广东省重大科技项目(2001)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：姜晓丹徐如祥邹雨汐滕晓华杜谋选更多>>
- 相关机构：南方医科大学海口市人民医院更多>>
- 发文基金：广东省重大科技项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 食蟹猴骨髓源性神经干细胞自体脑内移植的研究被引量：3
- 2005年
- 目的探讨食蟹猴自体骨髓基质细胞诱导分化成神经干细胞后移植到脑内的生长情况.方法对6只食蟹猴进行骨髓基质干细胞体外培养、诱导分化成神经干细胞,经BrdU标记后进行自体脑移植.动物分为即时移植组和延迟移植组,采用立体定向多点注射的方法将神经干细胞悬液移植到猴皮层创伤灶.结果HE染色显示即时移植和延迟移植的创伤区细胞数量都明显多于假移植治疗对照;免疫组织化学染色显示两组动物在干细胞移植后1～6个月脑皮层创伤灶内均有BrdU阳性表达细胞,移植后半年的动物在移植区邻近的脑白质内也可观察到有BrdU阳性表达的细胞,而创伤对照动物、假移植治疗动物和正常脑组织中则未见BrdU阳性表达. 结论BMSCs体外培养得到的神经干细胞经过自体移植能在脑皮层内存活,并且能增殖、分化和迁移,可成为神经干细胞的替代细胞或来源细胞;干细胞移植到陈旧性的脑皮层损伤灶也具有成活、增殖和迁移能力.
- 柯以铨徐如祥李钢姜晓丹成文平邹雨汐杜谋选
- 关键词：骨髓源性神经干细胞食蟹猴脑内移植BRDU标记正常脑组织多点注射
- 不同浓度血清对大鼠骨髓基质细胞生长的影响被引量：11
- 2005年
- 目的:探讨不同浓度血清对大鼠原代培养骨髓基质细胞(BMSCs)功能的影响,寻求培养所需的适宜血清浓度。方法:利用MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪分析细胞生长周期及细胞凋亡的变化,PCR-ELISA法分析细胞端粒酶活性的改变。结果:①血清能明显促进BMSCs增殖,表现为G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,群体细胞倍增时间缩短。②在组成BMSCs的Ⅰ型和Ⅱ型细胞发育生长过程中,血清对Ⅱ型细胞的增殖无明显促进作用;对Ⅰ型细胞,血清能明显促进细胞增殖。③短时间内血清对于BMSCs端粒酶活性无明显影响。结论:①对于BMSCs中不同类型的细胞采用的培养条件应因类而异。②血清对Ⅰ型细胞的增殖具有明显促进作用。③血清并不能促进Ⅱ型细胞增殖,但在短时间内对其分化亦无明显影响。
- 滕晓华徐如祥邹雨汐姜晓丹蔡颖谦杜谋选
- 关键词：骨髓基质细胞细胞增殖端粒酶
- 神经移植的种子细胞:大鼠骨髓基质细胞部分生物学特性被引量：7
- 2005年
- 目的:分离培养SD大鼠骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcebls,BM-SCs),观察BMSCs部分生物学特性。方法:实验于2004-03/08在珠江医院广东省神经医学研究所实验室进行。采用密度梯度离心法分离BMSCs,MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞生长周期、鉴定细胞表面标志,免疫荧光染色观察细胞的神经分化功能及端粒酶反转录酶(TERP)表达。PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性。结果:①采用密度梯度离心法可以得到高纯度的BMSCs,表达CD29,CD44等表面标志,而不表达CD31,CD34,CD45。②BMSCs主要由Ⅰ,Ⅱ型两种形态的细胞组成,其中Ⅱ型细胞表达端粒酶活性并可以诱导分化为Nestin阳性细胞。③骨髓基质细胞原代培养时增殖能力较低。结论:BMSCs主要有两种形态和功能不完全相同的细胞类型组成,其中Ⅱ型细胞具有端粒酶活性,并在一定的诱导条件下可以分化为Nestin阳性细胞,可以考虑作为神经移植的种子细胞来源。
- 滕晓华邹雨汐徐如祥黄涛姜晓丹
- 关键词：骨髓细胞细胞移植
- 脑皮层创伤灶注射法移植神经干细胞实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察食蟹猴自体骨髓源神经干细胞移植到大脑皮层创伤灶内的存活、生长情况。方法取骨髓分离、纯化骨髓基质细胞，培养诱导成神经干细胞，nestin染色表达阳性后再加入细胞标记物BrdU进行共培养7d待移植用。移植前将BrdU标记的神经干细胞收集、离心，制成干细胞悬液，要求活细胞〉80％。食蟹猴在采用Allen’s打击法制作皮层创伤灶后，分即时移植（术后即在创伤灶注入，n=3）和延迟移植组（术后30d在创伤灶注入，n=3），用微量注射针将干细胞悬液注入到猴脑皮质损伤灶。同时设置对照组（n=1），在动物的左侧皮层制作创伤灶并按上述方法注射含同样浓度BrdU的神经干细胞培养液0．5mL，右侧皮层注入干细胞悬液。移植后1、3、6个月即时移植组、延迟移植组各灌杀1只食蟹猴，移植后6月灌杀对照组食蟹猴，做移植区组织切片染色检查。结果即时移植组和延迟移植组都可观察到脑皮层创伤灶内有棕褐色的B耐U标记阳性细胞，而对照组组织切片中则未见BrdU阳性表达细胞。移植后BrdU阳性表达细胞早期呈簇状分布，随后散在分布，6个月后细胞形态多样。移植后6个月在移植区邻近的脑白质内也可观察到有BrdU阳性表达的细胞。结论移植的骨髓源性神经干细胞在脑皮层创伤灶内有存活并可向邻近区域迁移。
- 李钢徐如祥柯以铨姜晓丹
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞细胞移植
- 脑皮层创伤灶注射法移植神经干细胞的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的观察食蟹猴自体骨髓源神经干细胞（NSCs）移植到皮层创伤灶内的存活、生长情况。方法取骨髓分离、纯化骨髓基质细胞，培养诱导成NSCs，Nestin染色阳性说明具备NSCs特征。再加入细胞标记物BrdU进行共培养7d待移植之用。移植前将BrdU标记的NSCs收集、离心，制成干细胞悬液。食蟹猴分即时移植和延迟移植组，用微量注射针将NSCs悬液注入到猴脑皮质损伤灶及创面周边脑皮层，移植后1，3，6个月各灌杀2只食蟹猴，做移植区组织切片染色检查。结果即时移植组和延迟移植组都可观察到脑皮层创伤灶内有BrdU标记阳性细胞，而假移植组织切片中则未见BrdU阳性细胞。移植后1，3，6个月染色可见移植细胞早期呈簇状分布，移植后6个月在移植区邻近的脑白质内也可观察到有BrdU阳性细胞，正电子发射电子计算机断层扫描（PET）检查显示移植NSCs后创伤区域脑组织葡萄糖代谢有所恢复。结论移植的骨髓源性NSCs在脑内有存活，并向邻近区域迁移，有助于创伤脑组织修复。
- 李钢徐如祥柯以铨姜晓丹
- 关键词：脑损伤干细胞骨髓基质细胞细胞移植
- 不同年龄大鼠组织端粒酶活性变化的研究
- 2005年
- 目的了解不同组织端粒酶活性随年龄变化的规律,为治疗性克隆核供体细胞的选择提供依据。方法采用PCR-ELISA法检测不同年龄SD大鼠皮肤、肌肉、骨髓、脑和睾丸组织的端粒酶活性。结果(1)随着年龄的增长,各组织端粒酶活性均呈下降趋势;(2)新生皮肤、肌肉和脑组织表达端粒酶活性,一月后则不再表达端粒酶活性;(3)一月至二年骨髓和睾丸组织均保持较高端粒酶活性。结论端粒酶活性表达程度与不同组织有关,骨髓和睾丸组织能维持较高端粒酶活性;骨髓组织中持续表达端粒酶活性的细胞可能是一种较好的核供体细胞。
- 滕晓华徐如祥黄涛陈镇洲姜晓丹邹雨汐蔡颖谦杜谋选
- 关键词：不同年龄活性变化组织端粒酶活性鼠组织治疗性克隆再表达
