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甜菜夜蛾核多角体病毒SeMNPV egt基因的克隆及序列分析被引量：1: 2008年; 甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua multicapsid nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)是对甜菜夜蛾专性的杆状病毒。egt基因是杆状病毒非必需的早期基因,它编码一种叫做蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyl-transferase,EGT)的多肽。采用了SDS-蛋白酶K-饱和苯酚的方法进行SeMNPV基因组DNA的提取分离,并通过PCR扩增分离出egt基因,插入T载体,转化大肠杆菌,提取重组质粒,酶切鉴定,证实,从SMNPV病毒基因组中克隆到了egt基因,序列测定SeNPV egt基因orf为1572bp,可编码523个氨基酸残基。采用DNAstar软件分析,与7种核多角体病毒及1种颗粒体病毒egt基因的同源性比较显示,SeMNPV egt基因与核多角体病毒egt序列同源性较高,其中与黄地老虎核型多角体病毒(AsNPV)同源性最高,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为75%和79%。一些与egt结构和功能密切相关的氨基酸是绝对保守的。根据egt氨基酸序列进行分子进化树分析,可将昆虫杆状病毒分成两大类,即核型多角体病毒和颗粒体病毒。该研究为杆状病毒egt基因的遗传改造奠定了理论基础。; 李充璧李广宏冯笑珍曾玲周洁明李赛男

保幼激素类似物对重组甜菜夜蛾核多角体病毒SeXD1增殖的影响被引量：2: 2009年; 用重组甜菜夜蛾核多角体病毒SeXD1感染甜菜夜蛾幼虫,并于同龄期点滴保幼激素类似物Methoprene（ZR-515）,研究其对SeXD1增殖的影响。研究表明,用5×10^7PIB/ml的SeXD1感染甜菜夜蛾五龄幼虫,并以2μg/头Methoprene点滴处理效果最佳,其感染死亡率、平均单头病毒含量、病毒总产量分别为95.3%、8.6×10^8PIBs/头和2.45×10^11PIBs;比对照提高65.1%、115.0%和264.1%。研究了Methoprene对染毒及未染毒宿主消化生理的影响。结果显示,Methoprene处理不仅延长甜菜夜蛾幼虫历期,增加其取食量,还显著提高幼虫的食物转化率。; 李充璧蔡毅丁春钦王方海李广宏庞义; 关键词：METHOPRENE 病毒增殖消化生理

斜纹夜蛾核多角体病毒Splt119基因在大肠杆菌中的表达及抗体制备: 2011年; 用PCR的方法扩增得到斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirns,SpltMNPV)ORF119全长基因(Splt119),将其克隆至5′端有6×His编码序列的原核表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15[pREP4],在1 mmol/LIPTG诱导下超量表达了一个分子量约28 kD的融合蛋白。经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,免疫新西兰大白兔制备了特异的抗Splt119抗体。Western blotting免疫印迹分析表明,该抗体适合用作Spltl19蛋白功能的进一步研究。; 李赛男李朝飞庞义杨凯; 关键词：斜纹夜蛾核多角体病毒原核表达抗血清

甜菜夜蛾核多角体病毒Se29基因的克隆与序列分析被引量：1: 2011年; [目的]克隆得到甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exiguamulticapsid nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)ORF29全长基因(Se29)。[方法]用PCR的方法扩增Se29基因,将其克隆至pMD18-T载体上,获得了重组质粒T-Se29,进行序列测定和分析。[结果]获得大小为642 bp左右的序列,扩增序列与GenBank登录序列(Genbank accession No.NC_002169)核苷酸同源性100%。序列分析结果表明,Se29基因编码蛋白(SE29)存在一个可能的跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-糖基化位点,1个微体C末端靶信号位点。蛋白序列比对结果表明,SE29与棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpa armigerasingle nucleocapsid nucleopolyhedrovir-us,HaSNPV)ORF128(Ha128)的编码蛋白(HA128)具有较高的同源性,其在病毒侵染过程中的作用值得关注。[结论]成功克隆出Se29基因,为研究其在病毒侵染过程中的作用奠定了试验基础。; 李赛男李充璧龚敬文陈焕楷; 关键词：甜菜夜蛾核多角体病毒克隆

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