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波尔山羊活体采卵与卵母细胞体外受精技术被引量：8: 2004年; 　对10只不孕不育波尔母山羊采用超数排卵、活体采卵、卵母细胞体外成熟培养以及体外受精等技术方法,探讨其是否能正常繁育后代。试验中6只供体经超数排卵处理,在发情前利用特制的采卵装置进行活体采卵,共采集到30枚形态学正常的卵母细胞。经过体外成熟培养,有21枚成熟卵母细胞进行了体外受精处理和培养,获得16枚2 细胞胚胎,移植到4只同期发情的当地山羊受体输卵管内,经妊娠检验,有两只受体受孕,其中1只受体产出正常羔羊2只。该技术经进一步改进完善后可望作为不孕不育波尔山羊繁殖后代的辅助生育技术。; 王公金季尚娟徐晓波赵伟陈舒兵; 关键词：波尔山羊活体采卵卵母细胞体外受精

波尔山羊卵泡卵母细胞的体外培养和输卵管配子移植: 2004年; 从 4头同期发情与超数排卵的因重复采胚不孕的供体波尔山羊卵巢采得 2 4枚卵泡卵母细胞 (18枚卵丘卵母细胞 ,6枚裸卵 ) ,其中 9枚卵丘卵母细胞直接与获能后的精子实施配子输卵管内移植 ,4头受体均未受孕 ;其余 15枚进行 2 6h成熟培养 ,经培养后其中 9枚卵丘卵母细胞中有 6枚卵丘扩散 ,3枚未扩散 ;6枚裸卵因均退化而弃去。 9枚卵丘卵母细胞移植至 4头受体后有两头妊娠并如期产羔各一头。; 徐小波王公金赵伟季尚娟范必勤; 关键词：波尔山羊卵泡卵母细胞体外培养

小鼠卵母细胞第一极体的采集与保存被引量：10: 2006年; 用孕马血清（PMSG）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）对6—8周龄的雌性昆明系及ICR系小鼠进行超数排卯处理，从注射hCG后10h起每间隔2h采集小鼠的卵丘卵母细胞复合体（COCs），对卵母细胞的第一极体（PbI）进行数量和形态分级统计，并用台盼蓝染色法鉴定第一极怵的活力；同时，对新获取的卵丘卵母细胞复合体进行不同温度保存条件试验。结果表明，在注射hCG后12h所获得的第一极体活性最高；在室温和37℃下，第一极体的活力在6h后便完全丧失，而在4℃下保存的第一极体，经过48h后其活力依然良好。; 刘文华孙洁王公金徐小波李朝军; 关键词：卵母细胞第一极体保存温度小鼠

杜泊绵羊冷冻胚胎移植被引量：4: 2006年; 介绍了从新西兰引进的冷冻杜泊羊胚胎解冻后移植到同期发情湖羊和小尾寒羊母羊受体的方法步骤,并分析、评价了胚胎移植的效果。结果表明:受体羊总平均同期发情率为78.4%,胚胎移植利用率达49.1%,妊娠率达59.4%,产羔率达58.0%,羔羊出生重为4.7 kg(公)和4.3 kg(母),羔羊1月龄和3月龄体重分别为14.9kg和32.4 kg;不同批次和不同品种受体间胚移效果亦存在不同程度的差异;4批次试验共移植冷冻胚胎475枚,产羔266只,现存活245只。该研究建立了可靠而有效的杜泊绵羊冷冻胚胎移植技术,有望在畜牧业科研和生产中广泛推广应用。; 王公金孙洁苏雷陈永昌徐小波胡志福储国良刘文华赵伟聂晓伟; 关键词：杜泊绵羊冷冻胚胎移植湖羊小尾寒羊

杜泊羊冷冻胚胎移植的影响因素被引量：7: 2007年; 为进一步提高杜泊羊的冻胚移植成功率,于春秋两季同期处理湖羊和小尾寒羊受体共997只(次),同期发情782只(次),发情率达78.4%,其中湖羊春秋两季平均发情率为84.6%,显著高于小尾寒羊(73.9%)(P<0.01),秋季两品种平均发情率83.3%,显著高于春季75.8%(P<0.01);对431只发情受体羊进行移植,总妊娠率为58.5%(252/431),产羔率为58.0%(250/431)。其中湖羊为受体的春秋两季平均妊娠率62.5%,高于小尾寒羊(54.7%);秋季两品种的平均妊娠率为64.8%,显著高于春季(52.5%)。囊胚移植后的平均妊娠率为61.5%,显著高于桑椹胚(41.5%),其中A级囊胚为67.4%,显著高于B级囊胚(P<0.05)和所有桑椹胚(P<0.01);B级囊胚显著高于B级桑椹胚(P<0.05),B级囊胚与A级桑椹胚间及A、B级桑椹胚间均无显著差异;C级囊胚和桑椹胚均未见妊娠。此外,受体羊卵巢黄体发育状况及移植技术熟练程度对妊娠率也有显著影响。; 徐小波王公金储国良赵伟陈永昌; 关键词：杜泊羊冷冻胚胎移植湖羊小尾寒羊

波尔山羊发情周期和妊娠期外周血浆中孕酮、雌二醇和睾酮的浓度变化被引量：38: 2004年; 测定了波尔山羊在发情周期 ( 4头 )和妊娠期 ( 5头 )外周血浆中孕酮、雌二醇和睾酮的浓度变化 ,结果显示 :发情开始孕酮浓度很低 [( 1.5± 0 .2 3)ng/ml],第 7d开始明显升高 [( 3.5± 0 .2 3)ng/ml],第 11d达最高[( 8.3± 0 .2 3)ng/ml],以后逐渐下降 ;雌二醇含量在发情当天最高 [( 6 4 .4± 9.6 )pg/ml],然后下降 ,但有波动 ;睾酮浓度在发情时较低 [( 15 .0± 2 .1)pg/ml],第 11d达最高 [( 30 .2± 5 .3)pg/ml]。在妊娠期的最初 15d ,3种激素的变化与发情周期相类似 ,但第 2 0d后孕酮明显升高 [( 12 .7± 3.3)ng/ml],以后至分娩前维持在较高水平 ;雌二醇从 2 0d起开始上升 ,分娩前 7d达最高 [( 15 3.7± 16 .7)pg/ml],分娩后下降到较低水平 ;妊娠后 10d血浆睾酮浓度较低 ,维持在 2 0～ 5 0pg/ml内波动 ,分娩前 7d上升至最高 [( 75 .3± 13.3)pg/ml]。; 赵伟王公金徐晓波; 关键词：波尔山羊发情周期孕酮雌二醇睾酮

Ser-125突变型人白细胞介素-2在家兔乳腺中的瞬时表达: 2005年; 将Ser-125突变型人白细胞介素-2(Ser-125 hIL-2)cDNA与山羊β-乳球蛋白(BLG)基因的上游调控序列融合,构建了pBLG-Ser-125 hIL-2乳腺定位表达载体.试验取6只家兔,将表达载体经乳腺导管注入妊娠后期家兔乳腺内,进行瞬时表达.分别于家兔分娩后1～10 d采奶,用ELISA方法检测乳汁中Ser-125 hIL-2含量.结果显示:注射空白对照和pIL-2质粒的2只家兔均未表达;2只直接注射表达载体的家兔中1只有表达,含量为0.06～0.53 μg/L,1只未表达;2只注射用脂质体包裹的表达载体的家兔均获表达,含量为0.18～2.36 μg/L.本试验结果证实将乳腺作为评估和筛选乳腺定位表达载体的可行性.; 李云华王公金; 关键词：Β-乳球蛋白乳腺家兔

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江苏省自然科学基金(BK2002125)