国家自然科学基金(30471531)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 丙型肝炎病毒非结构蛋白5A下调抑癌基因PTEN的表达
- 2012年
- 目的萤虫素酶探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白5A(HCVNS5A)对抑癌基因PTEN表达的影响。方法表达HCVNS5A的质粒(pCNS5A)转染QSG-7701细胞,采用间接免疫荧光法观察HCVNS5A蛋白的表达。构建PTEN启动子驱动的萤虫素酶报告基因表达质粒PTEN-Luc,并与pCNS5A共转染QSG-7701细胞,萤虫素酶实验检测HCVNS5A对PTEN启动子活性的影响。采用RT-PCR和Westernblot分析分别观察HCVNS5A对PTENmRNA和PTEN蛋白表达水平的影响。结果转染pCNS5A的QSG-7701细胞胞浆中可见HCVNS5A蛋白表达。PTEN-Luc与不同剂量的pCNS5A质粒共转染QSG-7701细胞,HCVNS5A表达组的PTEN-Luc相对活性下降,且转染HCVNS5A质粒的剂量越大,PTEN-Luc的相对活性越低。转染pCNS5A的QSG-7701细胞内PTENmRNA和蛋白质表达均较对照组下降,且随着HCVNS5A质粒剂量增大,PTENmRNA和PTEN蛋白表达下降更明显。结论 HCVNS5A通过抑制PTEN启动子的活性而抑制PTEN基因的转录和PTEN蛋白的表达,这可能是HCV所致原发性肝细胞癌的发病机制之一。
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- 关键词：肝炎病毒丙型非结构蛋白5A
- 丙型肝炎病毒抑制DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45α的表达被引量：3
- 2012年
- 目的,探讨HCV感染对DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45仅（GADD45α）表达的影响。方法建立全基因HCVJFH1感染的Huh7．5．1细胞模型。用相对荧光定量PCR和Westernblot分别检测HCVJFHl感染和未感染的Huh7．5．1细胞中GADD45仅mRNA和蛋白质的表达水平。组间数据比较用单因素方差分析。结果HCVJFHl感染的Huh7．5．1细胞内有HCVRNA高水平复制及HCVNS5A蛋白质和核心蛋白的表达。与未感染Huh7．5．1细胞相比，HCVJFH1感染72h的细胞内GADD450α mRNA和蛋白质相对表达量均明显降低，分别为0．57±0．09比1．00±0．11和0．28±0．03比1．00±0．07，差异均有统计学意义（F值分别为75．407和560．04，P值均〈0．01）。结论HCV下调GADD45α的转录和蛋白质表达，影响DNA损伤修复，这可能是HCV感染致肝癌发生的机制之一。
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- 关键词：DNA修复
- 丙型肝炎病毒NS5A在肝癌细胞对TLR4表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白质5A(HCV NS5A)对Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法用含HCV NS5A基因的表达质粒pcNS5A瞬时转染QSG7701细胞,采用免疫细胞化学技术检测HCV NS5A及TLR4蛋白质的表达;采用逆转录聚合酶链反应观察HCV NS5A和TLR4的mRNA表达。结果转染pcNS5A质粒细胞内有HCV NS5A蛋白的表达。转染pcNS5A组TLR4 mRNA及蛋白质表达均较转染pRc/CMV和未转染质粒组明显增强,而后两组细胞TLR4 mRNA和蛋白质表达相似。结论 HCV NS5A可上调TLR4 mRNA和蛋白的表达。
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- 关键词：肝炎病毒属病毒非结构蛋白质类TOLL样受体4
