转基因生物新品种培育专项(2009ZX08002-017B)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：李强关西贞张卫东李达田纪春更多>>
- 相关机构：山东农业大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小麦SSⅡ-A基因片段的克隆及其RNAi表达载体的构建被引量：3
- 2011年
- 可溶性淀粉合成酶Ⅱ(SSⅡ)是小麦籽粒支链淀粉合成的主要角色,但是其三个部分同源基因(SSⅡ-A、SSⅡ-B和SSⅡ-D)对支链淀粉合成的贡献大小目前还未见报道,探究它们对支链淀粉合成的作用,对小麦淀粉合成的遗传操纵和淀粉品质改良具有重要意义。此文通过RT-PCR方法克隆了小麦SSⅡ-A基因cDNA的部分序列(长度为539bp),经序列比对发现,它与AB201445.1(Triticum aestivumwSSII-A gene for starch synthase II-A,complete cds)的同源性为100%。以H质粒为中间载体,构建了SSⅡ-A基因片段的发夹结构,并将之连接到pBAC47P上高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)1Dx5启动子的下游,得到了高效特异的SSⅡ-A RNAi表达载体。这些工作为下一步遗传转化获得转基因植株以深入探究SSⅡ-A基因对支链淀粉合成的贡献大小奠定了基础。
- 张付芸陈伟霞刘子渲李保云梁荣奇
- 关键词：小麦
- 白粉菌侵染Pm21近等基因系的早期蛋白组差异研究被引量：8
- 2012年
- 分析接种小麦白粉菌E09后Pm21近等基因系及其亲本叶片的总蛋白质差异,从蛋白质组调控角度揭示Pm21基因抗白粉病的抗病机理。以Pm21近等基因系及其亲本百农3217为试材,显微观察接种后5 d内的叶片表面细胞与白粉菌孢子表型差异;采用非离子去污剂提取总蛋白质,运用双向电泳、质谱分析与数据库检索技术,比较Pm21近等基因系及其亲本接菌第4天后的叶片总蛋白质差异。超显微和显微观察结果表明,12 h后百农3217叶细胞表面与Pm21近等基因系相比褶皱明显;在接菌第2天后,在Pm21近等基因系白粉菌孢子生长明显慢于其亲本表面孢子,且孢子侵入个数较少,不萌发现象较多;在第4天后Pm21近等基因系被侵染叶片细胞出现过敏性反应;通过MALDI-TOF-MS/MS质谱测序和MASCOT软件序列分析,注释了15个表达上调蛋白点;功能分类表明,差异蛋白质分别参与叶绿体光合呼吸作用(40%)、放氧作用(13%)、代谢物合成(20%)、抗病、动力蛋白、运输等生理功能。蛋白质组水平发现,光合呼吸蛋白和叶谷氨酰胺合成酶在Pm21近等基因系感病3～4 h后就大量表达,可能是导致叶片明显变绿原因;叶谷氨酰胺合成酶的增加与光合呼吸蛋白的增加密不可分;光合呼吸蛋白和抗坏血酸过氧化物酶的上调表达为植物体在高H2O2浓度下正常生长提供了保障。另外,β-1,3-葡聚糖苷酶的过量表达也是Pm21基因前期抵御白粉菌侵染有效物质。钾离子通道蛋白可能在抗病防御过程中起到了信号转导的作用。
- 李达李强关西贞张卫东田纪春
- 关键词：白粉菌近等基因系PM21显微观察双向电泳
