北京市教育委员会科技发展计划(KM200910025025)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：赵群张玉祥何玥吴玉梅王晓丽更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京妇产医院首都医科大学北京蛋白质组研究中心更多>>
- 发文基金：北京市教育委员会科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 宫颈上皮内瘤变与正常宫颈组织差异表达蛋白分析被引量：2
- 2012年
- 目的探讨蛋白质组学方法筛查正常宫颈与宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织中的差异表达蛋白质标志物,为研究CIN发生的分子机制及临床诊治工作提供依据。方法收集2008年8月至2009年9月间首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科收治的正常子宫颈组织因子宫肌瘤手术行全子宫切除术患者9例为对照组、CIN组织23例(其中CINⅠ7例、CINⅡ8例、CINⅢ8例)。应用二维荧光差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2-DDIGE)及DeCyder软件寻找差异表达蛋白质点,基质辅助激光解析飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)分析差异蛋白质点,数据库搜索鉴定差异表达最明显的S100蛋白家族A9(S100 calcium-binding protein A9,S100A9),真核延长因子1α1(eukaryoticelongation factor 1-alpha-1,eEF1A1)及丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)3种蛋白质;应用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)(其中正常宫颈组织10例、CINⅠ10例、CINⅡ10例、CINⅢ10例)及蛋白印记法(Western blotting)(其中正常宫颈组织12例,CINⅠ～Ⅱ12例,CINⅢ12例)进一步验证上述3种蛋白在CIN组织和正常宫颈组织的表达差异。结果获得CIN组织与正常宫颈组织2-D DIGE图,成功鉴定25个蛋白;免疫组化及蛋白印迹验证结果提示:S100A9蛋白表达于细胞质中,在CIN中表达水平高于正常组,差异有统计学意义(P=0.010);eEF1A1蛋白表达于细胞质中、PKM2蛋白表达于细胞核中,2者在CIN中表达水平均低于正常组,差异有统计学意义(P分别为0.352,0.000)。结论在正常宫颈组织与CIN组织之间存在差异蛋白质表达,S100A9蛋白可能成为辅助诊断CIN的相关标志物,PKM2蛋白可能成为抑制CIN发生的蛋白质,并可根据2种差异蛋白表达预测CIN的发生发展。
- 何玥吴玉梅赵群王晓丽陈硕钱小红张玉祥
- 关键词：蛋白质组学宫颈上皮内瘤变
- 正常宫颈宫颈上皮内瘤变与宫颈鳞癌组织的差异表达蛋白分析被引量：1
- 2013年
- 目的探讨采用比较蛋白质组学方法筛查正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈鳞癌（SCC）组织中的差异表达蛋白，为研究CIN发展为SCC的分子机制及临床诊治工作提供依据。方法收集正常宫颈组织（因子宫肌瘤行全子宫切除术）9例、CIN组织23例（其中CINI级7例、CINII级8例、CINIII级8例）和SCC组织7例。应用二维荧光差异凝胶电泳和DeCyder软件寻找差异表达蛋白质点，基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱仪鉴定差异蛋白质点，数据库搜索差异表达蛋白。收集正常宫颈组织20例、CIN组织60例和SCC组织20例，应用免疫组化法和Westernblot法验证差异最显著的S100蛋白A9（S100A9）、真核翻译延长因子1α1（eEF1A1）和丙酮酸激酶M2（PKM2）在不同宫颈组织中的表达差异。结果建立了分辨率高、重复性好的正常宫颈、CIN与SCC的双向凝胶电泳图谱。选取显著表达差异蛋白质点46个（其中上调27个，下调19个）进行鉴定，成功鉴定出26个蛋白质。免疫组化法检测结果显示，S100A9蛋白主要表达于细胞质，其在正常宫颈组织、CIN组织和SCC组织中的阳性表达率分别为20．0％、70．0％和100．0％，差异有统计学意义（P=0．006）。eEF1A1蛋白主要表达于细胞质，其在正常宫颈组织、CIN组织和SCC组织中的阳性表达率分别为70．0％、73．3％和60．0％，差异无统计学意义（P=0．758）。PKM2蛋白主要表达于细胞核，其在正常宫颈组织、CIN组织和SCC组织中的阳性表达率分别为100．0％、93．3％和75．0％，差异接近有统计学意义（P=0．059）。Westernblot法检测的结果与免疫组化法检测的结果基本一致。结论正常宫颈、CIN和SCC组织间存在蛋白质表达的差异。S100A9、eEF1A1和PKM2可能成为宫颈癌早期诊断的标志物和治疗的新靶点，并为研究CIN发展为宫颈癌的发病机制提供基础。
- 赵群吴玉梅何玥王晓丽陈硕钱小红张玉祥
- 关键词：宫颈肿瘤宫颈上皮内瘤变
