吉林省科技厅科技发展计划项目(20090244)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王会岩尹翌秋李校堃尹海燕刘孝菊更多>>
- 相关机构：长春工程学院吉林农业大学吉林医药学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 抗菌肽CM与血管内皮生长因子VEGF_(121)在大肠杆菌中表达及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:构建和表达人VEGF121的基因工程菌,为肿瘤血管的靶向治疗提供实验数据。方法:通过PCR引物延伸的方法,获得SUMO-CM-VEGF121融合基因;将该融合基因与原核表达载体pET22b连接后转化至Rosetta-gami(DE3)宿主细胞中,通过IPTG诱导获得可溶性表达。将融合蛋白经DEAE阴离子交换层析、Ni-NTA和分子筛等方法进行纯化,用SUMO酶切除分子伴侣SUMO后,最终获得融合蛋白CM-VEGF121。结果:DNA测序,设计合成的SUMO-CM-VEGF121融合基因为774bp;所构建的表达菌株Rosetta-gami(DE3)/pET22b-SUMO-CM-VEGF121在20℃诱导24h可溶性最好,其可溶性表达为菌体可溶性蛋白的21%。Westernblotting检测该表达产物与人VEGF单克隆抗体具有特异性结合能力。结论:原核表达载体pET22b和Rosetta-gami宿主菌为CM-VEGF121最合适的条件,解决了其表达量低和不可溶问题。
- 王会岩尹海燕尹翌秋刘孝菊赵宏鑫秦玉侠刘敏李校堃
- 关键词：血管内皮生长因子融合蛋白纯化
- 乳糖诱导鸡β-防御素3在大肠杆菌中的融合表达被引量：1
- 2012年
- 目的研究用乳糖作为诱导剂对鸡β-防御素3(Gal-3)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的乳糖诱导条件。结果对于重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到良好效果,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。最优表达条件为终浓度2 g/L乳糖37℃下诱导3 h,可以达到良好的诱导效果。结论乳糖可以诱导Gal-3基因表达,并取得良好效果,为工业化生产提供了良好的实验参考和借鉴。
- 莫索贺元欣刘欢王彦魏刚张琦王会岩
- 关键词：乳糖诱导大肠杆菌
