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黄芪多糖对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞PI3K/Akt/eNOS信号通路的影响被引量：40: 2011年; 背景:前期研究证实黄芪通过P38MAPK通路促进内皮祖细胞增殖,其影响是否通过PI3K/Akt/eNOS途径实现?目的:观察黄芪多糖对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞蛋白激酶B、内皮型一氧化氮合酶表达的影响。方法:采用密度梯度离心法获取糖尿病患者外周血单个核细胞,培养7d后鉴定内皮祖细胞。观察0,50,200,800,3200,6400mg/L黄芪多糖分别干预6,12,24,48h对内皮祖细胞影响的量效和时效关系;用黄芪多糖及黄芪多糖与PI3K抑制剂LY294002联合干预糖尿病患者内皮祖细胞,Western blot检测磷酸化Akt及磷酸化内皮型一氧化氮合酶的表达水平。以未进行任何处理健康人内皮祖细胞作为对照组。结果与结论:糖尿病患者内皮祖细胞的增殖能力较对照组明显下降(P<0.05)。黄芪多糖显著增加糖尿病患者内皮祖细胞的增殖能力,当黄芪多糖在200～800mg/L质量浓度范围,干预6～24h可呈时间及剂量依赖性增强内皮祖细胞的增殖能力(P<0.01),并呈剂量依赖性升高内皮祖细胞磷酸化Akt及磷酸化内皮型一氧化氮合酶的表达(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002能阻断黄芪多糖诱导的Akt、内皮型一氧化氮合酶的磷酸化(P<0.05)。说明黄芪多糖通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路促进内皮祖细胞增殖和向内皮细胞的分化。; 徐寒松吴青谢晓云孔德明; 关键词：黄芪多糖内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶磷脂酰肌醇-3激酶蛋白激酶B

黄芪多糖对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞增殖及NO生成的影响被引量：12: 2011年; 目的观察黄芪多糖(APS)对2型糖尿病(T2DM)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖和NO生成的影响,并探讨其机制。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7 d后鉴定EPCs,检测APS对T2DM组EPCs增殖的影响。观察APS对T2DM组EPCs NO浓度影响的时效和量效关系,然后予磷脂酰肌醇三磷酸激酶(PI3K)抑制剂LY294002和APS共培养,检测NO浓度。结果 APS在一定剂量和时间范围内能促进T2DM组EPCs增殖(P<0.05),并呈剂量和时间依赖性地升高EPCs NO浓度;PI3K抑制剂LY294002能阻断APS升高的NO水平(P<0.05)。结论鼠尾胶原可代替EPCs培养中常用的纤维连接蛋白,是体外分离培养外周血EPCs更节省的一种方法。APS能促进EPCs增殖,并促进其NO的生成,PI3K抑制剂LY294002能阻断APS引起的NO的生成。; 徐寒松吴青谢晓云孔德明; 关键词：黄芪多糖内皮祖细胞一氧化氮

黄芪多糖对2型糖尿病外周血内皮祖细胞归巢干预作用被引量：7: 2020年; 目的:探讨黄芪多糖对2型糖尿病(T2DM)患者内皮祖细胞(EPCs)归巢能力的影响方法:培养、鉴定EPCs;建立裸鼠颈动脉损伤模型;PKH26标记的EPCs;分四组:健康人组、黄芪多糖干预组、糖尿病组(即未干预组)、PBS组,前三组经尾静脉移植相应的PKH26已标记的EPCs,PBS组尾静脉注射PBS液;于3和7d后取四组裸鼠损伤动脉,冰冻切片荧光显微镜下观察移植的细胞在内膜处的表达;纵行剖开后荧光显微镜下观察移植的EPCs定向归巢到血管损伤部位的情况并计数分析。结果:同一时间内,2型糖尿病患者EPCs归巢能力较健康人明显降低(P<0.01);2型糖尿病患者EPCs经黄芪多糖干预后,其归巢能力较未干预的糖尿病人增强(P<0.05)。结论:糖尿病患者EPCs在体内归巢的能力下降;糖尿病患者EPCs给予黄芪多糖干预后能增强其定向归巢到血管损伤部位的能力。; 王燕国陈文群徐寒松王治义吴青; 关键词：归巢

移植到裸鼠体内的糖尿病患者外周血内皮祖细胞再内皮化能力的观察被引量：2: 2017年; 目的探讨糖尿病患者外周血内皮祖细胞(EPCs)体内再内皮化能力的变化。方法培养、鉴定EPCs;构建裸鼠颈动脉内膜损伤模型。分组:健康组移植健康人EPCs,糖尿病组移植糖尿病患者EPCs,PBS对照组移植PBS。显微镜下观察伊文斯蓝染色损伤内膜再内皮化的情况,HE染色观察损伤内膜与中膜的面积的厚度,借助Image-Pro Plus 5.0图像分析系统计算再内皮化率及内膜/中膜比值。结果糖尿病组内膜损伤修复面积(23.78±1.95)%小于健康组(35.93±4.37)%(P<0.05),内膜/中膜比值糖尿病组(74.50±6.80)%大于健康组(59.40±5.00)%(P<0.05)。结论糖尿病患者EPCs体内再内皮化及抑制内膜增生能力降低,可能是其血管内皮损伤及内皮修复能力下降的重要机制。; 陈文群王燕国吴青王治义徐寒松; 关键词：内皮祖细胞再内皮化裸鼠

黄芪多糖对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞体外增殖的影响被引量：5: 2011年; 目的:观察黄芪多糖(Astragalus Polysaccharides,APS)对2型糖尿病(T2DM)患者内皮祖细胞(EPCs)体外增殖的影响。方法:密度梯度离心法获取T2DM患者外周血单个核细胞,在鼠尾胶原包被的培养瓶中培养7 d后鉴定EPCs,MTT检测APS对T2DM患者EPCs增殖的影响。结果:T2DM外周血单个核细胞在鼠尾胶原包被的培养瓶中培养后呈梭形、铺路石样,表达内皮细胞的特异性抗原CD34和KDR,表达干/祖细胞抗原CD133;APS在一定剂量和时间范围内能促进T2DM外周血EPCs增殖(P<0.05)。结论:鼠尾胶原可代替EPCs培养中常用的纤维连接蛋白,是体外分离培养外周血EPCs的更节省的一种方法,APS能促进EPCs增殖。; 吴青徐寒松谢晓云陈文群; 关键词：细胞培养黄芪多糖

2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞体外诱导培养及黄芪多糖干预研究被引量：4: 2011年; 目的:探讨黄芪多糖(Astragalus Polysaccharides,APS)对T2DM外周血EPCs增殖的影响。方法:密度梯度离心法获取T2DM患者与健康人外周血单个核细胞,培养7d后鉴定EPCs。观察不同浓度黄芪多糖(0,50,200,800,3200,6400mg/L)分别干预6,12,24,48h对T2DM患者EPCs影响的量效和时效关系。结果:T2DM外周血单个核细胞在鼠尾胶原包被的培养瓶中培养后呈梭形、铺路石样,表达内皮细胞的特异性抗原CD34和KDR,表达干/祖细胞抗原CD133;具有吞噬Dil-acLDL及结合FITC-UEA-1的特性。T2DM患者EPCs的增殖能力较健康对照组明显下降(P<0.05)。黄芪多糖(APS)显著增加T2DM患者EPCs的增殖能力,呈一定的量效与时效关系,在200mg/L浓度时开始较T2DM对照组明显增强(P<0.01),于800mg/L时达最大效应(P<0.01)。200mg/LAPS作用6h后,T2DM患者EPCs增殖能力开始明显增强,24h达到高峰,48h时略有下降,但仍明显高于对照组。结论:鼠尾胶原可代替EPCs培养中常用的纤维连接蛋白,是体外分离培养外周血EPCs更节省的一种方法。APS在一定剂量和时间范围内能促进T2DM外周血EPCs增殖。; 徐寒松吴青谢晓云孔德明

波动性高糖对人外周血内皮祖细胞增殖、凋亡及丙二醛、抗氧化因子合成的影响: 目的观察波动性高糖对人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、凋亡及丙二醛(Malondialdehyde MDA)、抗氧化因子合成影响。方法密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞,培养7d后,贴壁细胞鉴定为EPCs。细胞同化后...; 徐寒松孔德明向慧谢晓云林安华; 关键词：内皮祖细胞凋亡波动性高糖; 文献传递

体外高浓度葡萄糖培养及黄芪干预人外周血内皮祖细胞的数量和增殖与分化被引量：4: 2011年; 背景:内皮祖细胞数量及功能受损是糖尿病血管并发症发生发展的重要环节,黄芪对多种原因引起内皮功能障碍具有保护作用,可以有效保护血管内皮功能。目的:观察高浓度葡萄糖及黄芪干预对人外周血内皮祖细胞数量、增殖及分化影响。方法:不同浓度葡萄糖孵育内皮祖细胞24h以及30mmol/L葡萄糖孵育内皮祖细胞不同时间;内皮祖细胞经20g/L黄芪预处理24h后,再加入30mmol/L葡萄糖培养24h。结果与结论:高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少内皮祖细胞的数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力(P0.05或0.01),给予黄芪预处理后,内皮祖细胞数量明显增加,增殖及向内皮细胞系分化能力明显增强(P<0.05或0.01)。提示高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少外周血内皮祖细胞数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力,黄芪可以改善高葡萄糖对内皮祖细胞的损伤作用。; 徐寒松雷闽湘孔德明向慧谢晓云; 关键词：内皮祖细胞葡萄糖分化

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国家自然科学基金(30960491)

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