国家自然科学基金(30371294)
- 作品数：28 被引量：122H指数：7
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- 联用密度梯度离心与免疫磁珠法分离纯化人表皮朗格汉斯细胞被引量：9
- 2005年
- 目的:探讨获取较高纯度和活性的人表皮朗格汉斯细胞(LC)的实验方法。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有异硫氰酸荧光素(FITC)的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC的纯化率,采用0.4%锥虫蓝染色检测细胞的活性。结果:分选所得LC纯化率为84.48%,锥虫蓝染色显示细胞活性>95%。结论:联用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点。
- 缪旭骆丹吉玺林向飞
- 关键词：朗格汉斯细胞免疫磁珠密度梯度离心细胞分选
- 表没食子儿茶素没食子酸酯减轻UVB诱导的朗格汉斯细胞凋亡作用被引量：8
- 2006年
- 目的研究中波紫外线(UVB)对人表皮朗格汉斯细胞(LC)的光损伤作用以及绿茶活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的光保护作用。方法采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分离纯化的LC随机分为对照组、30 mJ/cm^2 UVB辐射组以及辐射后加用200μg/mL EGCG处理组,4h后以PI染色并经流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果30 mJ/cm^2 UVB辐射组的凋亡率明显高于对照组,EGCG干预组的凋亡率低于单纯UVB辐射组,但仍高于非照射对照组；且辐射后S期细胞数明显增加。几乎没有G)2/M期的细胞,EGCG处理辐射细胞后,S期细胞数减少。结论UVB可诱导人表皮LC凋亡,而EGCG具有一定的保护作用。
- 吉玺骆丹缪旭林向飞
- 关键词：郎格尔汉斯细胞紫外线表没食子儿茶素没食子酸酯细胞凋亡
- 川芎嗪对中波紫外线诱导黑素细胞黑素生成的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:研究川芎嗪(TMP)对不同剂量中波紫外线(UVB)诱导正常人黑素细胞黑素合成的影响,并初步探讨其机理。方法:常规分离培养正常人黑素细胞,分别用30mJ/cm2、90mJ/cm2的UVB照射细胞,然后加入100μg/ml、300μg/ml、600μg/ml的TMP孵育至72h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;NaOH裂解法测定黑素含量。结果:30mJ/cm2的UVB能诱导黑素细胞增殖,加强酪氨酸酶活性,促进黑素生成,TMP能显著抑制该效应,并呈剂量依赖性;90mJ/cm2的UVB对黑素细胞产生明显的细胞毒作用,细胞增殖下降,黑素合成减少,TMP则能减轻其细胞毒作用,并也表现为剂量依赖性,以600μg/ml的TMP作用最为显著,差异有统计学意义。结论:TMP不但能抑制低剂量UVB照射诱导的黑素细胞增殖和黑素合成,而且还能减轻高剂量UVB照射对黑素细胞的细胞毒作用,对黑素细胞起一定的光保护作用。
- 金颂良苏荣健朱健伟骆丹
- 关键词：川芎嗪黑素细胞中波紫外线
- 黄芩甙对中波紫外线照射HaCaT细胞后光产物的影响被引量：6
- 2006年
- 目的探讨黄芩甙对UVB照射后HaCaT细胞光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPD)的产生和清除的影响。方法以一定剂量UVB照射HaCaT细胞,在照光后不同时间点采用免疫组织化学法检测CPD的产生和清除;以黄芩甙预先孵育HaCaT细胞,再观察黄芩甙对CPD的影响。结果HaCaT细胞损伤程度随UVB照射剂量增大而加重。30mJ/cm2UVB照射后HaCaT光产物CPD的产生在0.5h左右达到高峰,同时细胞开始清除CPD,照射后4h内清除速率较快,至24h时基本清除CPD。黄芩甙预处理组UVB照射后细胞的CPD产生少于非加药组(U=2.324,P<0.05)。结论UVB照射对HaCaT细胞光损伤程度呈剂量递增性,HaCaT细胞对CPD的清除存在快速清除期及慢速清除期;黄芩甙可减少光产物生成。
- 骆丹林向飞吴迪吉玺徐丽贤明亚玲闵玮朱洁徐晶
- 关键词：紫外线HACAT细胞环丁烷嘧啶二聚体黄芩
- 强脉冲光照射对皮肤成纤维细胞活性及其分泌基质金属蛋白酶的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨强脉冲光(IPL)照射对培养状态下的人成纤维细胞形态、增殖活性以及分泌基质金属蛋白酶l(MMP-1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响。方法由健康人皮肤标本中分离培养成纤维细胞,用一定剂量IPL分别照射后进行培养,光学显微镜观察成纤维细胞形态学变化,MTY法检测细胞增殖活性,ELISA法检测MMP-1及MMP-2水平。结果成纤维细胞经IPL照射后形态无明显改变;能量密度为18,29,35 J/cm^2的IPL均可明显提高成纤维细胞活性,但无剂量依赖性。IPL照射后成纤维细胞MMP-1及MMP-2分泌水平无明显改变。结论IPL照射能增强成纤维细胞增殖活性。
- 许阳吴迪骆丹陈斌薛筑云
- 关键词：强脉冲光成纤维细胞基质金属蛋白酶类
- 外用表没食子儿茶素没食子酸酯抵抗中波紫外线对小鼠皮肤的慢性光损伤作用被引量：3
- 2008年
- 目的:研究中波紫外线(UVB)慢性辐射BALB/C小鼠后皮肤的组织病理改变、表皮细胞凋亡情况及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对其的影响。方法:EGCG局部外用于小鼠耳、背部皮肤后分别给予不同强度的UVB辐射,每日1次,连续1个月,石蜡切片苏木精-伊红染色观察不同处理条件下皮肤组织病理变化,同时应用末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测小鼠表皮中的凋亡细胞。结果:UVB慢性辐射对BALB/C小鼠皮肤有明显影响,主要表现有表皮过度角化、棘层肥厚、海绵样水肿、晒斑细胞、真皮乳头层水肿、毛细血管扩张、炎性细胞浸润等。EGCG预处理能减轻UVB诱导的上述组织病理变化。另外,对慢性低剂量UVB辐射组,EGCG有一定的促细胞凋亡作用。结论:不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤组织病理改变明显,EGCG可保护UVB辐射诱导的光损伤作用,并对低剂量慢性UVB辐射后BALB/C小鼠皮肤细胞有促进凋亡作用。
- 徐丽贤骆丹徐晶林向飞吉玺朱洁吴迪李巍
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯中波BALB/C小鼠
- 中波紫外线照射对表皮朗格汉斯细胞p53蛋白磷酸化表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:研究皮肤朗格汉斯(Langerhans)细胞(LC)在不同剂量中波紫外线(UVB)照射前、后p53蛋白磷酸化水平的差异。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化LC,将LC分为实验组和对照组,实验组分别接受30、60和90mJ/cm2UVB辐射,辐射后4h提取总蛋白,采用Western-blotting法检测各组细胞中p53蛋白及磷酸化p53蛋白的表达量,并比较两者之间的差异。结果:接受UVB辐射后,皮肤LC中p53蛋白表达基本无变化,而p53蛋白磷酸化水平显著升高,差异具有统计学意义,并呈剂量依赖性。结论:UVB辐射可刺激p53蛋白磷酸化,并呈剂量依赖性,进而诱导p53蛋白活化,发挥其下游功能。
- 吉玺骆丹林向飞缪旭吴迪徐丽贤朱洁
- 关键词：朗格汉斯细胞中波紫外线P53蛋白磷酸化
- 紫外线照射对皮肤成纤维细胞影响的实验研究被引量：6
- 2004年
- 目的研究紫外线(UV)照射对皮肤成纤维细胞形态学、生长增殖状态、突变频率和ATPmRNA表达水平的影响。方法采用一定剂量的中长波紫外线照射培养的新生儿包皮成纤维细胞。通过细胞计数记录细胞增殖,光学显微镜观察形态学变化,次黄嘌呤磷酸核糖转移酶突变实验检测突变频率,RT-PCR法检测ATPmRNA表达水平。结果成纤维细胞经UVB照射后,形态受损,细胞增殖减缓,照射72h后细胞活性只增加了约0.2倍,而非照射组增加约2.4倍。在每106个突变克隆细胞中突变频率由20mJ/cm2的(20.4±6.7)个增加到60mJ/cm2的(97.7±7.1)个。ATPmRNA表达水平随照射剂量及照射时间增加而呈下调变化。结论UV照射可使人成纤维细胞ATPmRNA表达水平呈剂量及时间依赖性下调变化,在能量消耗条件下成纤维细胞形态异常,生长受抑,突变频率与照射剂量的增加成正相关。
- 骆丹闵玮林向飞吴迪
- 关键词：紫外线照射皮肤成纤维细胞细胞增殖腺苷三磷酸
- 黑素细胞免疫学特性与紫外线关系研究进展被引量：2
- 2006年
- 已发现皮肤黑素细胞是一种具有免疫学功能的新型细胞。它能表达某些重要的表面分子,替代性地作为抗原递呈细胞,而且它亦能分泌多种细胞因子和神经肽,并受相关因素的调节,参与皮肤的免疫应答。紫外线作为一项重要的环境因素,直接和间接地影响黑素细胞的免疫学功能。
- 朱健伟骆丹
- 关键词：黑素细胞免疫皮肤紫外线
- 表没食子儿茶素没食子酸酯抗肿瘤分子机制被引量：1
- 2007年
- 茶多酚及其主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）具有明显的抗肿瘤作用，既可通过抑制核转录因子-κB（NF-κB）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、表皮生长因子受体、胰岛素样生长因子、环氧合酶（COX）-2等相关信号通路防止肿瘤发生，也可通过抑制血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶（MMP）、尿激酶纤溶酶原激活物等途径阻止肿瘤转移，有望成为一种天然的抗肿瘤药物。
- 蔡宝祥骆丹
- 关键词：肿瘤细胞凋亡表没食子儿茶素没食子酸酯
