国家教育部博士点基金(20093326120001)
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
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- 发文基金：浙江省自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 超高压对副溶血弧菌细胞壁膜损伤的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:研究超高压处理对副溶血弧菌细胞壁膜的损伤效应。方法:以副溶血弧菌为对象,探讨不同压力和保压时间对其存活量的影响,分析超高压处理对其细胞壁膜超微结构,细胞膜的通透性、流动性和Na+/K+-ATP酶活性,细胞壁特性以及细胞表面电位的影响。结果:研究表明,20℃经200MPa压力作用10min,副溶血弧菌致死率为100%。超高压处理会对副溶血弧菌细胞壁膜形态结构造成明显的损伤,细胞壁局部破坏,出现缺口;细胞结构不完整,细胞膜消失;细胞壁膜的损伤,使得胞质内含物出现泄漏。超高压处理使副溶血弧菌细胞膜通透性异常增加,膜流动性的显著下降,细胞膜Na+/K+-ATP酶活性降低以及细胞壁特性的改变。高于200MPa压力后,细胞表面zeta电位值随压力的增大而趋向稳定,细胞表面粒子完全絮凝,说明细胞结构已被高压破坏。结论:超高压处理对副溶血弧菌细胞壁膜形态结构造成明显的损伤,改变细胞膜和细胞壁的结构与特性,最终导致其胞内容物和无机盐外漏而致死。
- 王瑞傅玲琳叶立斌励建荣
- 关键词：超高压处理副溶血弧菌
- 超高压处理对副溶血性弧菌细胞膜组成成分的影响被引量：6
- 2012年
- 【目的】探讨水产品中副溶血性弧菌基于细胞膜损伤和修复的耐超高压胁迫机制。【方法】以80-250MPa超高压多次处理原始敏感菌株,从中筛选分离副溶血弧菌的耐压菌株,通过紫外分光光度法测定超高压处理前后细胞膜通透性的变化;采用SDS-PAGE电泳技术分析原始敏感菌株与耐高压胁迫菌株细胞膜可溶性蛋白的差异,采用超微量Na+K+ATP酶试剂盒分别测定原始菌株与耐压菌株的Na+K+ATP酶活性,用GC-MS法分析耐压菌株与原始菌株细胞膜脂肪酸组成的差异。【结果】分离获得的副溶血弧菌耐压菌株直接经250 MPa压力胁迫处理,存活量可较原始菌株提高103数量级。当处理压力大于400 MPa时,耐压菌株上清液中核酸物质泄露与原始菌株差异显著。耐压菌的可溶性膜蛋白在分子量为36 kDa处浓度明显增加,Na+K+ATPase酶活性比原始菌株提高了83.3%,细胞膜不饱和脂肪酸含量由51.57%变为54.23%。【结论】原始的副溶血性弧菌在250 MPa压力处理后存活率为0.0008%,而耐高压胁迫菌株在250 MPa压力处理后存活率可达到0.28%。经超高压处理分离得到的耐压菌株细胞膜上低分子量可溶性膜蛋白含量高于原始菌株、Na+K+ATPase酶活性显著高于原始菌株、不饱和脂肪酸比例加大,这些细胞膜上的主要成分含量的变化均与菌株耐压性有关。
- 童钰陆海霞励建荣
- 关键词：副溶血性弧菌
- 副溶血弧菌总蛋白双向电泳体系的建立被引量：3
- 2013年
- 目的：建立并优化副溶血弧菌总蛋白质双向电泳技术体系,为后续差异蛋白质组学研究奠定基础。方法：以副溶血弧菌为研究对象,对比研究样品制备、裂解液配方、IPG胶条长度、IPG胶条pH范围、水化上样方式、等电聚焦程序、上样量和二向胶浓度等因素,优化双向电泳体系。结果：采用超声破碎与TCA沉淀相结合的样品制备方法,能够获得较高的蛋白提取率;使用17 cm pH4~7的IPG胶条,主动水化上样,上样量100μg,上样体积300μL,适当延长除盐时间（2.5 h）和等电聚焦总电压时间积（80 000 vhr）,采用12.5%的二向分离胶,能得到较高的电泳图谱分离度和分辨率。结论：本研究建立的副溶血弧菌总蛋白质双向电泳体系具有较高的可操作性和重现性。
- 王瑞傅玲琳王彦波
- 关键词：副溶血弧菌总蛋白
