广州市科技计划项目(2011J4100040)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：李文学朱伟陈建玲陈雯吴锦银更多>>
- 相关机构：广州市疾病预防控制中心广东省职业病防治院中山大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制被引量：3
- 2013年
- 目的:为快速检测食品中的伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法:在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数:线性范围、检出限及与黄曲霉毒素(aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性;对试剂盒稳定性采用37℃破坏实验;采用3个浓度的加标回收试验确定回收率;对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果:所研制试剂盒的最低检出浓度为2ng/mL,检测线性范围为2～512ng/mL,线性方程2为Y=-0.644X+12.872(R=0.998),50%抑制浓度为10.07ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%～116.76%之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315d以上。结论:本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。
- 陈建玲李文学董志宁陈雯朱伟
- 关键词：单克隆抗体时间分辨免疫荧光试剂盒
- 石房蛤毒素时间分辨荧光免疫检测试剂盒的研制被引量：2
- 2014年
- 目的制备石房蛤毒素（STX）的单克隆抗体,利用时间分辨荧光免疫分析技术建立石房蛤毒素超微量的检测方法。方法利用STX-KLH偶联抗原免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选后获得稳定分泌抗STX抗体的杂交瘤细胞株,腹水诱生法制备大量单抗,采用间接竞争法建立STX-TRFIA时间分辨荧光免疫检测试剂盒,对试剂盒各项性能进行评价。结果该试剂盒最低检出浓度为1.0 ng/ml,校准曲线线性范围为2.0~512 ng/ml,线性方程Y=-0.455 7X＋22.872（｜r｜=0.998 3）,与腹泻性贝类毒素（DSP）、神经毒性贝类毒素（NSP）、失忆性贝类毒素（ASP）均无交叉反应,平均回收率为94.66%,与进口试剂盒同时检测广州市水产品中贝类毒素的含量,其相关系数为0.9764,P〈0.001。结论试剂盒各项指标均接近进口试剂盒水平,达到检验要求,可满足实际工作需要。
- 李文学吴锦银董志宁朱伟
- 关键词：时间分辨荧光免疫
