教育部科学技术研究重点项目(99166)
- 作品数:4 被引量:27H指数:4
- 相关作者:叶勤杜鹏甘人宝辛利张励更多>>
- 相关机构:华东理工大学中国科学院上海生命科学研究院中国科学院更多>>
- 发文基金:教育部科学技术研究重点项目上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:化学工程轻工技术与工程更多>>
- Mut^s型基因重组巴斯德毕赤酵母高密度发酵过程中甲醇流加的控制被引量:8
- 2003年
- 在采用Muts 表型基因重组巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)发酵生产血管生长抑制因子(angiostatin)的过程中 ,诱导表达阶段甲醇的质量浓度对血管生长抑制因子的表达至关重要 .因重组Muts 型巴斯德毕赤酵母利用甲醇极慢 ,按文献方法流加甲醇时 ,甲醇逐渐积累达 30 g/L ,血管生长抑制素表达水平仅为 4mg/L .采用甲醇检测与控制系统对甲醇流加进行反馈控制后 ,甲醇质量浓度可稳定控制在设定范围 .采用此系统控制诱导阶段的甲醇流加 ,同时手动流加适量甘油以促进细胞生长 ,血管生长抑制因子表达水平量最高可达 89mg/L .
- 谢静莉张励叶勤周庆玮辛利杜鹏甘人宝
- 关键词:巴斯德毕赤酵母血管生长抑制因子反馈控制发酵生产
- 氨离子浓度对重组毕赤酵母的生长和血管生长抑制素表达的影响被引量:7
- 2002年
- 本研究采用流加补料培养方式培养重组巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris),表达血管生长抑制素(Angiostatin)。整个培养过程分为以甘油为碳源的生长阶段和以甲醇为碳源的诱导阶段。全过程用氨水调节pH时,诱导阶段菌体生长受到抑制,蛋白的最大表达量为9.08mg/L。进行不同氨离子浓度的摇瓶培养,证实在以甲醇为碳源时,氨离子浓度对菌体的生长有明显的影响。高密度培养中改用 2 mol/L的 KOH溶液调节 pH,诱导阶段菌体有缓慢的生长,蛋白最大表达量增为20mg/L。
- 张励叶勤辛利杜鹏甘人宝
- 关键词:重组毕赤酵母发酵
- 表达血管生长抑制素的重组毕赤酵母在诱导阶段混合碳源的流加被引量:9
- 2003年
- 为进行高密度发酵并实现外源基因的高表达 ,在表型为MutS 的重组毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达人血管生长抑制素的诱导阶段 ,采用了甘油 甲醇混合补料的培养方式。以溶氧水平作为甘油代谢指针来控制甘油限制性流加既可维持一定菌体生长 ,又不会发生发酵液中残余甘油及有害代谢产物 (乙醇 )阻遏蛋白表达。当表达阶段的菌体平均比生长速率控制于 0 0 12h- 1 ,菌体浓度达 15 0g L ,血管生长抑制素浓度最高达到 10 8mg L ,血管生长抑制素的平均比生产速率为 0 0 2mg (g·h) ,菌体关于甘油的表观得率为 0 69g g ,菌体关于甲醇的表观得率为 0 93g g。
- 谢静莉周庆玮张励叶勤辛利杜鹏甘人宝
- 关键词:重组毕赤酵母混合碳源溶氧发酵罐
- 重组巴斯德毕赤酵母高密度培养中铵离子浓度的影响被引量:4
- 2004年
- 采用MutS表型的重组毕赤酵母生产血管生长抑制素,表达阶段流加甘油-甲醇混合碳源以提高菌体密度和血管生长抑制素的表达水平,菌体密度可达174g/L,约是表达阶段采用甲醇为单一碳源的发酵过程的3倍。菌体密度的提高导致表达阶段发酵液中铵离子浓度下降很快,当发酵液中的铵离子浓度低至40mmol/L时,影响了血管生长抑制素的表达。改变pH调节方式并在发酵后期添加25mmol/L(NH4)2SO4使发酵液中铵离子浓度维持在150mmol/L以上,血管生长抑制素的表达产量达到108mg/L。
- 谢静莉周庆玮杜鹏甘人宝叶勤
- 关键词:巴斯德毕赤酵母发酵