教育部留学回国人员科研启动基金(030312)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 激光扫描共聚焦显微镜观察反义核酸探针的细胞摄取及分布被引量：1
- 2013年
- 目的采用激光共聚焦显微镜,观察荧光标记的反义寡核苷酸探针在细胞的摄取和细胞内分布。并评价阳离子脂质体载体对提高细胞摄取的作用。方法合成针对人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)第1723-1741密码子的18个碱基的反义寡核苷酸探针,在3'末端连接荧光素-5-异硫氰酸盐(FITC)。转hTERT的胎儿神经前体细胞hNPCs-G3作为实验细胞。阳离子脂质体作为反义探针载体。激光扫描共聚焦显微镜观察细胞荧光分布并测定荧光强度。结果无脂质体介导的对照组细胞荧光强度很低,荧光主要分布在细胞膜,细胞浆和细胞核荧光强度低于细胞膜。脂质体介导的实验组细胞荧光强度显著增加,细胞核荧光强度显著高于细胞膜,两者的荧光强度差异有显著意义(P<0.01)。结论无载体的反义探针细胞摄取率较低,细胞膜探针结合较多。脂质体载体可显著提高细胞对探针的摄取,且大部分探针进入细胞核。激光扫描共聚焦显微镜可以清晰显示细胞对探针的摄取及细胞分布,是一种直观有效的研究工具。
- 刘长滨徐白萱王瑞民姚树林关志伟田嘉禾
- 关键词：激光细胞摄取
- ^(188)Re标记Morpholino寡核苷酸体外稳定性及生物分布被引量：1
- 2012年
- 目的采用治疗性核素铼188(rhenium-188,188Re)标记Morpholino寡核苷酸,探讨其作为治疗性药物的可能性。方法以硫乙甘肽(Mercaptoacetyltriglycine,MAG3)作为双功能螯合剂,采用间接标记法,试验不同标记条件对标记率的影响。标记完成后检测生物活性、体外稳定性及正常小白鼠的体内分布。结果在最佳标记条件下,Morpholino的标记率为65%±12%,纯化后放化纯度>93%,比活度为(2.37±0.32)MBq/μg。稳定性检测发现,标记物在体外出现再氧化,导致188Re-Morpholino出现解离。加入抗氧化剂抗坏血酸(VitC)后可以显著提高体外稳定性。正常鼠生物分布显示,Morpholinos主要通过肾脏排泄,甲状腺及胃的摄取明显高于其他器官。结论以MAG3作螯合剂,188Re可以成功标记Morpholino寡核苷酸;188Re-Morpholino标记物体外稳定性较差,虽然加入抗氧化剂可以提高体外稳定性,但标记物在体内仍出现解离,因此,目前的标记方法可能不适合作为治疗药物。
- 刘长滨徐白萱张锦明王瑞民关志伟姚树林田嘉禾
- 关键词：铼-188生物学标记
