上海市科委科技攻关项目(004019061)
- 作品数：24 被引量：259H指数：8
- 相关作者：李大金朱影王凌王文君王玉东更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院南京军区南京总医院复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子对骨代谢的调节作用被引量：1
- 2008年
- 近年来人们对免疫学及骨代谢中的关键细胞及分子机制的研究有了长足的发展。本文就骨免疫学中细胞因子的研究进展作一综述，旨在为骨与免疫系统相关疾病的防治提供新的策略。
- 王凌李大金
- 关键词：细胞因子成骨细胞破骨细胞
- 补肾宁心方对去势雌兔免疫功能的影响被引量：2
- 2006年
- 为探讨补肾宁心方对去势雌兔免疫功能的影响。24只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势组(卵巢切除)、中药组(卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方),除正常对照组外均于卵巢切除2周后给予高脂饮食,中药组同时灌胃给药,其余各组均灌服等量的蒸馏水,连续3个月。采用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖反应;同时采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测动物脾脏IL-2、IL-10 mRNA的表达量。结果显示:雌兔去势后,动物外周血淋巴细胞增殖活性较正常对照组明显降低;补肾宁心方灌药后动物的外周血淋巴细胞增殖活性明显增强,补肾宁心方对动物脾脏的IL-2 mRNA表达水平有明显的上调作用,而对动物脾脏的IL-10mRNA表达水平有明显的下调作用。
- 郝群李大金周跃华袁敏敏孟毅
- 关键词：补肾宁心方绝经期免疫
- 脱氢表雄酮通过丝裂活化蛋白激酶途径促进成骨细胞增殖的研究被引量：13
- 2004年
- 目的研究脱氢表雄酮(DHEA)促进成骨细胞增殖的作用和机制。方法取新生2～4d的BALB/c小鼠颅骨,用酶消化法进行成骨细胞原代培养,以细胞形态学和碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定。取传1代成骨细胞给予不同浓度DHEA,在不同培养时间后,应用光镜、电镜、四唑盐(MTT)法及流式细胞术(FCM)检测细胞的生长和增殖;同时用免疫印迹法检测磷酸化细胞外信号调控激酶(p44/42)的表达。结果10-8～10-6mol/L的DHEA可明显促进小鼠成骨细胞的生长和增殖,经10-7mol/LDHEA处理3d后的细胞,增殖指数明显增加(P<001);在10-9～10-6mol/L浓度范围内,DHEA能明显提高p44/42的表达,以10-8mol/L浓度的作用最佳(P<001),该作用可被U0126阻断。结论DHEA能够促进小鼠成骨细胞生长和增殖,其作用与激活丝裂活化蛋白激酶信号途径有关。
- 王玉东李大金袁敏敏王明雁朱影
- 关键词：DHEA成骨细胞生长增殖脱氢表雄酮P44/42细胞外信号
- 补肾宁心方对去势高脂血症家兔主动脉血管细胞粘附分子1表达的调节被引量：10
- 2004年
- 为了探讨补肾宁心方对去势雌兔动脉粥样硬化形成的影响及其可能的机制,将26只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组和治疗组(卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方),除正常对照组外均于术后2周给予高脂饮食,治疗组同时灌胃给药,连续3个月。12周末测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平;取主动脉行组织形态学及扫描电镜观察,并应用免疫组织化学方法检测主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果发现,与去势对照组比较,补肾宁心方对血脂变化无明显影响,但能明显降低主动脉粥样斑块面积与动脉内膜比值,降低内膜中膜厚度比,减轻主动脉病理损害,抑制主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果提示,补肾宁心方可能通过抑制主动脉血管细胞粘附分子1的表达从而阻止动脉粥样硬化的发生发展。
- 郝群李大金朱影袁敏敏王明雁孟毅
- 关键词：中药学补肾宁心方卵巢切除术血管细胞粘附分子1
- 脱氢表雄酮对去势雌兔免疫功能的调节作用被引量：1
- 2007年
- 目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对去势雌兔免疫功能的影响。方法24只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组(卵巢切除)、DHEA治疗组(卵巢切除并以10mg·kg-1.d-1的剂量口服DHEA)。卵巢切除后2w,治疗组灌胃给药,其余各组均灌服等量蒸馏水,连续3个月。采用MTT法测定外周血单个核细胞增殖反应;同时采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测动物脾脏IL-2、IL-10 mRNA的表达量。结果雌兔去势后,动物外周血单个核细胞增殖活性较正常对照组明显降低;DHEA治疗后动物的外周血单个核细胞增殖活性明显增强,DHEA对动物脾脏的IL-2 mRNA表达水平有明显的升调节作用,而对动物脾脏的IL-10 mRNA表达水平有明显的降调节作用。结论DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞的细胞因子转录由Th2型(IL-10)向Th1型(IL-2)偏移。
- 郝群梁元姣吴元赭李大金周跃华
- 关键词：脱氢表雄酮绝经期免疫
- 脱氢表雄酮对小鼠成骨细胞增殖周期与凋亡的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对小鼠成骨细胞(OB)增殖周期与凋亡的调控作用。方法颅骨酶解法分离OB和体外培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,分为对照组、10^(-10)mol/L E_2组、10^(-7)mol/L DHEA组共3组,流式细胞仪分析DNA含量,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡,透射电镜观察OB超微结构。结果DNA含量分析显示,DHEA组的S期和G_2/M期细胞百分率比对照组明显增加,细胞增殖指数显著增加(P＜0.01)；DHEA和E_2对OB还具有显著的抗凋亡作用(P＜0.01或P＜0.05)；透射电镜可见经10^(-7)mol/L DHEA诱导后的OB细胞器明显增多,内质网扩张,线粒体丰富等形态学改变。结论DHEA在体外可直接促进小鼠OB的增殖并抑制其凋亡。
- 王凌李大金王文君朱影
- 关键词：脱氢表雄酮成骨细胞细胞周期细胞增殖
- 补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的选择性作用被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法:建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mR-NA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果:补肾方组的IFNγ-水平较模型组明显升高(P<0.01);而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组均可改善小鼠的BMD,增加骨小梁面积,使OPG mRNA表达增加。补肾方组的子宫与模型组比较无显著性差异。结论:补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制与调节Th1/Th2的偏离及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。
- 王玉东李大金王文君朱影
- 关键词：补肾宁心方绝经后骨质疏松护骨素TH1/TH2MRNA表达
- 补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的影响被引量：10
- 2005年
- 目的探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方组),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mRNA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果补肾方组的IFN-γ水平较模型组明显升高(P<0.01),而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组小鼠的BMD均改善,骨小梁面积增加,OPG mRNA表达增加;但补肾方组小鼠的子宫明显小于E2组(P<0.05),与模型组比较差异无显著性。结论补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制可能与调节Th1/Th2的偏移及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。
- 王玉东李大金王文君朱影
- 关键词：补肾宁心方绝经后骨质疏松护骨素TH1/TH2MRNA表达
- 脱氢表雄酮对鼠成骨细胞芳香化酶和雌激素受体亚型转录的调控作用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对鼠成骨细胞(OB)芳香化酶和雌激素受体(ER)亚型转录的调控作用。方法颅骨酶解法原代培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,分为对照组、10-7mol.L-1DHEA处理组和10-10mol.L-1雌二醇(E2)处理组,RealTime RT-PCR分析OB芳香化酶、ERα和ERβmRNA转录表达。结果各组OB中均稳定表达芳香化酶、ERα和ERβmRNA。与对照组比较,DHEA处理组和E2处理组OB芳香化酶、ERα和ERβ的转录均显著增加。与对照组相比,DHEA显著提高了ERβ/ERα比值;E2则显著降低了ERβ/ERα比值(P<0.05)。结论DHEA和E2在体外都可促进OB中芳香化酶、ERα和ERβmRNA的表达;DHEA刺激OB优势表达ERβ;而E2则刺激OB优势表达ERα。
- 王凌李大金王文君朱影
- 关键词：脱氢表雄酮成骨细胞芳香化酶雌激素受体
- 补肾中药血清对血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：8
- 2007年
- 目的探讨补肾中药血清对血管内皮细胞损伤的影响。方法以培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞.灌服蒸馏水的兔血清为对照,在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL),并在试验体系中加入灌服补肾中药的兔血清,收集内皮细胞培养上清液,以硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)的含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)的含量;流式细胞仪Annexin V-PI双染色法检测内皮细胞的凋亡发生率,透射电镜观察内皮细胞超微结构的变化。结果ox-LDL显著降低内皮细胞培养上清液中NO水平,升高MDA的含量,促进内皮细胞凋亡,透射电镜显示内皮细胞内线粒体肿胀明显。在试验体系中加入灌服补肾中药的兔血清。则NO水平明显升高,MDA含量明显下降.内皮细胞凋亡率下降(P<0.01),同时内皮细胞内线粒体变化趋于正常;而灌服蒸馏水的兔血清则无此作用。结论补肾中药血清对于ox-LDL造成的内皮细胞损伤具有保护作用。
- 郝群梁元姣吴元赭李大金周跃华
- 关键词：补肾动脉粥样硬化内皮细胞凋亡
