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应用SELDI-TOF-MS筛检肝癌血清特异相关候选蛋白的研究被引量：1: 2010年; 目的筛查潜在的小分子量低丰度的HCC血清相关候选蛋白，为肝癌复杂病理机制的全面阐明、理想早期诊断标志物的发现提供新思路。方法分别收集81例伴有HBV感染和肝硬化背景的HCC患者血清，43例慢性乙型肝炎和36例肝硬化患者血清，采用弱阳离子交换蛋白芯片（WCX2）介质结合SELDI-TOF-MS对患者血清蛋白谱进行检测，并通过BiomarkerWizard软件对生成的蛋白指纹峰分别进行差异归类比较，然后采用消减差异分析确定HCC特异相关候选蛋白。标本检测前，对芯片检测系统的重复性进行分析。结果同一标本同一芯片内强度CV为17．46％，m／z平均CV为0．024％，不同芯片间强度CV为17．74％，m／z平均CV为0．024％。将信噪比大于5，且超过20％标本具有的蛋白峰认定为有意义峰，在2000～30000m／z范围内，共有128个蛋白指纹峰被确认。HCC与肝硬化患者血清蛋白指纹峰的差异比较分析显示，87个差异蛋白指纹峰有统计学意义（P〈0．05），其中强度差异在2倍以上的蛋白指纹峰有45个，在HCC患者血清中2倍上调的15个，2倍下调的30个。从HCC与慢性乙型肝炎血清蛋白指纹峰的差异分析发现，差异有统计学意义的蛋白指纹峰52个（P〈0．05），其中强度相差2倍以上的蛋白指纹峰有9个，HCC患者血清中2倍上调的2个，2倍下调的7个。从肝硬化与慢性乙型肝炎患者血清蛋白指纹峰的差异比较分析发现，差异有统计学意义的蛋白指纹峰79个（P〈0．05），其中强度相差2倍以上的蛋白指纹峰有28个，在肝硬化患者血清中2倍上调的17个，慢性乙型肝炎患者血清中2倍上调的11个。经消减差异分析筛查，确定在HCC患者血清下调表达的5个公共差异蛋白（2870、3941、2688、3165、5483m／z）及在肝硬化和HCC血清均上调表达的2个公共差异蛋白（3588、2017m／z），但蛋白2017m／z在HCC与健康人比较的本所; 崔杰峰杨蓉刘银坤康晓楠黄成孙瑞霞李杨; 关键词：生物学标记

Stathmin对肝癌细胞HCCLM3增殖及其肿瘤相关基因表达的影响被引量：8: 2011年; 目的探讨人stathmin基因在肝癌发生、发展过程中的作用及其机制。方法化学合成stathmin序列特异性小干扰RNA，用脂质体Lipofectamine^TM2000转染人肝癌细胞株HCCLM3细胞。采用RT-PCR和Western blot技术检测stathmin的RNA干扰效率；用细胞计数试剂检测干扰细胞的生长增殖情况；用膜联蛋白V／碘化丙啶双标记流式细胞术检测细胞凋亡；并用荧光定量PCR检测肿瘤增殖凋亡的相关基因。均数两两比较用配对t检验，多样本均数比较采用单因素方差分析。结果RNA干扰HCCLM3细胞后，stathmin的表达被显著抑制（P〈0．05），抑制率达90％；在RNA干扰24、48h和72h时，HCCLM3细胞的增殖抑制率分别为13．04％±0．10％、28．10％±0．41％和37．36％±2．15％（F=4．21，P〈0．05）；RNA干扰后，细胞凋亡比例从9．20％±0．64％上升至25．11％±1．62％（F=44．67，P〈0．01）；且RNA干扰组细胞癌基因c-myc、c-fos和增殖相关基因ki-67的mRNA表达水平明显下降，促凋亡基因caspase-3、bax和p53的mRNA表达水平升高（P值均〈0．05）。结论stathmin可能通过调节肿瘤增殖相关基因的表达水平来促进细胞增殖、抑制细胞凋亡，参与肝癌的发生和发展进程。; 甘淋李娟郭坤李岩舒宏王丽宋杰刘银坤; 关键词：原癌基因蛋白质类 RNA干扰

肿瘤研究中凝集素糖链分析技术的应用: 2010年; 糖组学在后基因组时代日益受到关注，糖蛋白的比较研究已成为肿瘤研究的热点，凝集素相关的糖链富集、分析技术也得到了广泛发展，运用于研究细胞、体液、组织的蛋白质糖链改变。有别于其他糖富集、鉴定技术，凝集素对不同构型的糖有特异性识别能力，可使糖及其缀合物在避免破坏糖链的前提下得到鉴定。; 陈巧佩孙淳刘银坤秦雪; 关键词：凝集素肿瘤糖组学

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艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008ZX10002-021)

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