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结核分枝杆菌Rv3671c蛋白诱导人巨噬细胞死亡及TNF-α和IL-1β水平检测: 2013年; 目的评价MTBRv3671c蛋白对人巨噬细胞（THP-1）的影响及机制。方法将编码MTBRv3671c蛋白的基因克隆到pET-28a质粒，并在大肠埃希菌中进行表达，采用镍亲和层析和离子层析法纯化重组Rv3671c蛋白，Lowry法测定蛋白浓度，并用纯化蛋白刺激分化成熟巨噬细胞，采用Hochest染色法观察细胞的转归（凋亡及坏死）情况，同时取上清液用ELISA法检测TNF-α和IL-1β的浓度。结果MTBRv3671c蛋白在大肠埃希菌中成功表达，层析纯化获得纯度为95．0％的重组Rv36710蛋白，蛋白浓度可达0．4mg／ml。Rv3671c蛋白刺激下经Hochest染色可见巨噬细胞核以坏死状多见，上清液中TNF-α和IL-1B水平最高分别可达19000、16500pg／ml；而未加蛋白干预组TNF-α和IL-1β水平最高仅为2100、3800pg／ml，均明显低于干预组。结论MTBRv36710蛋白可诱导人THP-1坏死，而该死亡可能与细胞因子TNF-α和IL-1β高表达有关。; 蒯守刚裴豪黄利华刘忠华麦广良刘君崔振玲; 关键词：细胞死亡细菌蛋白质类巨噬细胞

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江苏省卫生厅预防医学科研基金(YZ201005)