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浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金(2004QN017)
作品数:
1
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相关作者:
成晟
周酉枫
李恭会
陈昭典
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相关机构:
浙江大学医学院附属第一医院
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发文基金:
浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金
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作者
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陈昭典
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李恭会
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周酉枫
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成晟
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2009
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单个shRNA质粒同时抑制LNCaP细胞人端粒酶催化亚单位和雄激素受体的表达
2009年
目的探讨单个shRNA质粒联合抑制LNCaP细胞人端粒酶催化亚单位(hTERT)和雄激素受体(AR)基因表达的可行性。方法使用RNAi—DNA载体技术,将hTERT和ARsiRNA的DNA模板同时插入到载体Pgenesil,构建成重组质粒Pgenesil—hTERT—AR—shRNA,转染至LNCaP细胞,与空白对照、Pgenesil—HK.shRNA(通用阴性质粒)、Pgenesil—hTERT—shRNA和Pgenesil-AR—shRNA比较,利用实时荧光定量PCR技术观察其对LNCaP细胞hTERT和AR基因mRNA表达的影响。采用AnnexinV方法检测细胞凋亡,MTT比色分析法测定细胞增殖活性。结果空白对照组、Pgenesil—HK—shRNA组、Pgenesil—hTERT—shRNA组、Pgenesil—AR—shRNA组和Pgenesil—hTERT—AR—shRNA组细胞的hTERT基因mRNA分别为(1.51±0.08)×10^8、(7.32±0.43)×10^7、(2.94±0.15)×10^6、(4.45±0.25)×10^7、(3.17±0.18)×10^6(copies/ml),各组AR基因mRNA分别为(1.92±0.11)×10^5、(6.47±0.32)×10^5、(3.70±0.24)×10^4、(1.22±0.06)×10^4、(7.21±0.41)×10^7(copies/ml),提示Pgenesil—hTERT—shRNA对hTERT基因mRNA有抑制作用,Pgenesil—AR—shRNA对AR基因mRNA有抑制作用,Pgenesil-hTERT—AR—shRNA对hTERT和AR基因mRNA都有抑制作用(P〈0.05)。Pgenesil—bTERT—AR—sbRNA与Pgenesil—hTERT—shRNA、Pgenesil—AR-shRNA比较,引起的细胞凋亡、细胞生长抑制更加明显(P〈0.05)。结论含有hTERT—shRNA和AR—shRNADNA模板的重组表达质粒Pgenesil—hTERT—AR—shRNA能够明显抑制hTERT和AR基因的表达和前列腺癌细胞的生长。
李恭会
成晟
周酉枫
陈昭典
关键词:
前列腺肿瘤
人端粒酶催化亚单位
雄激素受体
RNA干扰
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