安徽省高校省级自然科学研究项目(2006KJ054A) 作品数:7 被引量:119 H指数:6 相关作者: 樊洪泓 林毅 蔡永萍 李廷春 邱婧 更多>> 相关机构: 安徽农业大学 安徽省农业科学院烟草研究所 更多>> 发文基金: 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
石斛总RNA提取方法的研究 被引量:9 2007年 采用TRIZOL法、异硫氰酸胍法、Tris-硼酸法和改良的RNA提取方法提取石斛的总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取的RNA样品的品质。研究结果表明:改良的RNA提取方法提取的RNA具有28S rRNA和18S rRNA两条清晰的条带,且无降解。OD260nm/OD280nm接近2.0,具有较高的纯度。其它三种方法获得的RNA品质较差,有降解和弥散现象。将改良的RNA提取方法提取的RNA逆转录成cDNA,经RAPD扩增,出现清晰的条带,进一步证明改良的RNA提取方法提取的RNA具有很高的纯度,可以满足进一步分子生物学研究的要求。 樊洪泓 李廷春 林毅 蔡永萍关键词:石斛 总RNA 石斛属几种植物遗传关系的SRAP和RAPD比较分析 被引量:29 2010年 目的利用SRAP和RAPD两种分子标记技术对9份石斛种质进行遗传多样性研究。方法用40对SRAP引物组合和36个RAPD引物分别对供试石斛的基因组DNA进行扩增。结果SRAP引物组合共扩增条带1977条,多态性比率为90.2%,遗传相似系数GS值变化范围为0.3302~0.7892。RAPD引物共扩增出281条带,多态性比率为87.1%,GS值变化范围为0.4942~0.7731。利用两种标记得到的聚类结果存在一定的差异,SRAP聚类结果与传统的基于形态特征建立的分类结果比较一致,较好地体现了供试品种的亲缘关系、地域特性。在9个石斛供试种间,SRAP的标记指数MI值(16.46)是RAPD标记MI值(3.67)的4.5倍,表明SRAP具有更大的标记效率。结论两种标记皆可有效应用于该属植物种质资源的遗传多样性分析。而SRAP标记在石斛的遗传多样性与亲缘关系的研究中,则表现出了极大的优越性。 樊洪泓 李廷春 邱婧 林毅 蔡永萍关键词:石斛属 SRAP RAPD 利用RAPD分析药用石斛的遗传多样性及亲缘关系 被引量:10 2008年 通过对9种药用石斛进行遗传多样性和亲缘关系的分析,为更好地开发利用石斛资源奠定基础。采用RAPD技术,应用NTSYS软件对9种石斛的RAPD-PCR结果进行分析。利用从103条随机引物中筛选出的70条随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到520条带,其中多态性带有491条,多态性百分率为94.42%。采用UPGMA类平均法对扩增出的谱带进行遗传聚类分析,得出反映各种间亲缘关系的树状图。在遗传距离(D)=0.44处,可将供试材料分为2类,RAPD对基因组的分析结果与传统分类学的结果差异不大。试验结果表明,RAPD技术可有效地应用于药用石斛的遗传多样性及亲缘关系的研究。 邱婧 樊洪泓 李廷春 林毅 蔡永萍关键词:药用石斛 RAPD 强光胁迫下外源NO对霍山石斛叶绿素荧光和抗氧化系统的影响 被引量:11 2008年 以兼性景天酸代谢(CAM)植物霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)为材料,研究强光胁迫条件下,外源NO对其叶绿素荧光和抗氧化系统的影响。结果表明:0.1mmol.L-1硝普钠(SNP)处理提高了其光合系统Ⅱ(PSⅡ)的光能转换效率和潜在活性,增加了过剩光能的非光化学耗散,缓解了光抑制的发生,同时通过增强抗氧化系统的活性氧清除能力,有效保护了光合机构免受强光胁迫的伤害,PSⅡ反应中心得以较快恢复。而经0.5mmol.L-1SNP处理后,霍山石斛的光能转换系统未能通过有效的光能转换和非光化学反应耗散过剩的光能,降低了抗氧化系统中SOD、POD和CAT的活性,加剧了PSⅡ反应中心光抑制的发生。 樊洪泓 李廷春 李正鹏 林毅 蔡永萍关键词:霍山石斛 一氧化氮 强光胁迫 药用石斛遗传多样性的SRAP标记研究 被引量:51 2008年 目的:利用SRAP分子标记技术进行药用石斛的遗传多样性研究。方法:采用在本实验中优化的SRAP反应体系,应用NTSYS软件对9种供试石斛的SRAP-PCR结果进行分析。结果:从中筛选得到40对多态性引物组合,共产生1 782条多态性条带,平均每个引物组合产生44.55条多态性条带,显示了较高的多态性比率。聚类分析40对引物组合的扩增结果,供试材料分为2大类,Jaccard’s遗传相似系数在0.3302~0.7892。结论:SRAP技术可有效地应用于药用石斛的遗传多样性及亲缘关系的研究。 樊洪泓 李廷春 邱婧 李正鹏 林毅 蔡永萍关键词:药用石斛 SRAP 利用分子标记检测霍山石斛不同继代次数试管苗的遗传稳定性 被引量:19 2008年 分别以霍山石斛成熟种子、茎段和愈伤组织为试管苗的初始材料进行继代培养,利用RAPD、ISSR以及DALP3种分子标记方法对不同继代次数(1 ̄4代)的霍山石斛试管苗进行分析,结果表明:以成熟种子和茎段为材料的继代培养,其试管苗后代在所检测的范围内未探查到变异,具有较高的遗传稳定性。以愈伤组织为材料的继代培养,其试管苗后代从第4代开始,部分引物带型发生变化,但变化甚微,仅是带型强弱的改变。以愈伤组织为材料的继代培养物种内存在一定的变异,但在4代以内仍可稳定遗传。3种继代方式比较之下,以成熟种子和茎段为材料的继代培养是更能稳定遗传的组培快繁方式。 邱婧 樊洪泓 秦自清 林毅 蔡永萍关键词:霍山石斛 试管苗 继代次数 分子标记 强光胁迫下外源NO对霍山石斛叶绿素荧光的影响 被引量:2 2008年 以兼性景天酸代谢CAM植物霍山石斛为材料,研究了强光胁迫条件下,外源一氧化氮(NO)对霍山石斛叶绿素荧光参数的影响。结果表明:在强光胁迫下,0.1mmol/L硝普钠(SNP,NO供体)处理显著缓解强光对霍山石斛光合系统Ⅱ(PSⅡ)的抑制,霍山石斛PSⅡ荧光参数潜在光化学效率(Fv/Fm)、实际光化学效率(ΦPSⅡ)、光化学猝灭系数qL、非光化学猝灭系数NPQ和ΦNPQ下降缓慢,且非光化学猝灭系数ΦNO值较低,PSⅡ反应中心恢复较快,说明该处理缓解了光抑制的发生,保护了光合机构免受强光胁迫的伤害,而经0.5mmol/L SNP处理后,霍山石斛的Fv/Fm、ΦpsⅡ、qL、NPQ和ΦNPQ下降程度增加,ΦNO也较高,恢复较慢,表明该处理加剧了PSⅡ反应中心光抑制的发生。可见,高浓度(0.5mmol/L)SNP处理可加剧光抑制的发生,而低浓度(0.1mmol/L)SNP处理可缓解强光对石斛的胁迫作用。 樊洪泓 李廷春 李正鹏 林毅 蔡永萍关键词:霍山石斛 NO 强光胁迫