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国家自然科学基金(81070501)

作品数:11 被引量:14H指数:2
相关作者:钱冬萌王斌李玲于向民胡明更多>>
相关机构:青岛大学青岛市市立医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金'泰山学者'建设工程专项山东省科技发展计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 10篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 11篇细胞
  • 8篇巨细胞
  • 7篇胶质
  • 6篇HCMV感染
  • 5篇人巨细胞病毒
  • 5篇病毒
  • 4篇胶质细胞
  • 3篇星形
  • 3篇星形胶质
  • 3篇星形胶质细胞
  • 3篇染料木黄酮
  • 3篇木黄酮
  • 3篇巨细胞病毒
  • 3篇黄酮
  • 3篇胶质瘤
  • 3篇胶质瘤细胞
  • 2篇单纯疱疹
  • 2篇单纯疱疹病毒
  • 2篇单纯疱疹病毒...
  • 2篇凋亡

机构

  • 10篇青岛大学
  • 1篇青岛市市立医...

作者

  • 10篇王斌
  • 10篇钱冬萌
  • 9篇李玲
  • 6篇于向民
  • 4篇胡明
  • 3篇宋旭霞
  • 3篇杨瑞
  • 2篇王桐梅
  • 2篇侯云
  • 2篇周雯
  • 2篇陈豪
  • 2篇徐敬国
  • 2篇魏艳
  • 2篇张志超
  • 1篇闫志勇
  • 1篇王二朴
  • 1篇赵巍
  • 1篇辛晓妮
  • 1篇姜光域
  • 1篇朱秀丽

传媒

  • 3篇青岛大学医学...
  • 3篇微生物学杂志
  • 1篇山东医药
  • 1篇实用医学杂志
  • 1篇医学研究生学...
  • 1篇中国病原生物...
  • 1篇Virolo...

年份

  • 2篇2016
  • 2篇2015
  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 2篇2012
  • 2篇2011
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
HCMV感染对人原代星形胶质细胞IL-6和IL-8表达的影响
2012年
目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染时人原代星形胶质细胞分泌的IL-6和IL-8的表达变化。方法分离纯化人原代星形胶质细胞并用免疫荧光法鉴定纯度。用HCMV感染原代星形胶质细胞制作HCMV感染模型,采用RT-PCR及免疫荧光法检测感染后星形胶质细胞中的即刻早期(IE)mRNA和蛋白的表达(进行模型鉴定)。RT-PCR及Western blot法检测正常培养和感染HCMV的人原代星形胶质细胞中IL-6和IL-8 mRNA和蛋白的表达。结果 HCMV能够感染人原代星形胶质细胞。正常培养的人原代星形胶质细胞能够表达IL-6 mRNA和蛋白,但不表达IL-8;HCMV感染初期的人原代星形胶质细胞中IL-6 mRNA和蛋白均表达增加,IL-8表达被激活(P均<0.05),而感染后期两种因子的表达明显下调。结论 HCMV感染能够诱导人原代星形胶质细胞IL-6和IL-8的表达异常。
王二朴于向民李玲钱冬萌王斌
关键词:人巨细胞病毒白细胞介素6白细胞介素8
HCMV基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究
2013年
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚。研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCMV种属特异性的可能分子机制。首先用HCMV AD169(MOI=5)分别感染HEF和MEF,相差显微镜逐日观察细胞的形态学变化;RT-PCR检测HCMV即刻早期(IE1、IE2)、早期(UL84)和晚期基因(UL83)的表达情况;Western-blot和免疫荧光检测病毒基因编码蛋白表达的情况。形态学观察发现HEF感染HCMV后逐渐变大变圆并相互融合,第4天可见典型的HCMV特征性病变效应,而MEF则未出现上述的变化;RT-PCR和Western-blot表明HEF组表达即刻早期基因IE1和IE2、早期基因UL84和晚期基因UL83 mRNA以及各基因所编码的蛋白,且相对表达量显著高于模拟感染组(P﹤0.01);而MEF组仅IE1和IE2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于HEF组(P﹤0.05),而高于模拟感染组(P﹤0.01)。免疫荧光检测发现HEF感染72 h表达IE和UL83蛋白,而MEF则无明显表达。以上结果表明,HCMV不能在MEF中复制并产生完整子代病毒颗粒,且病毒基因表达阻止在IE2基因表达之后和UL84基因表达之前,其种属特异性可能与即刻早期蛋白低水平的表达量有关。
杨瑞王斌钱冬萌李玲周雯王桐梅胡明陈豪宋旭霞
关键词:人巨细胞病毒即刻早期基因
HCMV感染对宫颈癌细胞Siha发生上皮-间质转化的作用
2015年
目的研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对宫颈癌细胞Siha发生上皮-间质转化的作用及意义。方法实验组用HCMV AD169(MOI=5)和5ng/ml TGF-β1作用宫颈癌Siha细胞,同时将仅TGF-β1作用的Siha细胞作为对照组,分别在0、24、48、72h观察细胞形态的变化,应用RT-PCR检测E-钙粘蛋白和波形蛋白的转录水平,采用Western blot检测E-钙粘蛋白、波形蛋白和MMP-2的表达水平。结果实验组细胞于48h发生细胞形态学的变化,早于对照组的72h;实验组上皮细胞标记物E-钙粘蛋白的转录和表达水平较对照组显著下调(P<0.01),间质细胞标记物波形蛋白的转录和表达较对照组显著上调(P<0.01)且表达提前,MMP-2的表达较对照组显著上调(P<0.01)且表达提前。结论 HCMV感染可促进宫颈癌细胞Siha发生化上皮-间质转化。
赵玉丹王斌朱秀丽钱冬萌宋静宜查龙肖
关键词:人巨细胞病毒宫颈癌SIHA上皮-间质转化TGF-Β1
黄芩素抑制人巨细胞病毒感染星形胶质细胞的实验研究被引量:1
2014年
目前对人巨细胞病毒(human cytomegalovirous,HCMV)感染尚无特异有效的治疗和预防手段,研究通过观察黄芩素(baicalein,BAI)抑制HCMV体外感染人星形胶质细胞引起的IE、pp65 mRNA及蛋白表达的变化,探讨黄芩素抗HCMV感染的机制。运用MTT法检测BAI组、HCMV组、HCMV+BAI组和对照组细胞的细胞活性,观察BAI对HCMV感染致人星形胶质细胞增殖异常的抑制作用;Real-time PCR检测不同组之间IE、pp65 mRNA表达的变化;免疫荧光、Western blot技术检测IE、pp65蛋白表达的变化。MTT结果显示,20μmol/L BAI+HCMV组的吸光值在24、48、72 h均高于HCMV组(P<0.05);形态学观察病毒感染48 h时,HCMV组细胞出现明显的细胞病变效应(CPE),而20μmol/L BAI+HCMV组细胞状态较好,CPE不明显;Real-time PCR结果显示在感染48和72 h时20μmol/L BAI+HCMV组IE、pp65的mRNA表达明显低于HCMV组(P<0.05);免疫荧光、Western blot结果显示20μmol/L BAI+HCMV组细胞的IE、pp65蛋白表达明显低于HCMV组(P<0.05)。以上结果显示,适当浓度的黄芩素能抑制HCMV感染所致的细胞增殖异常,同时降低IE及pp65的mRNA和蛋白表达量。
周雯李玲于向民刘爱红王斌钱冬萌杨瑞张志超
关键词:黄芩素人巨细胞病毒
染料木黄酮对HCMV感染的人星形胶质细胞即刻早期蛋白表达影响被引量:2
2015年
目的探讨染料木黄酮(Gen)对人巨细胞病毒(HCMV)感染的人星形胶质细胞(AS)即刻早期蛋白72(IE72)表达的影响。方法选取对数生长期的AS进行以下实验。HCMV组:HCMV感染AS;Gen组:用含40μmol/L的Gen与含体积分数0.02的FBS的DMEM/F12培养液培养AS;Gen+HCMV组:用含40μmol/L的Gen与含体积分数0.02FBS的DMEM/F12培养液预培养AS 4h后,HCMV感染AS;对照组:仅以含体积分数0.02FBS的DMEM/F12培养液培养AS。分别用噻唑蓝(MTT)法检测Gen对AS增殖的影响,Real-time PCR和Western blot方法检测IE72mRNA和蛋白的表达。结果 MTT法检测结果显示,Gen+HCMV组24、48、72h的吸光度值均高于HCMV组(t=5.94~12.99,P〈0.05)。48h时,HCMV组细胞有明显的细胞病变效应(CPE),而Gen+HCMV组细胞状态良好,CPE不明显。Western blot方法检测结果显示,Gen+HCMV组IE72蛋白表达水平低于HCMV组(t=4.90~7.67,P〈0.05)。Real-time PCR结果显示,感染24、48、72和96h时,Gen+HCMV组IE72mRNA的表达低于HCMV组(t=9.70~18.61,P〈0.05)。结论适当浓度的Gen能抑制HCMV感染所致的AS异常增殖,并抑制IE72蛋白的表达。
张志超李玲于向民卢桂玲王斌钱冬萌
关键词:染料木黄酮巨细胞病毒星形胶质细胞
HSV-1感染对神经胶质瘤细胞NGF和BDNF表达变化的研究被引量:4
2011年
目的:探讨单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)和脑源性神经生长因子(BDNF)的表达变化。方法:采用RT-PCR法检测HSV-1糖蛋白D(gD)基因扩增,RT-PCR法和Westernblotting法检测正常培养和感染HSV-1的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF和BDNF。结果:HSV-1可感染U251细胞;正常U251细胞可表达NGF和BDNF;HSV-1感染U251细胞后,NGF和BDNF在感染后第6小时达高峰,之后随感染时间延长逐渐降低。结论:HSV-1可诱导U251细胞中的NGF和BDNF表达异常。
侯云王斌李玲胡明辛晓妮钱冬萌闫志勇赵巍宋旭霞
关键词:神经胶质瘤单纯疱疹病毒1型神经生长因子脑源性神经生长因子
Inhibitory Effects of Ginsenoside Rb1 on Apoptosis Caused by HSV-1 in Human Glioma Cells被引量:5
2012年
To investigate the inhibitory effects of Ginsenoside Rb1 (GRb1) on apoptosis caused by Herpes Simplex Virus-1(HSV-1) in Human Glioma Cells (U251), U251 cells were infected by HSV-1 at a multiplicity of infection of 5 and GRb1, GRb1+HSV-1, HSV-1 and control groups. MTT and cell apoptosis assays were used to detect the inhibitory effects of GRb1 on the apoptosis of U251 cells that caused by HSV-1 infection for various concentrations of drug and virus treatments by MTT assay. We found that in the 400 μg/mL GRb1 and 400 μg/mL GRb1+HSV-1 groups, MTT values were higher than control group at all times (P<0. 05). Moreover, the apoptosis rate in the 400 μg/mL GRb1+HSV-1 group was lower than the HSV-1 group (P<0. 05). These results confirmed that, at appropriate concentrations, GRb1 could inhibit nerve cell apoptosis in HSV-1 infections.
Yuan-Yuan LiangBin WangDong-Meng QianLing LiZhi-Hao WangMing HuXu-Xia Song
关键词:神经细胞凋亡人参皂甙RBLHSV-1U251细胞MTT法
染料木黄酮抑制HCMV感染人星形胶质细胞的机制被引量:1
2016年
目的探讨染料木黄酮(Gen)抑制人巨细胞病毒(HCMV)感染人星形胶质细胞的效果及机制。方法实验设立空白对照组(C组)、Gen对照组(G组)、HCMV组(V组)、HCMV+Gen组(V+G组)及Gen+HCMV组(G+V组)。采用CCK-8筛选合适的药物浓度。采用反转录-实时定量PCR技术检测各组病毒即刻早期蛋白编码基因IE1和IE2、宿主hsa-miR-200家族及病毒miR-UL112的表达;采用染色质免疫共沉淀法检测与HCMV主要即刻早期启动子(MIEP)结合的组蛋白H3乙酰化的变化。结果筛选出实验用药物浓度为10μmol/L。与V组相比,G+V组和V+G组IE1、IE2基因的表达下调(F=14.790~126.000,P〈0.05),在部分时间段内hsa-miR-200家族及miR-UL112表达上调(F=3.041~4 638.724,P〈0.05),与病毒MIEP结合的组蛋白H3的乙酰化降低(F=18.184~32.848,P〈0.05)。结论 Gen能一定程度抑制HCMV感染人星形胶质细胞所致的增殖异常,其机制可能为Gen能一定程度抑制IE1和IE2基因的表达以及与病毒MIEP结合的组蛋白H3的乙酰化,并上调部分宿主hsa-miR-200microRNA及病毒miR-UL112的表达。
徐敬国李玲于向民魏艳王斌钱冬萌
关键词:巨细胞病毒小神经胶质细胞染料木黄酮微RNAS免疫沉淀法
HCMV感染对恶性胶质瘤U87细胞增殖及ATF5表达的影响被引量:2
2014年
人巨细胞病毒(HCMV)能够诱导肿瘤细胞的恶性转化,但其分子机制尚有待进一步探索。探讨HCMV是否通过调控转录激活因子5(ATF5)的表达变化促进胶质瘤细胞的增殖。采用HCMV AD169株(MOI=5)感染神经胶质瘤U87细胞株,MTT方法观察HCMV感染0、12、24、48 h后细胞的增殖活性。Real-time PCR及Western-blot检测HCMV感染U87细胞后ATF5基因及蛋白的表达水平变化。以慢病毒为载体的靶向ATF5小干扰RNA构建载体,敲低ATF5表达水平后感染HCMV,MTT检测病毒感染细胞的增殖活性变化。HCMV感染神经胶质瘤U87细胞后,与未感染组比较,增值活性明显升高(P<0.05),ATF5表达水平上升,表明HCMV感染使胶质瘤细胞增殖活性提高,细胞抗凋亡能力增强。成功构建沉默ATF5细胞系siATF5 U87,HCMV感染siATF5 U87细胞后使细胞增殖活性减弱,抗凋亡能力下降。以上实验结果表明,HCMV感染上调胶质瘤U87细胞ATF5的表达水平,促进细胞的增殖。因此HCMV感染可能通过调控ATF5信号通路增加细胞恶性性状,为治疗胶质瘤提供一个新的思路。
王桐梅钱冬萌胡明李玲张丽陈豪杨瑞王斌
关键词:人巨细胞病毒细胞增殖
黄芩素对HCMV感染人神经干细胞的作用及机制
2016年
目的探讨黄芩素(BAI)对人巨细胞病毒(HCMV)体外感染的人神经干细胞的作用及其可能机制。方法体外培养人神经干细胞,给予HCMV感染和不同浓度的BAI处理24、48、72h,观察其形态学变化,采用MTT法检测BAI对HCMV感染人神经干细胞增殖的影响,采用实时荧光定量PCR技术检测BAI对HCMV感染人神经干细胞中miR-200和miR-UL112-3p表达的影响。结果在病毒感染后24h,HCMV组细胞出现明显的细胞病变效应(CPE),10μmol/L BAI+HCMV组细胞CPE不明显。HCMV感染后24、48、72h,10μmol/L BAI+HCMV组细胞MTT检测吸光度值均高于HCMV组(F=18.61-22.57,P〈0.05)。HCMV感染人神经干细胞后24、48、72h,miR-200和miR-UL112-3p表达下调,10μmol/L BAI+HCMV组和HCMV+10μmol/L BAI组细胞miR-200和miR-UL112-3p表达明显高于HCMV组(F=2.37~19.26,P〈0.05)。结论一定浓度BAI能够抑制HCMV感染人神经干细胞的增殖,这可能与其上调细胞内miR-200和miR-UL112-3p的表达有关。
魏艳李玲于向民徐敬国王斌钱冬萌
关键词:黄芩素巨细胞病毒神经干细胞微RNAS
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