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卵泡抑素对牛胚胎早期发育的影响: 2012年; 利用添加外源性卵泡抑素或抑制卵泡抑素基因表达的方法,以牛受精胚胎为研究对象,结果显示,胚胎阶段适当的添加卵泡抑素,可以加快胚胎发育,不但提高卵裂率,还可以在受精后7d提高囊胚发育率,这其中10μg/L的卵泡抑素为最佳添加量,达到35%的囊胚率。研究还发现,早期阶段沉默卵泡抑素基因,不会影响囊胚率,与处理组无显著差别。结果表明,可能在早期的胚胎发育的最初阶段,卵泡抑素并不是必须的,但如果外源性的添加适量的卵泡抑素可以在正常的基础上提高发育率。; 郭镇华刘娣马红李忠秋付博张东杰汪亮冯艳忠唐晓东张淼王欣张海波; 关键词：卵泡抑素胚胎

冷应激下民猪黑素皮质素受体基因的表达变化被引量：4: 2012年; 黑素皮质素受体3(melanocortins 3 receptors,MC3R)是G-蛋白耦联受体超家族的成员之一。研究采用Real-time PCR的方法,对冷应激下民猪腿肌内MC3R基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,冷应激下,MC3R基因的表达出现了显著地上升(P<0.05)。据此推测,民猪很可能是通过上调MC3R基因的表达来增加能量消耗而抵御寒冷气候的。; 张冬杰刘娣; 关键词：冷应激民猪

猪子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞的分离培养被引量：10: 2013年; 为了获得高纯度的猪子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞,对猪子宫内膜进行胶原酶消化,分离基质细胞和腺上皮细胞进行体外培养,研究其生长特性。结果表明:猪子宫内膜组织在37℃、通过1 g/L胶原酶Ⅰ消化90 min可以获得游离的腺体,对腺体进行培养时上皮细胞比例可达70%以上。培养过程中采用差速消化和差速贴壁可以成功分离腺上皮细胞和基质细胞。基质细胞最适贴壁时间为25 min,腺上皮为3 h。纯化的基质细胞生长迅速,可传5代以上,上皮细胞生长缓慢,并且成片脱落。; 赵诚悦马红郭镇华张东杰汪亮刘娣; 关键词：子宫内膜上皮细胞基质细胞

民猪PGD和LDHA基因的表达与冷诱导研究被引量：4: 2011年; 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是戊糖代谢途径中的一个关键酶,乳酸脱氢酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)是动物体内参与糖酵解的重要酶类之一。为了探讨PGD和LDHA基因在民猪抵御寒冷气候的过程中是否起着一定的生物学作用,研究采用RT-PCR和Real-time PCR的方法,分析了这2个基因在民猪大肠,腿肌、肺、脂肪、心脏、脾脏和肝脏的表达情况以及冷诱导后在腿肌的表达变化情况。结果表明,PGD基因在所检的7个组织内均高水平表达,冷诱导后表达水平显著上升(P<0.05),LDHA基因在所检的7个组织中也均有表达,冷诱导后表达水平出现显著下降(P<0.05)。; 张冬杰刘娣汪亮王文涛杨国伟; 关键词：PGD 民猪 REAL-TIME PCR

冷诱导下民猪磷酸葡萄变位酶基因的表达变化被引量：3: 2011年; 磷酸葡萄变位酶(PGM)是糖代谢过程中的一个关键酶,为了研究其表达变化,研究采用RT-PCR和Real-time PCR方法,对PGM在大肠、腿肌、肺脏、脂肪、心脏、脾脏和肝脏组织的表达水平以及冷诱导前后民猪骨骼肌内PGM mRNA的表达变化进行了研究。结果表明:在所检测的7个组织中除大肠外其余组织PGM均高水平表达,而且冷诱导后PGM mRNA的水平出现了明显的下降。; 张冬杰刘娣汪亮别墅孙洪涛杨国伟; 关键词：民猪 RT-PCR

冷诱导下胰岛素样生长因子(IGFs)系统基因的表达变化被引量：2: 2012年; 本研究采用Real-time PCR的方法检测了分析了民猪的IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR和IGFBP-3基因在骨骼肌中冷诱导前后的表达变化。结果表明,IGF-Ⅰ基因表达水平极显著上调(P<0.01),IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR基因表达水平极显著下调(P<0.01),而IGFBP-3冷诱导前后表达变化差异不显著(P>0.05)。; 张冬杰刘娣汪亮杨国伟; 关键词：民猪 IGFS REAL-TIME PCR

民猪唾液酸合成酶基因的克隆、表达及进化分析: 2011年; 为进一步了解猪的唾液酸合成酶基因(SAS)的生物学功能,研究采用RT-PCR技术克隆了民猪唾液酸合成酶基因的全长CDS序列;采用生物信息学的方法对其编码的氨基酸序列进行分析;构建分子进化树;采用实时定量PCR方法对该基因在大肠、腿肌、肺、脂肪、心、脾和肝脏组织的表达情况进行分析。结果表明:民猪的唾液酸合成酶基因全长1080 bp,编码359个氨基酸,是一种跨膜蛋白。该蛋白存在1个似抗冻蛋白域标记,同时具有多个磷酸化位点。所构建的分子进化树与物种进化的拓扑结构基本一致。该基因在肺和脾中表达水平最高,其次是脂肪在大肠、肌肉、心和肝中表达水平较低。; 张冬杰刘娣汪亮杨国伟; 关键词：分子进化树民猪

利用Affymetrix芯片分析民猪冷应激后肌肉组织的基因表达谱被引量：5: 2011年; 冷应激可引起动物生产性能下降,诱发多种疾病,甚至造成死亡。民猪是我国北部地区特有的一个抗寒品种,为了研究冷应激下基因的表达调控机制,本研究利用Affymetrix猪基因芯片对民猪冷应激后肌肉组织内表达发生变化的基因进行了高通量的检测。结果,共检测到差异基因34个,其中下调表达的基因27个,上调表达的基因7个。在下调表达的基因中有7个(OAS1、IRG6、ISG20、DDX58、IFITl、ISG15、CXCL9)与干扰素诱导相关,1个(FST)与生长性状相关,2个(MX1、PG-2)与抗病毒有关,2个(S100A9、Numb)与细胞生长和凋亡有关;上调表达的基因功能还不清楚,推测它们可能与提高机体的抗寒性有关。对其中5个基因进行了Real-time PCR分析,证实它们都受到了温度的调节,与芯片检测结果吻合。结果提示,重度冷应激会造成机体免疫力下降,生长减缓。; 张冬杰刘娣别墅孙洪涛汪亮王文涛何鑫淼; 关键词：民猪冷应激 REAL-TIMEPCR

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国家自然科学基金(31072020)