浙江省科技计划项目(2011C37093)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- Bio-Plex悬浮芯片系统检测两种实验兔白介素基因的差异表达
- 2013年
- 目的采用液相悬浮芯片系统同时测定实验兔圆小囊中IL-1β、IL-1R1、IL-8、IL-8RA和IL-15各基因的表达情况,并对该方法进行评价。方法利用Affymetrix的Panomics QuantiGene Plex 2.0 Assay中bDNA信号放大和多磁珠分析技术,来同时检测两种实验兔圆小囊中多重mRNA并定量。建立实验兔免疫相关白介素基因的液相悬浮芯片检测方法。结果可同时检测IL-1β、IL-1R1、IL-8、IL-8RA和IL-15各基因的含量,并发现WHBE兔IL-15基因的相对表达量显著高于JW兔(P<0.05),IL-1R1基因的相对表达量显著高于JW兔(P<0.01),IL-8RA基因在WHBE兔中的相对表达量也高于JW兔(P<0.05)。结论建立了实验兔白介素基因的液相悬浮芯片检测方法,WHBE兔的IL-15、IL-1R1和IL-8RA基因表达量较高,可能与WHBE兔独特的免疫学特性有关。
- 满曼蔡月琴徐剑钦陈诚黄宇赵泓舒杨钦钦陈民利
- 关键词：BDNA
- 兔免疫球蛋白液相悬浮芯片的制备及制备条件的优化
- 2013年
- 目的:制备兔的免疫球蛋白液相悬浮芯片并对其制备条件进行优化,为进一步建立兔免疫球蛋白液相悬浮芯片检测技术提供基础。方法:分别将亲和纯化的兔IgG、IgM和IgA偶联至荧光编码微球,然后优化捕获抗体的偶联量、检测抗体、Streptavidin-PE抗体的最佳工作浓度以及微球-血清反应时间、检测抗体反应时间和Streptavidin-PE抗体反应时间等因素,建立兔IgG、IgM和IgA液相悬浮芯片。结果:1.25×106个荧光微球的最佳偶联抗体浓度分别为10μg IgG、20μg IgM和15μg IgA;biotin标记的IgG、IgM和IgA检测抗体最佳工作浓度分别为2、2和5μg/ml;IgG、IgM和IgA的最佳Streptavidin-PE抗体浓度均为2μg/ml;微球-血清、血清-检测抗体及Streptavidin-PE抗体最佳反应时间分别为60、60和30分钟。结论:制备荧光编码微球兔免疫球蛋白悬浮芯片是可行的方法。
- 蔡月琴王德军吴蔚朱亮吕建敏朱科燕陈诚陈民利
- 兔免疫球蛋白液相芯片的制备及其检测方法的建立
- 2013年
- 目的制备实验兔的免疫球蛋白液相芯片，建立液相芯片技术（xMAP）检测方法。方法分别将兔IgG、IgM和IgA亲和纯化的捕获抗体耦联至荧光编码微球，对蛋白耦联量进行优化，制备兔IgG、IgM和IgA液相芯片，同步检测白毛黑眼兔（WHBE兔）和日本大耳白兔（JW兔）血清中IgG、IgM和IgA相对含量，建立可应用于实验兔免疫球蛋白半定量检测的xMAP方法，并对其结果用ELISA方法进行验证。结果（1）IgG、IgM和IgA的最佳蛋白耦联量分别为10、20和15№。（2）xMAP检测结果显示，WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于删兔（P〈0．05），IgA蛋白含量显著高于Jw兔（P〈O．01）；ELISA检测结果表明，WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于Jw兔（P〈0．05，P〈0．01），其中IgM蛋白含量变化达到极显著水平，IgA蛋白含量显著高于Jw兔（P〈0．01）。结论应用制备的兔IgG、IgM和IgA液相芯片建立的xMAP方法，对实验兔血清进行检测，检测结果与ELISA结果一致，提示该方法可应用于实验兔血清的IgG、IgM和IgA半定量检测。
- 蔡月琴徐剑钦徐孝平王德军黄宇吴蔚陈民利
- 关键词：免疫球蛋白液相芯片实验兔
