国家林业局948项目(2007-4-02)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：王华芳范源伟贾文锁王天祥严晓丹更多>>
- 相关机构：北京林业大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- AtDREB2B基因的克隆及植物表达载体的构建
- 2008年
- [目的]获得耐旱转录因子的植物表达载体,进而转化植物获得耐旱性提高的新植物株系。[方法]提取脱水处理的拟南芥总RNA,利用AtDREB2B特异引物通过RT-PCR扩增出1.2kb片段,并将其克隆至pBS-T上,测序。[结果]序列分析表明,该克隆序列与GenBank上登录AtDREB2B基因序列的一致性为100%。进一步通过片段的亚克隆,将其构建至植物表达载体pCAMBIA1301和pBin438上,分别由rd29A启动子和重复35S启动子调控基因表达。[结论]成功构建了2种AtDREB2B的植物表达载体,并通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101,为农杆菌介导的AtDREB2B基因对植物的遗传转化奠定基础。
- 王天祥严晓丹贾文锁王华芳
- 关键词：基因克隆
- 胡杨转基因体系的建立被引量：7
- 2009年
- 胡杨(Populus euphratica)是唯一能在沙漠里生长的高大乔木树种,建立其转基因体系可为胡杨抗逆分子机制与应用技术研究提供基本方法。通过研究农杆菌介导的胡杨转GUS基因的技术体系得出以下结论:(1)胡杨再生植株体系,叶片在附加1.0μmol·L-16-BA和5.0μmol·L-1NAA的1/2MS培养基上不定芽诱导率较高;(2)转基因体系,胡杨叶片在含100μmol·L-1乙酰丁香酮的OD600值为0.4-0.6的根癌农杆菌菌液中浸染15分钟,共培养2天,GUS基因转化效率较高;(3)转基因植株抗生素筛选,转GUS基因胡杨叶片用300mg·L-1头孢霉素抑制农杆菌生长,在含9mg·L-1G418的培养基上诱导不定芽以获得转基因的抗性植株。
- 范源伟刘挨枝王华芳
- 关键词：根癌农杆菌GUS基因抗逆
