湖南省研究生科研创新项目(2011ssxt103)
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- 表达mIFN-γ的重组链球菌的构建及其对重组Sj-F1链球菌疫苗免疫调节作用研究
- 2013年
- 目的构建表达mIFN-γ的重组链球菌,并与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗进行联合免疫,观察IFN-γ对重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗的免疫调节效应。方法用PCR法扩增mIFN-γ基因,亚克隆至链球菌重组质粒pGMB1,经PCR、限制性酶切和测序鉴定筛选阳性重组子。将阳性重组质粒转化链球菌载体,经抗生素抗性转化及染色体PCR鉴定筛选阳性重组链球菌。用Streak blot和Western blot分析鉴定重组链球菌的表达情况。鉴定后的重组mIFN-γ链球菌与重组Sj-F1链球菌疫苗联合应用,经滴鼻接种免疫昆明小鼠,观察诱导产生的减虫和减卵效果。结果成功构建了分泌mIFN-γ重组链球菌。Streak blot和Western blot分析表明重组链球菌能分泌mIFN-γ并可稳定遗传。免疫保护性实验表明,重组mIFN-γ链球菌与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗联合免疫,减虫率和减卵率分别为31.56%和47.48%,与单用重组Sj-F1链球菌疫苗比较减虫率和减卵率圴增加。结论结果表明,重组mIFN-γ链球菌能增强重组Sj-F1链球菌疫苗抗日本血吸虫感染的保护力。
- 彭丹杨明刘玮陈利玉
- 关键词：日本血吸虫免疫
