国家自然科学基金(30471736)
- 作品数：11 被引量：44H指数：4
- 相关作者：刘继红王涛叶章群王少刚陈俊更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 6种中药提取物对离体新西兰白兔阴茎海绵体的松弛作用被引量：6
- 2005年
- 目的:比较6种中药提取物(甲基莲心碱、粉防己碱、葛根素、灯盏花乙素、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1)松弛离体新西兰白兔阴茎海绵体的作用.方法:采用离体新西兰白兔阴茎海绵体肌条张力记录法,观察6种中药提取物对去氧肾上腺素(PE)诱导收缩的阴茎海绵体肌条的松弛作用.结果:在(10-8～10-3)mol/L,甲基莲心碱、粉防己碱、葛根素和灯盏花乙素对PE诱导收缩的肌条具有浓度依赖性松弛作用,其IC50分别为4.60×10-6、3.73×10-5、8.03×10-4和3.33×10-3moL/L.而人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对PE诱导收缩的肌条松弛作用较弱,终浓度为10-3mol/L时,仅分别松弛(16.32±13.36)%和(11.21±7.59)%.结论:6种中药提取物对离体新西兰白兔阴茎海绵体的松弛作用,甲基莲心碱最强.
- 陈俊刘继红王涛王少刚尹春萍肖恒军刘波杨俊陈小文叶章群
- 关键词：甲基莲心碱粉防己碱灯盏花乙素人参皂苷RB1阴茎海绵体
- 粉防己碱对离体新西兰白兔阴茎海绵体cAMP和cGMP水平的影响被引量：4
- 2006年
- 目的探讨粉防己碱(Tet)对离体新西兰白兔阴茎海绵体组织中环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响,以进一步阐明其舒张阴茎海绵体组织的作用机制。方法采用^(125)I放射免疫测定法,观察Tet对离体新西兰白兔阴茎海绵体组织中cAMP和cGMP水平的影响。结果家兔阴茎海绵体组织中cAMP基础含量为(5.67±0.97)pmol/mg。Tet能直接浓度依赖性地升高阴茎海绵体组织中cAMP的含量(P＜0.05),而腺苷酸环化酶抑制剂(MDL-12,330A)对Tet升高的cAMP水平没有抑制作用(P＞0.05)。对cAMP激发剂前列腺素E_1(PGE_1)诱导产生的阴茎海绵体组织中cAMP水平,Tet也具有浓度依赖性升高作用(P＜0.05)。家兔阴茎海绵体组织中cGMP基础含量为(0.44±0.09)pmol/mg。无论是否存在鸟苷酸环化酶抑制剂(ODQ),Tet对阴茎海绵体组织中cGMP的含量均没有影响(P＞0.05)。对cGMP激发剂硝普钠(SNP)诱导产生的阴茎海绵体组织中cGMP水平,Tet也没有任何影响(P＞0.05)。结论Tet可能是通过抑制磷酸二酯酶活性而增加阴茎海绵体组织中cAMP的含量,这是Tet松弛阴茎海绵体组织的作用机制之一。
- 陈俊刘继红王涛杨俊陈小文王少刚叶章群尹春萍
- 关键词：粉防己碱CAMPCGMP阴茎
- 粉防己碱对新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞内游离钙离子浓度的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨粉防己碱（Tet）松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制。方法体外培养的第3，4代新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞，经钙荧光指示剂Fluo-2／AM负载后，用荧光离子数字成像系统观察Tet对平滑肌细胞内[Ca^2＋]i的影响。结果Tet对平滑肌细胞内静息[Ca^2＋]i无明显影响（P〉0.05）。在细胞外钙浓度为2．5mmol／L时，1、10和100μmol／L Tet对高钾和去氧肾上腺素（PE）引起的细胞内[Ca^2＋]i升高有浓度依赖性地抑制作用。对40mmol／LKCl引起的细胞内[Ca^2＋]i升高的抑制率分别为22．0％、41．0％和73．0％（P〈0．05）。对10μmol／LPE引起的细胞内[Ca^2＋]i升高的抑制率分别为15．0％、26．4％和46．6％（P〈0．05）。在无细胞外钙时，1μmol／L和10μmol／LTet对PE引起的细胞内[Ca^2＋]i升高，无明显影响（P〉0．05）；而100μmol／LTet能明显抑制PE引起的细胞内[Ca^2＋]i升高，抑制率为28．2％（P〈0．05）。结论Tet可能通过阻滞电压依赖性钙通道、俚1受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放，降低阴茎海绵体平滑肌细胞内[Ca^2＋]i水平，这是Tet松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制之一。
- 陈俊刘继红蒋兆健王涛杨俊陈小文尹春萍刘波叶章群
- 关键词：粉防己碱阴茎平滑肌细胞钙离子
- 高血压与勃起功能障碍相互关系研究进展被引量：17
- 2011年
- 勃起功能障碍(ED)与高血压之间的关系是男科学研究的重点领域。目前研究认为,这两种疾病拥有相似的病理生理过程,如氧化应激效应造成血管内皮损害以及RhoA/Rho激酶活性上调。两种疾病均为血管功能损害这一病理过程的不同阶段。定期细致而全面评估高血压合并ED患者病情,并予以合理药物治疗显得尤为重要。在高血压患者中,5型磷酸二酯酶抑制剂无论是单用还是联合抗高血压药物使用都取得了令人满意的效果。目前,基因治疗以及脂肪源性干细胞治疗都展现出了良好的前景,通过转化医学方法可使其更好的为临床服务。
- 刘继红凌青
- 关键词：勃起功能障碍5型磷酸二酯酶抑制剂基因治疗脂肪源性干细胞
- 粉防己碱舒张离体新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌的机制研究被引量：2
- 2006年
- 目的观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)对阴茎海绵体平滑肌胞内钙释放和胞外钙内流的影响,初步探讨其舒张作用的机制。方法采用离体阴茎海绵体平滑肌肌条张力记录法,观察Tet对去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)和氯化钾(KCI)诱导收缩的肌条的影响；采用无Ca^(2+)-复Ca^(2+)实验法,观察Tet对PE诱导的依赖细胞内钙和细胞外钙的肌条收缩反应的影响。结果Tet对PE或kcl诱导的肌条收缩均具有浓度依赖性的抑制作用。100μmol/L Tet可抑制20μmol/L PE引起的依赖细胞内钙和细胞外钙的肌条收缩(P＜0．05)；结论Tet可通过阻滞电压依赖性钙通道、受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放,从而介导其对海绵体平滑肌的舒张作用。
- 杨俊刘继红陈俊王涛陈小文叶章群
- 关键词：粉防已碱阴茎钙通道
- 靶向人PDE5A3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDE5A3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rAd5-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。
- 潘运高刘继红詹鹰王涛万志华李忠远刘云
- 关键词：阴茎海绵体重组腺病毒环磷酸鸟苷
- 腺病毒载体介导PDE5-shRNAs对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙的影响
- 2009年
- 目的:观察腺病毒载体介导的PDE5-shRNAs对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙的影响,探讨利用RNAi技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性。方法:利用构建的携带2条靶向PDE5 mRNA靶位点的shRNAs重组腺病毒转染大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设立阴性对照组和空白对照组,于转染后24、48、72 h用钙离子荧光探针Fluo-3/AM进行染色,然后在激光扫描共聚焦显微镜下动态检测细胞内钙离子荧光强度,以平均荧光指数(FI)反映细胞内游离钙的相对水平。结果:实验组在转染PDE5-shRNAs重组腺病毒24、48、72 h后钙离子荧光指数分别为829.3±7.8、801.5±9.5、856.3±8.7,均明显低于阴性对照组的1106.3±10.8、1121.3±10.2、1058.5±12.1和空白对照组的1076.6±9.7、1133.4±11.2、1104.3±10.5,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腺病毒介导的靶向PDE5基因的shRNAs能够明显降低大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞内游离钙水平。
- 潘运高刘继红詹鹰王涛万志华李忠远刘云
- 关键词：细胞内钙短发夹RNA
- 应用RNA干扰技术抑制PDE_5A_3基因在人阴茎海绵体平滑肌细胞表达被引量：12
- 2006年
- 目的应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDEsA3基因的表达,探讨应用该技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性。方法构建6个靶向人PDEsA3基因的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)及Western blot检测PDE5A3基因的表达抑制效果。结果抑制率最高的1、2、4号重组质粒使PDE5A3基因表达在mRNA水平分别抑制(66．26±4．02)％,(54．90±3．06)％,(23．83± 3．61)％;在蛋白质水平分别抑制(64．14±3．32)％,(49．21±2．96)％,(29．85±4．91)％。结论 RNAi能明显抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的ED基因治疗新方法。
- 张朝晖刘继红封江南肖恒军詹鹰王涛王少刚曹正国叶章群
- 关键词：RNA干扰阴茎海绵体平滑肌细胞基因表达
- PDE_5基因特异性siRNA改善糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的研究被引量：6
- 2009年
- 目的探讨大鼠PDE_5基因siRNA对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠PDE_5基因表达的抑制作用及其对DMED大鼠勃起功能的影响。方法构建可同时表达2条针对大鼠PDE_5基因的shRNA重组腺病毒; 50只雄性SD大鼠随机取10只作为正常对照。其余建立DM ED大鼠模型,随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,分别将重组腺病毒rAd-rPDE_5-shRNA、腺病毒rAd-mock及生理盐水注射于阴茎海绵体。注射后第7天,电刺激盆神经测定各组大鼠阴茎海绵体内压(ICP)及平均周围动脉压(MAP),然后取海绵体组织通过RT-PCR和Westem blot分别检测PDE_5基因mRNA及蛋白的表达。结果ICP/MAP实验组和正常对照组显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),实验组和正常对照组间无显著性差异(P>0.05);RT-PCR和Western blot分析,实验组大鼠PDE_5基因mRNA和蛋白表达均显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论PDE_5基因shRNA重组腺病毒转染可以改善DMED大鼠的勃起功能,为DMED治疗方法的探索提供了新的思路。
- 万志华刘继红詹鹰王少刚王涛刘云潘运高李忠远
- 关键词：糖尿病勃起功能障碍小分子干扰
- 阴茎海绵体内注射川芎嗪对兔阴茎勃起效应的影响
- 2009年
- 目的观察阴茎海绵体内注射川芎嗪对兔阴茎勃起效应的影响。方法12只成年雄性新西兰大白兔，静脉麻醉后游离一侧颈总动脉和阴茎海绵体，颈总动脉插管与电生理记录仪连接监测平均动脉压（MBp），阴茎海绵体内置入25G针头与电生理记录仪连接用于测定阴茎海绵体内压（ICP）。通过在兔阴茎海绵体内注射不同剂量（0．5—5．0mg／kg）川芎嗪和等体积生理盐水，分别记录ICP变化（△ICP）、阴茎膨胀持续时间（DT）和MBp的变化。结果阴茎海绵体内分别注射不同剂量的川芎嗪（0．5、1．0、2．0、5．0mg／kg），ICP分别由基线增加至（19．1±3．7）、（24．8±2．1）、（30．2±4．8）、（39．7±6．1）mmHg（1mmHg=0．133kPa），△ICP为6．5～25．8mmHg，最大△ICP为（25．8±5．9）mmHg，DT为（8．5±2．8）～（22．9±7．3）min。阴茎海绵体内注射川芎嗪呈剂量依赖性提高ICP（P〈0．05），对MBp没有显著影响（P〉0．05）。结论川芎嗪呈剂量-效应依赖性地增强兔阴茎勃起效应。
- 肖恒军刘继红尹春萍樊龙昌王涛陈俊刘波高新
- 关键词：阴茎勃起川芎嗪
