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PRRSV缺失变异毒株HB-2(sh)/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位被引量：9: 2007年; 用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HB-2(sh)/2002滴鼻感染30日龄健康仔猪,分别于3、7、14、28、42天宰杀,用免疫组化法对呼吸道,泌尿道,生殖道和消化道的主要器官以及脑和主要淋巴器官中的病毒抗原进行了定位分析。结果表明,在各个时间段,病毒抗原阳性率最高的器官为呼吸道、消化道沿途的淋巴结,组织中的阳性细胞多数为巨噬细胞和树突细胞,从个别猪的脑、心肌、肝和呼吸道上皮的细胞检测到阳性信号,同时发现该毒株主要在巨噬细胞和呼吸道腺上皮细胞复制。; 匡宇郭鑫滕可导杨汉春陈艳红查振林; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫组织化学染色法

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型基因重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的构建被引量：10: 2007年; 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR/PCR扩增,分别扩增出大小为308 bp和417 bp的部分基因片段。用T4连接酶将目的片段与pGEM-Teasy载体系统连接,并转化到大肠杆菌DH-5α株感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测序鉴定,证实为PRRSV和PCV2的阳性重组质粒。将重组标准质粒10倍系列稀释后作为模板,通过实时荧光定量PCR方法(Real-time PCR),建立了PRRSV、PCV2的标准曲线及其直线回归方程,并确定其最佳读板温度。该方法具有线性关系好、特异性强、敏感性高、重复性好等特点,为分析PRRSV和PCV2共感染猪体内病毒的绝对含量提供了必要的技术平台。; 施开创郭鑫杨汉春李焕荣盖新娜陈艳红查振林; 关键词：PRRSV PCV2 实时荧光定量PCR 重组质粒

PRRSV和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞CD80-CD86 mRNA转录的影响被引量：4: 2007年; 用猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪圆环病毒2型(PCV2)共感染40日龄健康大白仔猪,利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞(PAM)共刺激分子CD80-CD86的mRNA转录水平进行了定量分析。结果表明,在感染后第3 d和第7 d CD80与CD86 mRNA转录显著下调(P<0.05),感染后第14 d CD86 mRNA转录水平仍低于未感染对照组。尽管CD80 mRNA转录水平在第14 d和第28 d高于对照组,CD86 mRNA转录水平在第28 d高于对照组,两者在第42 d均高于对照组,但无显著差异。证实,PRRSV和PCV2共感染可导致猪肺泡巨噬细胞的共刺激分子CD80-CD86基因转录在感染早期明显受到抑制,PAM的抗原呈递能力受到影响。; 李焕荣郭鑫磨美兰周双海陈艳红查振林杨汉春; 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒肺泡巨噬细胞

PRRSV感染对猪肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响: 通过构建猪细胞因子的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的促炎性细胞因子(IFN-α、TNF-α、IL一1β、IL-6、IL-8和MCP-1)mRNA进行了分析,同时利用...; 蒲静杨汉春司兴奎周双海郭鑫; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子; 文献传递

表达猪CD3 ε蛋白重组腺病毒的构建及免疫原性测定被引量：1: 2008年; 孙栋郭鑫杨汉春陈艳红查振林; 关键词：重组腺病毒 CD3 免疫原性 T细胞亚群抗体制备

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响被引量：11: 2007年; 采用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染后不同时相猪肺泡巨噬细胞(PAM)中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DRI、i链和SLA-DM分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的mRNA转录动态进行了定量检测。结果表明,PRRSV感染后PAM的SLA-DR mRNA转录水平在3、7和14 d下调,低于对照组;感染后3 d,Ii链、SLA-DM和CD40的mRNA转录水平极显著下调(P<0.01);CD80和CD86mRNA转录水平也在感染后3 d明显下调(P<0.05)。用流式细胞术检测PAM表面的SLA-DR抗原的结果表明,在感染后3 d短暂上升,7 d之后一直低于对照组。由此说明,PRRSV感染早期对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能产生显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降,进而影响机体的体液免疫应答。; 磨美兰杨汉春郭鑫吕艳丽周双海陈艳红查振林; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪肺泡巨噬细胞共刺激分子

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子的影响: 通过定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染过程中猪肺泡巨噬细胞(PAM)外源性抗原加工递呈相关的SLA-DR、DM分子和Ii链的mRNA转录动态进行定量检测;同时采用流式细胞术对PAM表面的SLA-...; 磨美兰杨汉春郭鑫陈艳红查振林; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪肺泡巨噬细胞; 文献传递

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