东袁媛杨奕徐洪邓海静于婉莹孙月魏中秋杨方
关键词：转化生长因子Β肌成纤维细胞肺纤维化
AcSDKP对矽肺大鼠TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导途径调节与作用被引量：5
2014年
目的 观察转化生长因子-β （TGF-β）Ⅰ型、Ⅱ型受体、P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在矽肺大鼠和肺成纤维细胞的分布与表达,探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导通路调节与其抗矽肺纤维化作用的关系.方法 非暴露式支气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,分为对照组,矽肺模型组和AcSDKP治疗组（每组10只）.培养新生大鼠肺成纤维细胞,分为对照组、TGF-β1刺激组、受体阻断剂组、P38MAPK特异性抑制剂干预组和AcSDKP干预组.免疫组化法、免疫印迹法（Western-blot）检测TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体、P38 MAPK蛋白以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达.用实时定量荧光聚合酶链式反应（real-time PCR）法检测TGF-β Ⅰ型和Ⅱ型受体mRNA的表达.用激光扫描共聚焦显微镜法检测磷酸化P38在肺成纤维细胞内分布与核转位的情况.结果 在动物模型中,AcSDKP治疗组大鼠肺组织内TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是矽肺模型组的86.12％、41.01％和42.63％;AcSDKP治疗组Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达,分别是矽肺模型组的89.05％和52.71％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.在培养的肺成纤维细胞实验中,AcSDKP干预组TGF-β1诱导刺激的TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体mRNA的表达分别是TGF-β1刺激组的42.26％和54.33％;TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是TGF-β1刺激组的58.14％、51.40％和45.6％;AcSDKP干预组磷酸化P38MAPK蛋白由胞质向胞核的转位,核浆比值减少,为TGF-[β1刺激组的68.60％;Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达降低,分别是TGF-β刺激组的58.04％和44.74％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 AcSDKP能够抑制TGF-β受体介导的P38 MAPK信号转导途径,从而抑制胶原蛋白的表达,进而发挥其抗矽肺纤维化的作用.
魏中秋孙月程华马文东徐洪李倩张丽娟王瑞敏杨方
关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸矽肺受体
新型过氧化物酶peroxiredoxin-1对大鼠肺成纤维细胞JNK介导的Ⅰ和Ⅲ型前胶原合成的影响被引量：1
2014年
目的：探讨活性氧（ROS）在转化生长因子（TGF-β1）激活c-Jun N末端激酶（JNK）促进肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型前胶原过程中的作用,并观察新型过氧化物酶peroxiredoxin-1 （Prx-1）是否通过抑制活性氧来抑制TGF-β1促纤维化作用.方法：采用脂质体转染法转染真核质粒;免疫荧光检测质粒转染和8-OHdG（DNA氧化产物）的水平;免疫印迹检测Ⅰ/Ⅲ型前胶原、磷酸化JNK和Prx-1的表达.结果：与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ/Ⅲ型前胶原、8-OHdG及磷酸化p-JNK的表达水平均明显增加.与TGF-p1组比较,空载体组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的指标均明显下降.结论：TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成活性氧,并由此促进JNK的激活和Ⅰ/Ⅲ型前胶原合成增加,而Prx-1则通过抑制活性氧来抑制TGF-β1的促纤维化作用.
孙影魏中秋胡亚萍郑素琴吴剑冯莉杨方
关键词：C-JUN氨基末端激酶转化生长因子-Β1前胶原
Ac-SDKP对ROCK通路介导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用被引量：6
2013年
目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是否能够通过对转化生长因子-β1（TGF-β1）介导的ROCK通路的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化.方法 胰酶消化法原代培养肺成纤维细胞,取4代肺成纤维细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组、Y-27632干预组和Ac-SDKP干预组.激光共聚焦扫描显微镜观察ROCK、SRF以及d-SMA在细胞内的定位与分布情况;蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测ROCK、SFR、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白在肺成纤维细胞的表达;实时定量荧光聚合酶链反应法（Real time PCR）检测ROCK、SFR、α-SMA mRNA的表达.结果 与对照组相比较,给予TGF-β1诱导刺激后,激光共聚焦扫描显微镜显示胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝,诱导刺激6、12、24 h后,ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增强,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与TGF-β1诱导分化组比较,给予Y-27632干预后,在相应时间点ROCK、SRF、d-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.给予Ac-SDKP干预后,在相应时间点ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达也较TGF-β1诱导分化组明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑大鼠成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化和抑制胶原蛋白的合成,可能是Ac-SDKP发挥其抗（矽）肺纤维化的作用机制之一.
袁媛杨方徐洪于婉莹孙月邓海静马文东魏中秋王瑞敏
关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
全选 清除 导出
共3页<123>
聚类工具0