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西尼罗病毒外膜蛋白的表达及其抗原性鉴定被引量：1: 2006年; 西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）属黄病毒科、黄病毒属，血清学分类与乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）同属JEV复合组。该病毒主要引起人和哺乳动物的西尼罗热和西尼罗脑炎，是近年来倍受关注的新发虫媒传染病之一。WNV基因组核酸为单股正链RNA，由约11kb核苷酸组成。; 张久松张泮河高玉然刘一萍司炳银曹务春; 关键词：单股正链RNA 乙型脑炎病毒西尼罗病毒虫媒传染病

西尼罗病毒与乙脑病毒免疫交叉反应的实验研究被引量：3: 2006年; 为明确西尼罗病毒(WNV)与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应,本文分别用WNV全抗原与JE减毒活疫苗免疫小鼠,采用间接免疫荧光试验检测血清中2种病毒IgG抗体水平及其交叉反应情况。结果表明:WNV组在第4次免疫后的14天和35天出现2个高峰,平均效价分别为6088和4305;JEV组第4次免疫后,小鼠血清JEV抗体呈现缓慢上升的趋势。无论是在WNV全抗原免疫小鼠血清中还是在JE减毒活疫苗免疫小鼠血清中,同一血清对WNV抗原和JEV抗原均有反应,且抗体效价差异有显著性。在抗WNV抗体阳性血清中,两者交叉反应相对较强,在抗JEV抗体阳性血清中,两者交叉反应较弱。WNV与JEV存在一定交叉反应,但是否有交叉保护作用则需要中和试验等进一步证实。; 高玉然张久松张泮河刘一萍曹务春; 关键词：西尼罗病毒流行性乙型脑炎病毒间接免疫荧光试验 IGG抗体

一株西尼罗病毒株的生物学特征研究被引量：1: 2005年; 目的　对引进的西尼罗病毒 (WNV)毒株的形态学、致病性、细胞敏感性、免疫原性等生物学性状进行探讨 ,为进一步开展WNV的相关研究奠定基础。方法　选择Vero E6与C6 36细胞观察WNV的细胞病变效应 (CPE) ,并制作电镜负染标本和组织切片标本进行病毒形态学鉴定 ;通过乳鼠脑内接种WNV确认其致病性 ;以灭活的感染乳鼠脑悬液免疫BALB c小鼠 ,以间接免疫荧光试验(IFA)测定其血清WNVIgG抗体 ;用RT PCR检测病毒核酸 ,扩增的核苷酸序列通过BLAST作同源性比较。结果　WNV所致Vero E6与C6 36细胞的CPE分别以细胞圆缩和融合为主要特征 ;电镜下所见病毒体为有包膜、直径约 30～ 5 0nm的球形颗粒 ;脑内接种WNV可致全部乳鼠死亡 ;灭活病毒可诱导小鼠产生WNV抗体 ;经RT PCR扩增 ,在WNV培养液及感染乳鼠脑组织中均检测到目的基因片段 ,且仅与WNV有较高的同源性 (94 %～ 1 0 0 %)。结论　本研究使用的WNV毒株可供进一步开展WNV的相关研究。; 张久松张泮河詹琳司炳银祝庆余曹务春; 关键词：间接免疫荧光试验 RT-PCR扩增 C6/36细胞 WNV 细胞敏感性同源性比较

西尼罗病毒与乙型脑炎病毒生物学性状的比较与鉴别被引量：2: 2005年; 目的对西尼罗病毒(WNV)和乙脑病毒(JEV)的致细胞病变效应(CPE)、致病性、形态学、免疫学和分子生物学性状进行比较,为WNV感染的鉴别诊断提供依据。方法通过给C6/36细胞和乳鼠接种WNV或JEV,观察两种病毒的CPE和致病性;制作组织切片的透射电镜标本进行病毒形态学观察;分别用间接免疫荧光试验(IFA)和RTPCR方法对两种病毒抗体阳性血清及病毒核酸进行检测。结果WNV和JEV所致C6/36细胞CPE分别以细胞融合和细胞脱落为主要特征;脑内接种两种病毒对乳鼠的致病性未见明显差别;电镜下,两种病毒体的形态与大小相似;WNV与JEV之间存在抗原交叉反应;用黄病毒通用引物可从WNV和JEV感染组织中检出病毒核酸,而用特异引物仅能扩增出相应病毒的核苷酸片段。结论病毒所致C6/36细胞CPE与病毒核酸检测可作为WNV与JEV有效的鉴别方法,对两种病毒抗体效价进行同时测定有助于病原体感染的诊断。; 张久松张泮河司炳银杨红曹务春; 关键词：西尼罗病毒生物学性状

西尼罗病毒抗体酶联免疫吸附试验检测方法的评价被引量：1: 2007年; 目的系统地评价血清西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为在人群和宿主动物中进行WNV感染血清流行病学调查提供技术支持。方法利用构建的包膜蛋白重组质粒(pQE-30)表达纯化西尼罗病毒包膜蛋白,以此为抗原进行ELISA检测。在对抗原包被量、酶标抗体浓度、血清稀释度进行优化的基础上,对本方法的灵敏度和特异度进行评价。结果确定最适抗原包被量为0.034μg,酶标抗体工作浓度和血清稀释度分别为1∶4 800和1∶80;批内变异和批间变异分别为6.7%和22.6%;对小鼠WNV抗体阳性血清53份、JEV抗体阳性血清48份和阴性对照血清94份进行检测,灵敏度为86.8%,特异度分别为93.8%和92.6%。结论本研究建立的ELISA方法灵敏、检测抗体特异,结果可重复,是一种有价值的血清学调查方法。; 何虎鹏张久松丁国武张泮河刘一萍高玉然曹务春; 关键词：西尼罗病毒包膜蛋白酶联免疫吸附试验

间接免疫荧光试验在西尼罗病毒抗体检测中的初步应用被引量：7: 2005年; 目的了解人群血清西尼罗病毒(WNV)抗体存在的本底,探讨WNV与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应。方法以新兵入伍健康体检时收集的男性血清347份为检测标本,应用建立的间接免疫荧光试验(IFA)对WNV与JEV的IgG抗体进行检测。结果血清WNV和JEV的抗体阳性率分别为3.2%(11/347)和5.7%(14/244);在同时检测了两种病毒抗体的244份标本中,有3份两者均为阳性,分别占WNV和JEV抗体阳性数的60%(3/5)和21%(3/14)。结论人群对WNV缺乏免疫力,JEV抗体对WNV的交叉免疫作用有一定的局限性。; 张久松张泮河詹琳徐伟才司炳银曹务春; 关键词：西尼罗病毒乙型脑炎病毒血清抗体间接免疫荧光试验

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