吉林省科技发展计划基金(200705372)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：吉林大学广东医学院吉林大学第一医院更多>>
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- 毛囊来源的表皮干细胞在不同培养条件下细胞生长情况的比较及效果评价
- 2009年
- 目的:探讨毛囊来源的表皮干细胞(ESCs)培养条件,阐明成纤维细胞在ESCs培养中的作用。方法:以拔出的毛发为细胞来源,通过细胞培养的方式,比较在无包被、鼠尾胶原包被、Ⅳ型胶原包被和3T3成纤维细胞作为饲养层细胞条件下细胞生长情况。并通过RT-PCR和免疫荧光等方法对培养出的细胞进行细胞角蛋白(CK)15的检测。结果:在无包被、鼠尾胶原包被、Ⅳ型胶原包被和3T3成纤维细胞作为饲养层细胞条件下,以3T3成纤维细胞作为饲养层对细胞的生长最为有利;同时,对不同毛囊节段(毛球、中间节段、隆突和峡部)的培养表明,毛囊隆突部位的细胞增殖能力最强。RT-PCR及免疫荧光结果表明,应用此种方法从毛囊中分离培养的细胞表达表皮干细胞的特异性标志CK15。结论:以3T3成纤维细胞作为饲养层细胞,可以从拔出毛发根部的隆突部位培养出ESCs,此培养条件对细胞的生长最为有利。
- 董智勇李玉林徐红张丽红
- 关键词：表皮干细胞细胞培养毛囊
- 大鼠羊膜上皮细胞神经营养因子基因的表达被引量：2
- 2009年
- 目的建立胚胎不同时期羊膜上皮细胞(AECs)表达脑源性神经营养因子(BDNF)与神经营养素-3(NT-3)mRNA的时相图,找出AECs分泌BDNF、NT-3的最佳时期。方法采用实时荧光定量PCR检测胚胎不同时期(11,13,17,21d)AECs中BDNF与NT-3 mRNA的表达差异。结果绘制出大鼠AECs中BDNF、NT-3的基因表达差异时程图:BDNF的表达随着胚胎发育持续上调,至17d达到最高,然后其表达开始下调;NT-3的表达在13d达到最高,然后开始下调。结论初步确定13～17d是大鼠AECs分泌BDNF、NT-3的最佳时期。
- 董智勇李忱陈东孟晓婷李玉林
- 关键词：羊膜上皮细胞脑源性神经营养因子神经营养素-3实时荧光定量PCR
- NT-3基因逆转录病毒表达载体的构建
- 2008年
- 目的:分离大鼠神经营养素-3(NT-3)基因,构建pLEGFP-NT3逆转录病毒表达载体。方法:利用RT-PCR技术钓取大鼠NT-3基因,克隆到测序载体pMD18-T中,测序后再亚克隆到逆转录病毒载体pLEGFP-C1中,通过Lipofectamine 2000导入包装细胞PA317。结果:RT-PCR产物为776bp,经测序鉴定虽与GenBank中NT-3基因的序列相差1个碱基,但不影响NT-3蛋白质的表达;构建的pLEGFP-NT3重组载体经酶切鉴定,证实NT-3基因片段正确插入pLEGFP-C1载体中。转染包装细胞后,激光共聚焦显微镜下观察导入NT-3基因的PA317细胞发绿色荧光。结论:分离得到了大鼠NT-3基因成功构建了pLEGFP-NT3表达载体。
- 董智勇李忱陈东孟晓婷陈雷路来金
- 关键词：神经营养素3逆转录病毒载体
