“十五”国家科技攻关计划(2004BA519A44)
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- 新城疫病毒ZJ1株F蛋白裂解位点突变对其融合活性的影响
- 2006年
- 新城疫病毒ZJ1毒株是近年来在我国水禽中流行并能引起水禽严重发病和死亡的强毒株,其F蛋白裂解位点有多个碱性氨基酸分布。将该毒株F蛋白裂解位点的112、115和117位碱性氨基酸突变成弱毒株特征的非碱性氨基酸,构建了重组表达质粒pCI-FT。分别将突变前后的F蛋白与该毒株的HN蛋白在COS-1细胞共表达,表明突变前后的F蛋白均有融合活性;分别将突变前后的F蛋白与该毒株的HN蛋白在CEF细胞共表达,表明突变后F蛋白被裂解的活性大大降低。以上研究为下一步在全长cDNA克隆水平上对F蛋白裂解位点氨基酸序列进行相应突变,研究毒力相关因素以及构建毒力致弱疫苗株等奠定基础。
- 张艳梅胡顺林孙庆吴艳涛刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F蛋白突变
- 鹅源新城疫病毒F和HN基因的表达及功能鉴定
- 2006年
- 鹅源新城疫病毒的F和HN基因经RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pCR2．1载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,构建了F基因的表达载体(pCI-F)和HN基因的表达载体(pCI-HN)。间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明:F和HN基因均能在细胞中得到较好的表达;将pCI-F和pCI-HN共转染CEF和COS细胞,转染的细胞中能形成明显的合胞体。而用pCI-F单独进行转染时,不能产生合胞体,说明F蛋白要发挥其融合作用必须要有HN蛋白的参与,同时也进一步证明F和HN蛋白与病毒的融合特性密切相关。
- 胡顺林张艳梅孙庆吴艳涛刘玉良刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F蛋白
- 用反向遗传技术致弱基因Ⅶd型鹅源新城疫病毒ZJI株
- 将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),oNDV／ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI...
- 胡顺林张艳梅孙庆刘玉良吴艳涛刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒拯救致弱
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