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新型H7N9禽流感病毒研究进展被引量：23: 2014年; 新型H7N9禽流感病毒对中国的突袭引起了全球的高度关注。本文从H7N9禽流感病毒可能的起源和基因重组事件、病毒基因的多样性、重要突变位点与病毒致病性、采样与实验室检测、流行病学调查、临床症状、治疗、疫苗研究和预防等多个方面对国际、国内有关H7N9禽流感病毒的研究进展进行综述,以期为H7N9禽流感病毒的防控提供参考。; 修文琼郑奎城; 关键词：基因重组基因突变流行病学调查疫苗

2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析被引量：8: 2013年; 目的通过对2010—2012年福建省分离的H3N2亚型流感毒株血凝素HA1基因进行分析，了解2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒的基因特征和变异规律。方法随机选择28株毒株，提取病毒RNA，采用RT-PCR扩增目的片段，纯化PCR产物后进行测序；利用DNAstar和Mega4．0等生物信患学软件进行核苷酸整理、拼接、校对、差异性比较以及基因进化树构建等分析研究。结果28株H3N2亚型流感病毒HAl区核苷酸同源性在96．4％～100％之间。基因系统进化分析显示，其进化规律都是沿着树枝主干随着时闻推移向，上延伸，序列的差异和年代成正比。2010—2012年间HAl区共出现43个氨基酸位点的变化，其中有10个氨基酸位点变异累计涉及4个抗原决定簇，2个变异位点发生在受体结合位点（RBS）及其附近，应予高度重视。结论相对于A／Perth／16／2009疫苗代表株，2012年的部分H3N2亚型流感出现了抗原漂移；部分毒株已出现氨基酸位点的改变，并涉及抗原决定簇及受体结合位点，提示2010—2012年福建省人群中流行的H3N2亚型流感正逐渐发生变异，应加强流感病原学监测，以及时发现新的流感变异株，为福建省流感防控提供科学依据。; 谢剑锋沈晓娜王美爱杨式芹修文琼黄萌张炎华翁育伟严延生郑奎城; 关键词：甲型流感 H3N2亚型 HA1基因

鸡胚分离甲型H1N1流感病毒的特征分析被引量：3: 2013年; 目的了解鸡胚法分离甲型H1N1流感病毒的特征,为监测实验室开展常规病毒分离和疫苗制备提供参考。方法收集经核酸检测阳性的甲型H1N1流感病例呼吸道标本接种SPF鸡胚,应用红血球凝集试验判定分离结果并测定病毒滴度,以血凝抑制试验鉴定毒株型别。结果对2009-2012年采集的335例甲型H1N1流感病例标本进行鸡胚病毒分离,平均分离率为87.76%。在鸡胚传代第1代,病毒分离阳性率为6.8%,第2代阳性率为64.29%,第3代则达到96.26%。但病毒在鸡胚中的复制效率不高,血凝滴度普遍较低,73.13%的分离物血凝滴度低于1∶16,48.64%的分离物血凝滴度低于1∶4。结论鸡胚对甲型H1N1流感病毒敏感,可用于病毒分离,持续传代有利于提高病毒分离阳性率,但病毒培养物的血凝滴度普遍较低。; 杨式芹翁育伟郑奎城谢剑锋沈晓娜黄萌张炎华严延生; 关键词：甲型H1N1流感病毒病毒分离鸡胚血凝试验

人感染H7N9禽流感病毒全基因组扩增与测序方法的建立被引量：4: 2015年; 目的为了解人感染H7N9禽流感病毒基因特征从而更有效地防控疫情,需建立获得人感染H7N9禽流感病毒全基因序列的扩增和测序方法。方法采用鸡胚分离H7N9禽流感病毒,提取标本和毒株病毒RNA,自行设计引物,通过一步法RT-PCR扩增其全基因组片段,纯化PCR产物后测定核苷酸序列,利用生物信息学软件拼接各节段序列并初步分析其特征。结果本研究中的引物能特异地扩增各基因的目的片段,通过序列拼接可以获得H7N9禽流感全基因组序列。经分析8个节段序列与近期国内流行的人感染H7N9禽流感病毒序列高度同源。结论该方法能有效地获得人感染H7N9禽流感病毒全基因组序列,可为进一步分析其基因特征奠定基础。; 谢剑锋赵琳张炎华翁育伟陈炜王金章何文祥吴冰珊黄萌黄枝妙朱颖郑奎城严延生; 关键词：全基因组

流感病毒反向遗传技术的研究进展被引量：1: 2015年; 流感病毒基因组为分节段单股负链RNA。反向遗传技术是通过克隆感染性cDNA拯救出病毒的新兴技术,常用来研究流感病毒的基因结构和功能,研制流感疫苗。本文对流感病毒反向遗传技术的发展概况及其在研究跨种属传播、研制流感疫苗、研究基因结构和功能方面进行综述。; 李颖婷谢剑锋郑奎城; 关键词：流感病毒反向遗传技术流感疫苗基因结构致病机理

福建省甲型H1N1流感病毒基因特征研究被引量：9: 2014年; 为了解福建省甲型H1N1流感病毒基因变异特征和规律，对2009～2012年福建省分离的14株甲型H1N1流感病毒进行了全基因序列分析。结果发现，所有的毒株均是典型的低致病性流感病毒，对金刚烷胺类药物耐药，对神经氨酸酶抑制剂敏感。所有毒株与A／California／07／2009（H1N1）疫苗株保持高度同源，8个节段基因同源性均在98．2％以上。相比之下，福建省2012年的流感毒株抗原变异程度较大，其中A／Fujiangulou／SWL1155／2012毒株HA基因发生11个氨基酸位点改变，其中H138R、L161I、S185T和S203T位点的变异分别涉及ca、sa和sb抗原决定簇。监测显示，疫苗对福建省人群保护效果较好，但福建省2012年毒株相对疫苗株已经出现抗原漂移，应进一步密切关注其变异情况。; 谢剑锋沈晓娜王美爱杨式芹黄萌张炎华修文琼翁育伟严延生郑奎城; 关键词：甲型H1N1流感病毒全基因序列基因特征

一种高效扩增血清松弛环状乙型肝炎病毒DNA全长基因组方法的研究被引量：2: 2015年; 目的建立基于滚环复制的、高效扩增血清松弛环状乙型肝炎病毒DNA（HBV RC-DNA）全长基因组的方法。方法以60例慢性乙型肝炎患者血清HBV RC-DNA为研究对象,利用T4 DNA polymerase和T4 DNA ligase,封闭HBV RC-DNA基因组上的缺口,使之成为闭合环状结构;再通过Phi29 DNA polymerase的作用,对闭合环状的HBV基因组进行滚环复制,以滚环复制后的RC-DNA为模板扩增HBV全长基因组。结果成功建立了基于滚环复制的HBV RC-DNA全长基因组扩增方法,可从病毒载量为108~104拷贝/ml样本中扩增出HBV全长基因组。对于107~105拷贝/ml血清样本来说,使用基于RC-DNA滚环复制的全长基因组扩增方法,与以往的一步法扩增相比,扩增效率显著提高。结论基于滚环复制的HBV RC-DNA全长基因组扩增方法具有较高的灵敏度。该方法的建立为HBV全基因组研究提供了一种新的、有效的工具,有望在基础和临床研究中广泛应用。; 张纯瑜金维荣董辉; 关键词：扩增

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国家科技重大专项(2013ZX10004104)

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