广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNSFA018233)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：黄元姣蔡琰何芹陈铃韩冉冉更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西壮族自治区疾病预防控制中心广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鼻咽癌细胞中S100A8与S100A9基因的克隆及其质粒构建和表达被引量：5
- 2015年
- 我们发现S100A8和S100A9蛋白质不仅在鼻咽癌患者血浆中水平高于健康人,而且在鼻咽癌组织及培养细胞中也存在高表达。本研究的目的是在鼻咽癌细胞中克隆S100A8和S100A9基因并构建表达质粒和在鼻咽癌细胞中表达,为内源性S100A8和S100A9蛋白质与鼻咽癌发生发展的关系研究奠定基础。PCR扩增目的基因S100A8和S100A9片段,将其插入载体p Bud CE4.1构建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后转染至人鼻咽癌细胞系(CNE1)进行表达并用Real time-PCR及Western Blot进行检测。PCR、双酶切和测序结果显示,S100A8和S100A9氨基酸序列无变异(S100A8有1个碱基突变),表达质粒S100A8-S100A9-p Bud CE4.1构建正确。Real Time-PCR和Western Blot结果显示,S100A8和S100A9基因在CNE1中正确转录与表达。成功克隆S100A8和S100A9基因并构建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表达质粒且可在鼻咽癌细胞中稳定表达。
- 何芹黄元姣撖子建鄢雪敏蔡琰
- 关键词：鼻咽癌S100A8S100A9
- 鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白浓度测定及临床意义被引量：5
- 2014年
- 目的探讨鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平与临床分期及血浆EB病毒VCA-IgA抗体的相关性。方法用ELISA法检测鼻咽癌患者(Ⅱ期36例,Ⅲ期104例,Ⅳ期104例)和104例体检健康者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度和EB病毒VCA-IgA抗体水平,用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。结果鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度分别为0.44(0.25,0.78)ng/mL和202.71(185.79,238.54)pg/mL,显著高于体检健康者0.29(0.18,0.44)ng/mL和192.43(170.66,193.42)pg/mL(P均<0.05)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌患者血浆S100A8、S100A9蛋白浓度均高于体检健康者(P均<0.05),且Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度高于Ⅳ期(P<0.05);Ⅲ期S100A9蛋白浓度高于Ⅱ期(P<0.05)。相关分析结果显示,鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度与EB病毒VCA-IgA抗体水平无相关性(r分别为-0.04,-0.07,P均>0.05)。结论鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平升高,且与临床分期有关。
- 韩冉冉黄元姣陈铃肖晓兰易翔蔡红武吴勇浒
- 关键词：鼻咽癌
- 携带绿色荧光报告基因的EBV-LMP1真核表达载体构建与鼻咽癌细胞中的表达被引量：2
- 2015年
- 潜伏膜蛋白1(LMP1)是由EB病毒编码的致瘤蛋白,众多研究表明LMP1蛋白可通过NF-κB、p38 MAPK、c-JNK等多条重要信号通路引起鼻咽癌细胞的生物学行为改变。我们从EB病毒阳性的B95-8狨猴淋巴瘤细胞中克隆EB病毒LMP1 c DNA,构建携带绿色荧光基因的真核表达质粒p IRES2-Zs-Green1-LMP1,通过脂质体转染的方法将质粒导入鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中,利用质粒所携带的绿色荧光蛋白表达粗略计算转染的效率,通过免疫细胞化学(ICC)、RT-PCR、Western-Blot检测该质粒的表达。本实验室所构建的p IRES2-Zs-Green1-LMP1表达质粒能在鼻咽癌细胞内表达LMP1蛋白,为后续的实验研究奠定基础。
- 撖子建何芹鄢雪敏闫琳琳蔡琰黄元姣
- 关键词：DNA克隆
