陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项(2009ZDKG-87)
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 相关作者：胡大海汤朝武白晓智苏映军朱雄翔更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白芷活性提取物对人角质形成细胞生物学特性的影响被引量：7
- 2012年
- 目的体外观察白芷活性提取物对人皮肤角质形成细胞(keratinocytes,KC)生物学特性的影响,初步探讨其促进创面愈合的可能机制。方法取人皮肤KC的HaCaT细胞株,复苏培养取第5代细胞进行实验。取白芷生药95%乙醇提取后,将其活性提取物溶解于含0.25%FBS的DMEM培养液中,稀释至5×10-2、5×10-3、5×10-4、5×10-5g/L,分别与KC培养5 d后采用MTT法测定细胞增殖活性,以含0.25%FBS的DMEM培养作为对照。根据细胞增殖活性确定最佳浓度后,取KC分别采用最佳浓度白芷活性提取液(实验组)及含0.25%FBS的DMEM(对照组)培养。培养48 h后流式细胞仪测定细胞周期,实时荧光定量PCR检测细胞周期相关基因细胞周期素D1(cyclin D1)、凋亡相关基因天冬氨酸半胱氨酸酶3(Caspase-3)mRNA的表达。结果培养5 d后,MTT测定5×10-4、5×10-3、5×10-2g/L浓度可促进KC增殖,吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中5×10-3g/L浓度组A值最高,确定为最佳浓度。实验组S期及G2/M期细胞数量较对照组明显增多,G0/G1期细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组cyclin D1及Caspase-3 mRNA相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白芷活性提取物能促进KC增殖,同时下调cyclin D1的表达加快细胞周期进程,下调Caspase-3的表达抑制细胞凋亡,以加快上皮化进程促进创面愈合。
- 白晓智胡大海王耀军苏映军朱雄翔汤朝武
- 关键词：白芷角质形成细胞创面愈合细胞生物学特性
- 白芷活性提取物对人脐静脉内皮细胞生物特性的影响被引量：7
- 2012年
- 目的体外观察白芷活性提取物对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生物学特性的影响,初步探讨其促进创面愈合的可能机制。方法按照随机数字表法分5×10-2g/L、5×10-3g/L、5×10-4g/L、5×10-5g/L白芷活性提取物组,以0.25%fcs/DMEM为对照组。采用噻唑蓝比色法检测不同浓度白芷活性提取物对体外培养的HUVECs增殖作用的影响。通过实时荧光定量聚合酶链式反应分别检测白芷活性提取物最适浓度培养条件下HUVECs的细胞周期相关基因cyclin D1、凋亡基因Caspase3、VEGF的mRNA表达情况。结果白芷活性提取物在5×10-3～5×10-2g/L浓度间可促进HUVECs增殖,呈剂量依赖性,吸光度值分别为(0.335±0.027、0.359±0.033),与对照组(0.306±0.023)相比差异具有统计学意义(t值分别为1.84、3.03,P值均小于0.05),其中在5×10-2g/L浓度时测得吸光度值最高,促增殖作用最为显著(t=3.03,P<0.01),为白芷活性提取物促进HUVECs增殖的最适浓度。白芷活性提取物组cyclin D1 mRNA相对表达量(0.446±0.054),低于DMEM对照组(1.000±0.150),差异有统计学意义(t=5.508,P=0.00028<0.01),白芷活性提取物组Caspase3 mRNA相对表达量(0.600±0.052),低于DMEM对照组(1.000±0.165),差异有统计学意义(t=4.67,P=0.0047,<0.01),白芷活性提取物组VEGF mRNA相对表达量(0.839±0.060),低于DMEM对照组(1.000±0.169),差异无统计学意义(t=1.709,P=0.0628,>0.05)。结论白芷活性提取物能显著促进HUVECs增殖,下调cyclin D1的表达加快细胞周期进程,同时下调Caspase3 mRNA的表达抑制细胞凋亡,且可能与白芷促进创面愈合的机制有关。
- 白晓智胡大海刘佳琦王耘川石继红朱雄翔汤朝武
- 关键词：白芷内皮细胞伤口愈合细胞增殖
- 血竭素高氯酸盐对成纤维细胞增殖与成纤维细胞生长因子mRNA表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察血竭素高氯酸盐（Dp）对人皮肤成纤维细胞（Fh）生物学特性的影响，探讨其促进创面愈合的机制。方法分离培养人正常Fb，将Dp以不同浓度（0．063、0．125、0．250、0．625、1．250、2．500mg／L）分别加入培养液，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测Dp在不同浓度以及不同时间点对体外培养的Fb增殖作用的影响。通过流式细胞仪，实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR）分别检测最适浓度培养条件下Fh的细胞周期变化以及成纤维细胞生长因子（FGF）mRNA的合成表达。结果Dp在0．625—1．250mg／L浓度范围内，其吸光度值（0．237±0．012、0．243±0．017）均高于对照组（0．208±0．011）差异有统计学意义（t值分别为2．11、2．23，P〈0．05），此浓度范围可促进Fb增殖，且呈剂量依赖性，在浓度为1．250mg／L时（A值0．243±0．017），促增殖作用最为显著（t=2．23，P〈0．01），流式细胞仪结果显示，在浓度为1．250mg／L时，Dp可明显促进Fh通过G，／S及s／G2期限制点，S期及G2／M期细胞与对照组比较明显增多，G0／G1期细胞与对照组比较明显减少（t值分别为4．32、7．53、3．27，P〈0．05）。细胞因子mRNA表达测定中，1．250mg／LDp组与对照组比较表达明显上调，差异亦有统计学意义（t=1．48，P〈0．05）。结论Dp能显著促进Fb增殖，加快Fb周期进程，同时可促进FGF的mRNA表达，可能与血竭促进创面愈合的机制有关。
- 白晓智胡大海刘洋白丽苏映军汤朝武
- 关键词：血竭素高氯酸盐成纤维细胞创面愈合细胞增殖
- 没药提取物对人成纤维细胞增殖与胶原mRNA表达影响的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察没药提取物对人皮肤Fh生物学特性的影响，探讨其促进创面愈合的可能机制。 方法从人正常包皮组织中分离并培养Fb，取第3-5代细胞用于实验。（1）将Fh接种至96孔板，按随机数字表法分为对照组，1×10-4、1×10 1、1×10-3、1×10-21、1、10、1×102 g/L没药水提取物组以及上述7种浓度的没药醇提取物组。对照组用含体积分数0. 25%小牛血清的DMEM培养液（简称低浓度血清培养液）培养，各浓度没药水及没药醇提取物组分别用含相应终浓度2种没药提取物的低浓度血清培养液培养。培养48 h，用倒置相差显微镜观察细胞形态，噻唑蓝法测定各组Fh增殖活性（以吸光度值表示）。（2）将Fh分别接种于培养瓶和培养皿中，均按随机数字表法分为2组：1 g/L没药水提取物组，用含终浓度1 g/L没药水提取物的低浓度血清培养液培养；对照组，采用低浓度血清培养液培养。培养72 h，分别采用流式细胞仪、实时荧光定量PCR法检测Fb周期与I、Ⅲ型胶原mRNA的表达。对数据进行LSD-t检验。 结果 （1）各组细胞均呈长梭形生长，1 g/L没药水提取物组细胞融合较对照组更显著。1×10-3、1×10-2、1×10-11，1、10 g/L没药水提取物组Fb吸光度值分别为0. 378±0.032、0.402±0.007、0.390±0.038、0.453±0.036、0.390±0.037，均高于对照组的0. 332±0.044，t值分别为2.24、2.93、2.69、5.73、2.71，P值均小于0.05。1×10-3、1×10-2 g/L没药水提取物组吸光度值分别为0.312±0.048、0.154±0.009，前者与对照组比较，差异
无统计学意义（t=2.84，P〉0.05）；后者显著低于对照组（t=7. 17，P〈0.05）。1×10。3、1×10。1、1、10、1×102 g/L没药醇提取物组Fh吸光度值显著低于对照组（z值为2.30 24. 79，P值均小于0. 05）。（2）1 g/L没药水提取物组CO/G1期细胞百分比为（74.3±6.3）%，明显少于对照组的（82.2 ±7.9）010，z=6.77，P〈0.05；S�
- 白晓智胡大海白丽刘洋苏映军汤朝武
- 关键词：成纤维细胞细胞增殖胶原伤口愈合
- 白芷活性提取物对成纤维细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2012年
- 目的体外观察白芷活性提取物对人皮肤成纤维细胞（Fh）生物学特性的影响，探讨其促进创面愈合的可能机制。方法分离培养人正常Fb，按照随机数字表法分白芷活性提取物不同浓度组，以体积分数0．25％的新生牛血清DMEM为对照组。采用噻唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度白芷活性提取物对体外培养的Fb增殖作用的影响。通过流式细胞仪、real-time PCR分别检测白芷活性提取物最适浓度培养条件下Fb的细胞周期变化以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达情况。结果白芷活性提取物在5×10^-4-5×10^-2g／L浓度范围内可显著促进Fb增殖，呈剂量依赖性，不同浓度白芷活性提物培养液组测得吸光度（A）值分别为0．346±0．055、0．387±0．043和0．310±0．026，与对照组（0．2734-0．042）比较，差异有统计学意义（t=3．36、5．79和2．49，P〈0．05），其中在5×10^-3g／L浓度时测得A值最高，促增殖作用最为显著，为白芷活性提取物促进Fh增殖的最适合浓度。此浓度条件下白芷活性提取物可明显促进Fh通过G1／S及S／G2期限制点，S期（26．6±2．6）及G2／M期（7．4±1．3）细胞与对照组相比明显增多，G0／G1期细胞（66．3±4．5）与对照组相比明显减少（t=11．2、5．69、2．44，P〈0．05）。5×10^-3g/L白芷活性提取物组与对照组比较I、Ⅲ型胶原mRNA表达明显上调（分别为1．61±0．26比1．00±0．16和3．36±0．40比1．00±0．14），差异有统计学意义（t=6．69、7．64，P〈0．叭）。结论白芷活性提取物能显著促进Fh增殖，加快Fb细胞周期进程，同时可上调Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达，可能与白芷促进创面愈合的机制有关。
- 白晓智胡大海王耘川刘佳琦石继红汤朝武
- 关键词：白芷成纤维细胞伤口愈合
