国家自然科学基金(81271386)
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
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- X线照射后体外共培养内皮细胞与星形胶质细胞Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF表达变化及意义被引量：2
- 2014年
- 目的：观察 X 线照射体外共培养的内皮细胞与星形胶质细胞后血管生成素-1（Ang-1）、血管生成素-2（Ang-2）、受体Tie-2及血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化，探讨VEGF、Ang-1、Ang-2及Tie-2和放射性脑损伤（ RBI）的关系。方法利用Transwell培养板，将小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3与星形胶质细胞共培养。以5、10、20、30 Gy剂量的X线照射共培养的内皮细胞与星形胶质细胞后继续培养24 h，并设正常对照组即未照射组。 Western印迹法检测细胞VEGF、Ang-1、Ang-2及Tie-2蛋白的表达情况。结果5、10、20、30 Gy剂量组VEGF的蛋白表达均高于对照组[（1.71±0.11）、（2.03±0.05）、（2.20±0.06）、（2.19±0.08）比（1.26±0.10），P＜0.05]；5、10、20、30 Gy剂量组Ang-1的蛋白表达均低于对照组[（2.27±0.07）、（2.28±0.06）、（2.01±0.05）、（1.54±0.08）比（2.46±0.04），P＜0.05]；5、10、20、30 Gy剂量组Tie-2的蛋白表达均低于对照组[（2.40±0.10）、（2.47±0.06）、（1.05±0.09）、（1.00±0.08）比（4.80±0.07），P＜0.05]；5 Gy和10 Gy剂量组Ang-2的蛋白表达均高于对照组[（2.10±0.07）、（2.43±0.08）比（1.69±0.05）， P＜0.05]；20 Gy和30 Gy剂量组 Ang-2的蛋白表达均低于对照组[（1.12±0.10）、（1.21±0.04）比（1.69±0.05），P＜0.05]。结论 X线能够诱导体外共培养的内皮细胞与星形胶质细胞VEGF、Ang-1、Ang-2及Tie-2的蛋白表达水平发生不同的改变，而这些蛋白水平的不同改变可能与RBI的微血管损伤相关。
- 吴萌萌黄海威周桂娟邓哲治吴小红
- 关键词：内皮细胞星形胶质细胞体外共培养
- 贝伐珠单抗可减轻X线全脑照射小鼠脑血管及血脑屏障损伤被引量：2
- 2017年
- 目的探讨X线全脑照射小鼠经贝伐珠单抗（BVZ）干预后其脑血管及血脑屏障的改变。方法6-7周龄雄性C57BL小鼠按随机数字表法分为正常对照组（n=25）、BVZ组（n=25）、单纯照射组（n=25）。正常对照组小鼠不进行X线全脑照射及给药处理。单纯照射组及BVZ组小鼠麻醉后采用RS2000型X线生物辐照仪照射脑部（照射总剂量30 Gy，分3周照射），且BVZ组、单纯照射组小鼠在首次X线全脑照射同一天起分别腹腔注射10 mg/kg BVZ溶液或等量生理盐水（连续给药10周）。于首次X线全脑照射后11周时取材，采用HE染色观察小鼠脑血管病理改变，采用Western blotting检测小鼠脑组织血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达，采用伊文氏蓝（EB）染色评估小鼠血脑屏障损伤程度，采用免疫荧光双标染色检测小鼠脑组织血管性血友病因子（vWF）、紧密连接蛋白-1（ZO-1）表达。结果与正常对照组VEGF蛋白表达水平、脑组织EB含量[（9.66±0.73） μg/mL]、ZO-1/vWF比值（0.92±0.08）相比，单纯照射组、BVZ组VEGF蛋白表达水平、脑组织EB含量[（16.90±2.15） μg/mL、（12.29±0.96） μg/mL]均明显增高，ZO-1/vWF比值（0.46±0.18、0.75±0.11）均明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）；与单纯照射组相比，BVZ组VEGF蛋白表达水平、脑组织EB含量明显降低，ZO-1/vWF比值明显增高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论BVZ可通过降低VEGF表达水平，从而减轻X线全脑照射后小鼠脑血管及血脑屏障的损伤程度。
- 郭俊杰黄海威何国永谢颖
- 关键词：放射性脑损伤脑血管血脑屏障
- 鼠神经生长因子对全脑照射大鼠空间认知功能的修复作用被引量：17
- 2016年
- 目的本实验通过观察x线照射前后大鼠神经功能的改变，使用鼠神经生长因子进行干预，探讨鼠神经生长因子（mNGF）对全脑照射大鼠的修复作用。方法10周龄雄性SD大鼠利用随机数字表法分为正常对照组（n=15）和照射组（n=40），正常对照组不作处理；照射组x线全脑照射12Gy剂量，照射30d后用随机数字表法分为mNGF组和生理盐水组。mNGF组肌注mNGF，生理盐水组照射等量生理盐水。三组大鼠照射60d后水迷宫实验检测空间记忆功能后取材，采用伊文思蓝（EB）法检测血脑屏障通透性，免疫荧光检测海马neuN、vWF、ZO-1蛋白表达，Western印迹检测大鼠脑部neuN、vWF、ZO．1、VEGF、GFAP的表达情况。结果水迷宫逃避潜伏期时间为正常对照组〈mNGF组〈生理盐水组，其跨越平台次数分别为（3．00±1．08）、（1．50±1．08）、（0．38±0．48）次，差异有统计学意义（P〈0．01）；依文思蓝染料渗出值分别为正常对照组（0．14±0．14）、mNGF组（0．66±0．20）、生理盐水组（1．36±0．27）μg／g，差异有统计学意义（P〈0．05）；免疫荧光中，海马区neuN、vWF、ZO-1蛋白阳性表达数量大小依次为正常对照组、mNGF组和生理盐水组；Western印迹中，正常对照组、mNGF组和生理盐水组3组的neuN、vWF、ZO-1蛋白表达依次降低，而GFAP和VEGF蛋白表达依次升高。结论鼠神经生长因子修复微血管、血脑屏障，促进神经元存活，两方面修复空间认知功能。
- 何国永黄海威邓哲治郭俊杰
- 关键词：颅脑照射神经生长因子
- X线全脑照射对小鼠脑微血管及血脑屏障的影响被引量：5
- 2015年
- 目的 探讨放射性脑损伤中可能存在的脑微血管损伤及血脑屏障破坏情况.方法 70只8周龄雄性BALB/C小鼠应用随机数字表分为照射组和对照组,其中照射组行X线全脑照射（单次10 Gy剂量）.分别在照射后1、7、30、90、180 d取材（每组每个观察点7只小鼠）,采用HE染色观察脑组织微血管形态的改变,采用免疫荧光染色检测全脑第Ⅷ因子相关抗原（vWF）及ZO1蛋白的表达变化.结果 照射后1d开始,照射组小鼠即可见微血管有扩张紊乱,血管内皮细胞与基膜分离,但血管壁仍较薄,血管周隙正常;照射后7d出现血管壁增厚、管腔狭窄;照射后30 d管腔狭窄逐渐加重甚至闭塞,部分血管可见血栓形成,血管周隙开始增大,并持续至180d.与对照组比较,照射后各时间点照射组小鼠脑组织vWF、ZO1蛋白表达阳性细胞数明显减少（vWF：1 d：23.17±2.93 vs 15.80±2.39,7 d：21.25±2.33 vs 11.60±2.30,30 d：19.78±2.16vs 8.20±1.64,90 d：17.21±3.31 vs6.00±2.12,180 d：16.98±1.92 vs 3.80±2.59;ZO1：1 d：26.17±3.31 vs 15.40±1.82,7 d：23.20±2.93vs12.00±1.58,30 d：20.88±2.20vs 9.10±2.55,90 d：18.32±1.87 vs 6.20±1.92,180 d：17.50±1.91vs 2.40±1.52）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;且随着时间延长,照射组小鼠脑组织vWF、ZO1蛋白阳性表达细胞数亦逐渐减少,各时间点间比较差异亦均有统计学意义（P＜0.05）.结论 X线全脑照射能诱导小鼠脑微血管持续损伤及血脑屏障紧密连接破坏,导致放射性脑损伤的发生发展.
- 邓哲治黄海威吴萌萌何国永
- 关键词：X线照射放射性脑损伤微血管血脑屏障
- X线照射后体外培养星形胶质细胞VEGF和GFAP表达变化及意义被引量：7
- 2013年
- 目的研究x线照射体外培养的星形胶质细胞后血管内皮生长因子（VEGF）和胶质原纤维酸性蛋白fGFAP）表达随时问及剂量的变化，探讨星形胶质细胞与放射性脑损伤（RBI）的关系。方法以5、10、15、20Gy剂量的X线照射体外原代培养的星形胶质细胞后继续培养48h，或以20Gy剂量照射后分别培养4、12、24、48h，实验均设正常对照组即未照射组。免疫荧光染色检测GFAP观察各组细胞形态学的变化：DAPI染色观察星形胶质细胞的凋亡；Westernblotting检测细胞GFAP、VEGF蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较，不同剂量照射组星形胶质细胞增生、增多，变形，胞体肥大肿胀，分支增多，突起增粗，GFAP染色加深，且这种变化随照射剂量和时间增加而表现更明显；与正常对照组相比，各剂量照射组星形胶质细胞凋亡率差异无统计学差异f尸〉0．05）：Westernblotting检测显示不同剂量组、20Gy剂量照射不同时间组星形胶质细胞GFAP、VEGF蛋白的表达均不同，差异有统计学意义畔0．05）。与正常对照组相比，5、10、15、20Gy照射组和20Gv剂量照射后各时间组GFAP、VEGF的蛋白表达均增高，且随着照射剂量的增加GFAP、VEGF的蛋白表达亦增高，差异有统计学意义（P〈0．05）。20Gy剂量照射后4～48h内GFAP的表达呈时间依赖性，20Gv剂量照射后4～24h内VEGF的表达呈时间依赖性。结论X线能诱导体外培养的星形胶质细胞活化，GFAP及VEGF的表达呈时间及剂量依赖性增高，VEGF异常高表达可能是造成RBI的重要原因。
- 周桂娟黄海威吴小红吴萌萌
- 关键词：放射性脑损伤星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白
