国家高技术研究发展计划(2001AA5361)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王臣李建民侯利华廖振林李银聚更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学河南科技大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胎盘人整合素αvβ3蛋白的纯化及其鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的从人胎盘组织中纯化整合素αvβ3蛋白,研究其免疫原性。方法采用溴化氰活化的Sepharose-4B为基质,通过交联经蛋白G柱纯化的单克隆抗体,用亲和层析的技术纯化整合素αvβ3蛋白。SDS-PAGE鉴定纯化的蛋白。并用ELISA检测整合素αvβ3蛋白的免疫反应性。结果利用单抗-Sepharose-4B亲和层析柱,从人胎盘组织中纯化得到了整合素αvβ3,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实纯化蛋白的为α和β两个亚基所组成,分子量约为125 KD和110 KD,ELISA结果显示整合素αvβ3具有良好的抗原结合活性。从胎盘组织中纯化整合素αvβ3抗原的收获率约为700μg/胎盘。结论从人胎盘组织中成功获取整合素αvβ3抗原,为后续研究奠定了基础。
- 王臣温文彦张春杰李银聚
- 关键词：蛋白纯化亲和层析法
- 抗人整合素ανβ_3 单抗E10鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的构建和表达被引量：3
- 2004年
- 为构建抗人整合素ανβ3单抗E10鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,并在噬菌体表面表达,采用PCR方法从整合素ανβ3单抗E10ScFv载体中,扩增重链可变区VH和轻链可变区VL基因。将VH基因与人重链恒定区CH1基因连接,VL基因与人CK基因连接,分别构建了鼠/人嵌合重链FD基因和轻链基因,将其克隆入pComb3,构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,用辅助噬菌体VCSM13超感染,间接ELISA及竞争抑制ELISA检测鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体活性。结果成功构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体,并在噬菌体表面展示了可结合人整合素ανβ3抗原的鼠/人嵌合Fab抗体。
- 王臣侯利华张彦明李建民廖振林杜桂鑫陈薇童贻刚
- 关键词：整合素ΑΝΒ3噬菌体展示肿瘤血管形成细胞粘附分子
