NSFC-广东联合基金(U1132005)
- 作品数:4 被引量:9H指数:1
- 相关作者:孙筱放骆玉梅范勇陈欣洁黎青更多>>
- 相关机构:广州医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金NSFC-广东联合基金广东省重大科技专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 无饲养层和动物源蛋白的β-地中海贫血诱导多能干细胞系的建立
- 2012年
- β-地中海贫血患者因无合适的造血干细胞供体来源从而不得不靠输血维持生命。诱导多能干细胞(iPS)技术为获得患者自身遗传背景的干细胞进行临床治疗开拓了新途径。目前,建立iPS细胞系的过程需要使用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层和动物源的蛋白成分,因此建立的iPS细胞系存在病原体和动物源蛋白污染的可能性,不能应用于临床。采用目前商品化的TeSRTM2和StemAdhereTMDefined Matrix限定培养体系,利用Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc 4个转录因子组装在同一表达载体的可切除的慢病毒感染人β-地中海贫血成纤维细胞,建立了5株无饲养层和动物源蛋白的β-地中海贫血iPS细胞系,这些iPS细胞系具有人胚胎干细胞典型的特征,表达人胚胎干细胞的多能性分子标记,如Oct4、Nanog、Tra-1-60等。在体外分化能够形成拟胚体,在体内分化能够形成含有3个胚层类型细胞的畸胎瘤。
- 范勇骆玉梅陈欣杰孙筱放
- 不同组织来源的细胞建立诱导多能干细胞系的研究
- 2012年
- 目的:比较不同组织来源的细胞生成iPS细胞的效率,获得高效制备iPS细胞的组织类型。方法:通过四种逆转录病毒(OCT4/SOX2/KLF4/c-MYC)转染羊水细胞、绒毛细胞和皮肤成纤维细胞,建立不同组织来源的iPS细胞系。结果:我们建立了羊水、绒毛细胞和皮肤细胞三个不同组织来源的iPS细胞系,并对其多能性基因Oct4、Nanog以及分子表面标记Tra-1-60以及体外分化为三个胚层能力进行鉴定,发现利用羊水细胞建立iPS细胞的效率显著高于绒毛细胞和皮肤细胞。结论:羊水细胞可能是制备iPS细胞的理想细胞类型。
- 范勇骆玉梅陈欣洁黎青王晓蔓孙筱放
- 关键词:羊水细胞
- 疾病特异性诱导多能干细胞(iPSCs)的建立及相关研究
- 目的 建立疾病特异性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),为此类疾病的发病机制、表观遗传学、药物筛选及诱导分化等方面的研究提供很好的细胞模型.方法 收集建立5种疾病成...
- 骆玉梅何文智孙筱放范勇陈欣洁余波澜黎青孔舒郑育红李少英
- 关键词:疾病诱导多能干细胞定向分化
- 文献传递
- 精子顶体反应及其临床应用价值的研究进展被引量:8
- 2013年
- 哺乳动物的顶体是一个膜包裹的溶酶体样细胞器,位于精子核膜与质膜之间,是一个膜结合的帽状结构,其内含多种酶。顶体反应(acrosome reaction ,AR)是精子与卵透明带(zona pellu-cida,ZP)结合之后,精子的顶体破裂,释放一系列的顶体酶的过程。受精是精子与卵子融合,精子将所携带的单倍体遗传物质与卵子的单倍体遗传物质相融合形成双倍体合子的过程。这是一个非常复杂和严格有序的生理过程,不同种类的动物,其受精方式及过程有所不同。人类受精过程包括:(1)精子获能;(2)精子与卵丘细胞之间的相互作用;(3)精子活动力的改变如超活化;(4)精子与透明带结合、透明带诱发精子顶体反应;(5)精子顶体酶激活;(6)精子穿入透明带;(7)精卵质膜融合;(8)卵子激活;(9)精子染色质解凝;(10)精卵核融合。 AR发生的主要部位是卵丘颗粒细胞间隙及透明带,顶体反应通常是在卵丘细胞团的间隙中启动,在精子穿入ZP时,AR发生的程度更大,速度更快,能使卵子受精的精子,很可能是在卵丘细胞间隙就发生AR的精子。
- 郭小桥余波澜刘见桥孙筱放
- 关键词:精子顶体反应卵透明带哺乳动物受精方式细胞间隙
- 应用双胎羊水多能干细胞建立诱导分化的内对照模型被引量:1
- 2012年
- 目的快速重编程羊水细胞为多能干细胞,建立诱导分化研究的内对照模型。方法应用逆转录病毒介导4种基因(Oct4、Sox2、c-Myc、K脾)诱导双胎羊水细胞,筛选羊水诱导性多能干细胞(human amniotie fluid-derived cells induced pluripotent stem cells,hAFDCs—iPSCs),对其进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定。结果双胎hAFDC-iPSCs能维持自我更新状态,在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因,具有体内外分化潜能,在体外长期培养能维持正常核型。结论双胎hAFDCs—iPSCs遗传背景相一致,可以为iPSCs的诱导分化研究提供很好的内对照模型,并为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源。
- 骆玉梅范勇陈欣洁岳磊黎青何文智马晓燕郑育红孙筱放
- 关键词:诱导分化诱导性多能干细胞自体移植治疗