国家自然科学基金(30371476)
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
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- 先天性肛门直肠畸形胎鼠支配肛提肌感觉神经元定量研究被引量：7
- 2007年
- 目的定量观察支配肛提肌的感觉神经元,探讨先天性肛门直肠畸形术后发生排便功能障碍的病因。方法采用胎仔外科、显微注射和神经示踪相结合技术对孕20 d Wistar 胎鼠支配肛提肌的感觉神经元进行荧光金标记,脊髓连续横切片,计数标记神经元数量并观察神经元形态。乙烯硫脲致畸制作先天性肛门直肠畸形动物模型。结果支配肛提肌的感觉神经元主要分布在 L_4-S_1脊髓节段的脊髓背根神经节。正常对照组(24只胎鼠)标记神经元数量为(11804±2362)个,先天性肛门直肠畸形组标记神经元数量明显减少,低位畸形组(18只胎鼠)为(2886±705)个,高位畸形组(41只胎鼠)为(1026±425)个,两个畸形组分别与正常对照组相比差异有统计学意义(均 P<0.05)。结论先天性肛门直肠畸形胎鼠支配肛提肌腰骶髓感觉神经元存在明显发育异常。
- 管考平袁正伟王维林高飞苏鹏俊
- 关键词：消化系统畸形肛提肌
- 骨髓间充质干细胞的体外培养、诱导分化及在神经系统疾病中的应用被引量：2
- 2005年
- 间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,它广泛存在于机体的不同组织中,骨髓、外周血等组织都可培养出间充质干细胞。它可在体外分离、培养、扩增及诱导分化,目前可分化为骨细胞、软骨细胞、肌细胞、神经细胞等,是组织工程的重要种子细胞之一。间充质干细胞转化为神经细胞并进行细胞移植这一方法为先天性神经系统发育异常和神经系统退行性疾病的细胞替代治疗提供了广阔的前景。
- 高飞袁正伟
- 关键词：骨髓祖代细胞细胞培养神经系统疾病
- 隐性脊椎裂胎鼠支配肛提肌脊髓运动神经元定量研究被引量：3
- 2005年
- 目的采用神经解剖学常用的荧光金(FG)标记逆向神经示踪法,结合胎儿外科显微手术和显微注射技术,探讨脊椎裂胎鼠支配肛提肌的脊髓运动神经元的发育特点。方法在大鼠孕20d用10%水合氯醛麻醉,应用胎儿外科显微手术和显微注射技术,用纤细玻璃针将5%FG注入雄性胎鼠直肠两侧肛提肌;胎鼠子宫内存活24h后,4%多聚甲醛进行灌注固定;取脊柱标本阿尔新蓝软骨染色后实体显微镜下数码相机采集脊柱软骨染色图像,经计算机软件测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离并判定隐性脊椎裂;采集图像后取腰骶段脊髓标本置入20%蔗糖溶液内,24h后连续冰冻横切片,脊髓冰冻切片荧光显微镜下观察并计数FG标记的运动神经元数目。结果正常组脊髓前角FG标记的运动神经元呈团簇状分布,左右两侧对称,主要位于脊髓前角的背内侧群和背外侧群;畸形组脊髓前角FG标记的运动神经元数目少,而且在脊髓前角的背内侧群和背外侧群之间也有少量散在分布,分布团簇状、对称性差,畸形组FG标记的运动神经元数量(244±41)个,与正常组(426±36)个和用药无畸形组(397±20)个差异显著,P<0.05。结论隐性脊椎裂胎鼠支配肛提肌的脊髓运动神经元发育异常,运动神经元数目明显减少,分布异常。
- 李勇王维林袁正伟白玉作杨屹蔡炜嵩
- 关键词：脊柱裂运动神经元
- 维甲酸致大鼠胚胎神经管畸形的组织形态学观察被引量：11
- 2004年
- 目的利用维甲酸制作先天性神经管畸形的动物模型已获得公认,但对于其导致神经组织错构瘤的发生却未见报道。本实验利用维甲酸口服制作大鼠神经管畸形动物模型,观察其出现神经组织畸胎瘤、脊髓裂开、脊柱裂等畸形形态学特点,探讨其发生机制。方法利用成熟未孕的Wistar大鼠,在妊娠10d时经胃管注入维甲酸,诱导产生神经管畸形动物模型,分别在妊娠15d、17d、19d时剖宫取出胎鼠,进行实体观察、畸形统计,同时对神经管畸形进行病理形态学研究。对照组仅给予橄榄油,剖宫时间及观察项目同致畸组。结果维甲酸致畸组共获得胎鼠99只,48.3%(48/99)孕鼠胚胎肉眼观察出现腰骶部显性脊柱裂。在48只显性脊柱裂胎鼠中,分别取不同胎龄(15d、17d、19d)各3只脊髓裂开的畸形胎鼠共9只,做石蜡切片,全部同时见到表现为多个神经管紊乱排列、骶尾部增生肿物,提示神经组织错构瘤的发生。结论维甲酸可以干扰神经发育,导致脊柱裂、脊髓裂开和神经错构瘤的发生。
- 蔡炜嵩袁正伟郭俊斌李勇王维林
- 关键词：维甲酸神经管畸形脊柱裂错构瘤
- 胶质细胞源性神经营养因子对运动神经元发育及运动神经元性疾病的作用被引量：4
- 2005年
- 目的追溯近年国内外有关胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotropicfactor,GDNF)与运动神经元发育及疾病研究的进展。方法广泛查阅近期有关GDNF与运动神经元关系的文献,综述GDNF的分子结构、作用方式及治疗时给药方式。结果GDNF对运动神经元发育及运动神经元疾病有广泛的作用,对脊髓运动神经元的发育起一定调控作用,可以挽救出现损伤的运动神经元。结论GDNF在运动神经元疾病的治疗上,具有潜在的临床价值和不可估量的前途。
- 蔡炜嵩赵红宇袁正伟
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子GDNF分子结构
- 显性脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞凋亡及凋亡相关基因表达的意义
- 2008年
- 目的观察胎鼠显性脊椎裂脊髓神经细胞凋亡的发生及神经细胞内凋亡相关基因Bcl2和Bax表达。探讨显性脊椎裂畸形发生过程中脊髓神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax在神经细胞表达的意义。方法采用原位末端标记法和免疫组化SABC法检测3（）例脊椎裂胎鼠和14例正常胎鼠脊髓神经细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达。神经细胞凋亡用凋亡指数（AI）表示，AI=凋亡细胞数／500×100％。基因Bcl-2、Bax蛋白的表达强度用平均灰度值G表示，蛋白表达越强G值越小。结果显性脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞凋亡数明显增多，正常脊髓神经细胞凋亡指数为0．5％，畸形脊髓神经细胞凋亡指数24％，统计学差异有极显著意义。正常胎鼠脊髓神经细胞Bcl-2蛋白表达强，而脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞Bax蛋白表达强，统计学分析二组脊髓神经细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异有显著性意义。结论在显性脊椎裂发生过程中脊髓神经细胞过度凋亡，提示神经细胞的过度凋亡与显性脊椎裂畸形的发生密切相关。脊椎裂畸形胎鼠脊髓神经细胞Bax蛋白表达强，Bcl-2蛋白表达弱，促进细胞凋亡，推测在脊椎裂畸形发生过程中。Bcl-2和Bax基因对脊髓神经细胞凋亡的发生起重要作用。
- 李勇侯翔宇杨屹王维林白玉作袁正伟
- 关键词：脊椎裂细胞凋亡基因BCL-2
- 宫内移植骨髓间充质干细胞对显性脊柱裂胎鼠神经元重建的作用研究
- 2014年
- 目的胚胎期移植骨髓间充质干细胞（bonemarrowstemcell，BMSCs）至先天性脊柱裂模型胎鼠脊髓中，观察其在显性脊柱裂胎鼠脊髓中存活及分化情况，并探讨其对脊髓神经元修复的治疗潜能。方法利用胎仔外科和显微注射技术将绿色荧光蛋白（eGFP）转染的BMSCs分别在胚胎第16、17和18天移植到83只脊柱裂和20只正常大鼠胚胎中（groupE16、E17andE18），胚胎20d的胎鼠脊髓被取出并固定。经冰冻切片后，计数eGFP阳性细胞数目，并利用免疫荧光方法检测脊髓中eGFP阳性的BMSCs中神经干细胞（Nestin）、神经元（Neurofilament）和神经胶质细胞（GFAP）的分布与表达。结果本研究成功的将MSC在宫内移植入胎鼠体内，孕鼠的存活率为94％（81／86），胎鼠的存活率为78．1％（136／174）；实验中孕16d的胎鼠存活率为75．8％（91／120）低于孕·17d的80．6％（25／31）和孕18d的87．O％（20／23）。计数脊髓中eGFP阳性细胞数，范围在166～735个／根，其中P0代MSCs存活率最低，为10．8％；P3～6代为22．6％、P10～14代为20．1％；P10～14代MSC在母鼠孕16d时移植得到最佳分化率；统计eGFP阳性细胞表达Nestin、Neurofilament和GFAP的阳性率分别为4％～5％、1％～2％和5％～7％。结论BMSCs移植到显性脊柱裂胎鼠脊髓中能够存活，并在脊髓中表达Nestin、Neurofilament和GFAP，提示移植骨髓间充质干细胞具有向神经干细胞、神经元和神经胶质细胞分化的可能。
- 马丽丽袁正伟蒋俊红陈海琛杨兆辉姜艳徐延波
- 关键词：间质干细胞细胞分化
