贵州省教育厅自然科学研究项目(2008032)
- 作品数：7 被引量：96H指数：4
- 相关作者：孙万邦杜联峰陈富超罗军敏丁立珉更多>>
- 相关机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省教育厅自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IL-10受体及其信号转导研究进展被引量：30
- 2012年
- 白细胞介素10 (interleukin-10,IL-10)是由多种细胞分泌的一种多效价细胞因子,既有免疫抑制作用也有免疫刺激作用。IL-10的特异性受体为受体复合物,包括与配体结合的IL-10R1亚单位和起辅助作用的IL-10R2亚单位。IL-10与细胞表面IL-10R1和IL-10R2相互作用并主要通过激活JAK-STAT通路发挥生物学作用。IL-10生物学活性都是通过IL-10与靶细胞膜上受体特异性结合而实现的。
- 郭锦锦孙万邦
- 关键词：IL-10信号转导生物学效应
- 重组hIL-10对皮肤移植家兔T细胞凋亡及IL-2的影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨重组hIL-10诱导皮肤移植家兔与外周血T细胞凋亡的关系。方法将18只受体家兔随机分成重组hIL-10实验组[低剂量5μg/(kg.d);高剂量10μg/(kg.d)],CsA阳性对照组[低剂量5 mg/(kg.d);高剂量10 mg/(kg.d)],hIL-10+CsA联合组[5μg+5 mg/(kg.d)],生理盐水阴性对照组(1 mL/d)共6组,每组3只;供体18只。实验组及对照组均在术前1 d至术后9 d持续肌肉注射药物,并观察各组移植术后皮片情况。流式细胞仪检测各组家兔术后1、4、7、14 d外周血T细胞凋亡率的变化。用ELISA法检测家兔术后1、4、7、14 d血清中细胞因子IL-2的变化。结果重组hIL-10组与生理盐水组皮片平均存活时间相比较,存在显著性差异(P<0.05)。hIL-10+CsA组皮片存活时间与低剂量重组hIL-10组及低剂量CsA组比较有明显差异(P<0.05)。重组hIL-10组术后T细胞凋亡率随着时间逐渐升高,血清IL-2的水平逐渐降低,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05),其作用呈剂量依赖性;hIL-10+CsA组与单独用药的低剂量重组hIL-10组及低剂量CsA组相比,外周T细胞凋亡率升高,血清IL-2的水平下降,差异有显著性(P<0.05)。结论重组hIL-10对家兔皮肤移植排斥有抑制作用,延长移植皮片存活时间,其机制可能是通过诱导外周血T细胞凋亡,下调外周血IL-2水平,实现免疫抑制,或与诱导免疫耐受有关。
- 李阳飞王春梅孙万邦张磊温琼娜刘凯山
- 关键词：皮肤移植细胞凋亡白介素2
- 重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化被引量：16
- 2010年
- 构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoRI/XbaI双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0kD处可见较浓染条带,Westernblotting分析可见特异条带;ELISA检测72h上清液中目的蛋白浓度可达1.973mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%。实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化。
- 封建凯孙万邦陈富超黄俊琼罗军敏杜联峰姚新生王胜香
- 关键词：HIL-10质粒构建毕赤酵母基因表达
- 细胞因子在类风湿关节炎发病机制中作用的研究进展被引量：33
- 2012年
- 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因尚未明确的以滑膜慢性炎症为主的自身免疫性疾病,近年研究发现,细胞因子网络失衡在RA的发病和进展中发挥着重要作用,该病的加重或好转依赖于炎性细胞因子和调节性细胞因子之间的动态变化。其中TNF-α、IL-1、IL-17、IL-33等在RA滑膜病变中起核心作用,而IL-4、IL-10、TGF-β等细胞因子却可以起到减轻关节损伤的作用。本文将从致炎细胞因子、抑炎细胞因子与RA之间的关系来阐述RA的发病机制。
- 丁立珉孙万邦
- 关键词：细胞因子类风湿关节炎发病机制致炎因子
- 重组hIL-10联合MTX对AA大鼠IL-1β、TNF-α含量变化和影像学变化研究被引量：2
- 2016年
- 目的:以重组人白细胞介素-10(human interleukin-10,h IL-10)及其联合甲氨碟呤(MTX)作用佐剂性关节炎大鼠模型,检测血清IL-1β、TNF-α含量的变化情况,研究重组h IL-10联合MTX治疗佐剂性关节炎大鼠的效果。方法:AA大鼠造模后,用测量体重、足肿胀度、关节炎指数及组织病理学来评价造模是否成功,各药物处理AA大鼠模型后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-1β、TNF-α的含量。用放射学检查来评估AA大鼠后足关节损伤的程度。结果:各治疗组IL-1β、TNF-α含量比模型组水平明显下降,各治疗组与模型组比较有显著性差异(P<0.05),联合用药组对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α有明显的抑制作用,影像学检查提示IL-1β、TNF-α水平与大鼠足骨关节的损伤程度成正相关,联合用药组治疗后骨侵蚀评分最低。结论:各治疗组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α有抑制作用,这种抑制作用与骨关节影像学改变显著相关。联合用药组能有效降低AA大鼠的IL-1β、TNF-α水平,改善AA大鼠足关节损伤的治疗作用。
- 杜联峰陈昆涛丁立珉唐艳丽孙万邦
- 关键词：佐剂性关节炎IL-1Β
- 重组hIL-10在毕赤酵母X-33的表达及其生物活性鉴定被引量：17
- 2011年
- 目的:用毕赤酵母表达hIL-10并探索合适的表达条件,为IL-10生物制品研发及临床应用奠定基础。方法:以0.5%甲醇诱导酵母X-33表达rhIL-10,用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定rhIL-10,比较不同温度、不同pH值和有无PMSF条件下rhIL-10的表达水平。用ELISA法测定培养液rhIL-10含量,用Bradford法测定培养液总蛋白含量,计算rhIL-10占总蛋白的比例。以淋巴细胞转化试验分析rhIL-10的生物学活性。结果:SDS-PAGE后可见42 kD左右蛋白条带;Western blot也检测到42kD左右特异性蛋白质条带。pH值为6.0、温度在28℃并加入抑制剂时rhIL-10表达量最高值为20 mg/L,同时段培养液中总蛋白质含量为50 mg/L,rhIL-10占总蛋白比例为40%。在外周血淋巴细胞转化试验中,rhIL-10抑制了淋巴细胞的增殖。结论:hIL-10能在毕赤酵母高效表达,表达产物有较好生物活性;发酵条件对rhIL-10的表达水平影响大,改善发酵条件能促进rhIL-10的表达。
- 陈富超孙万邦封建凯杜联峰黄俊琼罗军敏宋明英
- 关键词：毕赤酵母细胞增殖
- 重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应中Toll样受体的变化
- 2012年
- 背景:现已认识到Toll样受体的活化与器官移植后排斥反应的关系十分密切,Toll样受体与移植免疫也逐渐成为研究的热点问题。目的:观察重组人白细胞介素10抗皮肤移植排斥反应中受体兔血清Toll样受体的变化。方法:制备兔背部缺损模型,将受体家兔分为6组,重组人白细胞介素10低、高剂量组、环孢素A低、高剂量组、联合用药组和生理盐水组,分别于移植前1d开始肌肉注射5,10μg/(kgd)重组人白细胞介素10,5,10mg/(kgd)环孢素A,5μg重组人白细胞介素10+5mg环孢素A,1mL/d生理盐水,连续用药10d。结果与结论:各组移植后Toll样受体4,7,8,9水平均较移植前升高,移植后14d达到高峰。移植后4,7d生理盐水组Toll样受体4水平高于联合用药组(P<0.05)。移植后7d生理盐水组Toll样受体7高于其他各组(P<0.05),Toll样受体8高于环孢素A高剂量组(P<0.05)。各组移植不同时间点Toll样受体9水平差异无显著性意义(P>0.05)。提示重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植反应中,Toll样受体4,7,8,9水平在皮肤移植后明显升高,当皮片排斥后达到高峰,之后逐渐下降,表明Toll样受体参与排斥反应过程。
- 吕岩岩孙万邦李佳戴小波张磊王胜香陈富超罗军敏
- 关键词：重组人白细胞介素10TOLL样受体7TOLL样受体9
