宁波市自然科学基金(2010A610056)
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
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- HBSAg阳性原发性肝癌患者血清蛋白电泳图谱分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨HBSAg阳性原发性肝癌(HCC)患者血清蛋白电泳谱的特点,并揭示相关蛋白质的检测意义。方法采用美国Helena REP3蛋白电泳仪对乙型肝炎病毒表面抗原(HBSAg)阳性原发性肝癌患者及其他HBV感染性肝病患者的血清蛋白电泳进行分析,同时检测血清清蛋白(ALB)、α1抗胰蛋白酶(AAT)、甲胎蛋白(AFP)、触珠蛋白(Hp)、铜蓝蛋白(Cp)、转铁蛋白(TRF)、补体C3(C3)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、C反应蛋白(CRP),并以健康成年人为对照组,对检测结果进行统计学分析。结果 HCC患者清蛋白百分比最低,与正常对照组、慢乙肝组比较差异均有统计学意义(P<0.05);而α1-球蛋白百分比最高,与正常对照组、乙肝肝硬化组比较差异均有统计学意义(P<0.05),α2-球蛋白百分比也显著高于其他疾病组。HCC患者血清AAT、AFP、Cp、CRP含量显著高于其他组(P<0.05);Hp、C3除了比正常对照组稍低外,也显著高于其他疾病组(P<0.05)。结论 HBSAg阳性原发性肝癌患者血清蛋白电泳谱的改变主要表现在清蛋白降低,而α(包括α1和α2)球蛋白相对其他疾病组升高,α球蛋白的升高与正向急性时相蛋白及AFP的增加有关。血清蛋白电泳结合相关特定蛋白的检测对疾病的诊断及病情发展变化的评估具有重要意义。
- 高国生徐晓珍
- 关键词：乙型肝炎病毒原发性肝癌血清蛋白电泳急性时相蛋白
- 痉挛性截瘫蛋白21对乙型肝炎病毒复制的影响及其机制被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨人痉挛性截瘫蛋白21（SPG21）对乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响，并探讨其调节机制。方法将HBV感染性克隆pHBV1．3及其启动子pHBV—Luc分别转染HepG2细胞，加入不同浓度的SPG21蛋白，采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg含量；RT—PCR和Westernblot法检测IlepG2细胞内HBV核心蛋白mRNA和蛋白表达；荧光定量PCR法检测细胞闭合环状DNA（cccDNA）的水平；采用Luminometer荧光检测仪分析HBV启动子活性的变化。实验数据用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验。结果SPG21能够上调细胞上清液中HBsAg和HBeAg的含量，同时能够促进细胞内HBV核心蛋白的表达和HBVcccDNA的产生，并上调HBV启动子活性，其调节作用呈剂量依赖效应；与对照组比较，加入50μg／ml，100μg／ml，200μg／mlSPG21蛋白48h后，HBV启动子上调倍数分别为1．63、3．09和4．66（P〈0．05）。结论SPG21能够促进HBV在HepG2细胞中的复制。
- 高国生翁彭剑李永燕丁世雄
- 肝动脉插管化疗栓塞与超选择性部分脾动脉栓塞治疗原发性肝癌合并脾动脉亢进被引量：2
- 2012年
- 目的观察肝动脉插管化疗栓塞联合超选择性部分脾动脉栓塞术治疗原发性肝癌合并脾动脉亢进患者的疗效。方法回顾性分析38例合并肝硬化、门脉高压、脾功能亢进的原发性肝癌住院患者,均予TACE联合超选择性PSE,观察术前、术后7和14 d的白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、总胆红素(TBil)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、凝血酶原时间(PT)、白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)、a-岩藻糖苷酶(a-FU)的变化,术前、术后4周肿瘤的平均直径的变化及6、12、18个月的累积生存率。结果采用两种方式的联合治疗,术后第7天及14天WBC、Hb及PLT较术前上升有统计学意义(P<0.05);TBil、ALT、AST术后第7天较术前上升有统计学意义(P<0.05),PT、Alb术后第7天较术前下降有统计学意义(P<0.05),术后第14天TBil、ALT、Alb的变化较术前有统计学意义(P>0.05);AFP、a-FU术后第7天及14天较术前明显下降(P<0.05),术后4周肿瘤平均直径的下降有统计学意义(Z=-10.807,P=0.000),且6、12、18个月的生存率分别为97%、92%、87%。结论肝动脉插管化疗栓塞联合超选择性部分脾动脉栓塞术治疗原发性肝癌并门脉高压、脾功能亢进的患者安全、有效,术后2周内应给予积极的保肝治疗。
- 付丽云徐长风高国生
- 关键词：肝动脉插管化疗部分脾动脉栓塞脾功能亢进
- 靶向HBx小干扰RNA表达载体构建及其功能探讨被引量：1
- 2011年
- 目的:设计和构建乙型肝炎病毒(HBV)X基因(HBx)特异性的小干扰RNA(siRNA)体内表达载体,筛选抑制X基因表达的有效siRNA,并初步探讨其对HBV复制功能的影响。方法:以X基因为目的基因,以产生siRNA质粒载体pSilencerTM-U6为表达模板,细胞内转录合成3条siRNA,并构建携带荧光素酶报告基因的重组质粒载体plucF-HBx。将重组质粒载体plucF-HBx与产生siRNA的质粒pSilencerTM-U6共转染HepG2细胞,检测荧光素酶活性以筛选出抑制荧光素酶表达的有效siRNA,逆转录聚合酶链反应检测HBx mRNA的表达,进一步证实siRNA对HBx表达的抑制效果,然后将siRNA转染HepG2.2.15,酶联免疫吸附法和荧光定量PCR检测siRNA对HBV复制的影响。结果:合成的3条siRNA中有1条抑制荧光素酶表达,抑制效率为76.3%,并能特异性抑制HBV的复制。结论:成功构建并筛选到针对X基因表达的有效siRNA质粒,为HBV的基因治疗奠定基础。
- 高国生翁彭剑纪礽斌李德周李永燕李红山丁世雄
- 关键词：RNA干扰SIRNA基因治疗
- 甲胎蛋白、铜蓝蛋白和触珠蛋白联合诊断原发性肝癌评价被引量：12
- 2011年
- 目的:探讨血清甲胎蛋白、铜蓝蛋白和触珠蛋白在检测原发性肝癌诊断中的价值。方法:对40例健康献血员,66例慢性乙型肝炎、69例乙肝肝硬化及60例原发性肝癌患者分别采用免疫透射比浊法和微粒子酶免疫分析技术检测血清甲胎蛋白、铜蓝蛋白和触珠蛋白含量及作统计学分析。结果:原发性肝癌患者血清甲胎蛋白和铜蓝蛋白水平均高于正常对照组,触珠蛋白水平高于乙型肝炎和肝硬化组。通过logistic回归模型构建的联合预测因子显著提高了原发性肝癌的诊断效能。结论:甲胎蛋白、铜蓝蛋白和触珠蛋白联合检测,对HBSAg阳性原发性肝癌的早期诊断有重要价值。
- 高国生冯家飞丁世雄
- 关键词：原发性肝癌乙型肝炎病毒甲胎蛋白铜蓝蛋白触珠蛋白
- 乙型肝炎病毒对超敏C反应蛋白表达的影响及其临床意义被引量：3
- 2011年
- 目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）对超敏C反应蛋白（hs-CRP）表达的影响及其临床意义。方法采用RT-PCR检测人肝癌细胞系HepG2和HepG2．2．15中hs-CRPmRNA的表达，通过Olympus5400全自动生化分析仪检测HBV患者和健康对照者hs-CRP血清学水平，分析hs-CRP在慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中hs-CRP表达水平的差异。结果HepG2．2．15细胞中hs-CRPmRNA的表达水平较HepG2高；hs-CRP在乙肝感染者血清学水平屁著升高（P〈0．05）；hs-CRP在肝硬化患者和肝癌患者明显高于慢性肝炎患者。结论HBV能够上调hs-CRP的表达，其血清学水平与疾病进程相关。
- 高国生朱海超胡爱荣徐晓珍
- 关键词：乙型肝炎病毒超敏C反应蛋白肝硬化肝癌
- 慢性乙型肝炎患者血清补体C3和C4检测的临床意义再探讨被引量：4
- 2012年
- 目的:再次探讨慢性乙型肝炎患者血清补体C3和C4检测的临床意义。方法:通过德灵BNⅡ特种蛋白仪检测慢性乙型肝炎患者和健康对照者C3和C4血清学水平,分析C3和C4在不同病情及不同HBV-DNA拷贝数慢性乙型肝炎患者中表达水平的差异。结果:慢性乙型肝炎患者的血清补体C3和C4水平较正常对照组显著降低(P<0.05),特别是补体C3在病情较重和HBV-DNA复制活跃时下降明显。结论:慢性乙型肝炎患者补体C3和C4血清学水平反应病情轻重,且受体内HBV-DNA负向调节。
- 吕邦泰高国生冯家飞徐晓珍祝成亮
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA补体C3补体C4
- 乙型肝炎病毒X基因对痉挛性截瘫蛋白21表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨HBVX基因对痉挛性截瘫蛋白（SPG）21表达的影响。方法采用RT—PCR和Westernblot检测HepG2和HepG2．2．15细胞mRNA和蛋白表达的差异，将带有SPG21基因启动子的报告质粒pGL3-SPG21分别与表达HBV基因组的单个基因的质粒共转染HepG2细胞，测定荧光色素酶的活性，以相对光单元（RUL）表达；RT—PCR和Westernblot分别检测SPG21mRNA和蛋白表达的变化。组间比较采用t检验。结果HepG2．2．15细胞中SPG21mRNA和蛋白的表达水平明显高于HepG2细胞，相对表达量（与β-肌动蛋白的灰度比值）为0．36±0．06对比0．21±0．05，P〈0．05。转染pCMVS、pCMV—E、pCMV—C、pCMV—X、pCMV—P和pCMV—ag2B后的HepG2细胞中，荧光素酶的活性分别为每微克蛋白（86±12）RUL、（75±12）RUL、（69±11）RUL、（875±27）RUL、（104±16）RUL和（67±12）RUL；与转染pCMV-tag2B组细胞相比，转染X基因者荧光素酶活性明显升高（P〈0．01）。HBVX基因在mRNA和蛋白水平上调SPG21的表达，这种激活作用随着X基因浓度的增加而增强。结论HBVX基因能特异性地激活SPG21的表达。
- 高国生翁彭剑纪礽斌李德周李永燕李红山丁世雄胡静
- 关键词：X基因
