“十一五”国家科技支撑计划(2007BAD40B01)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 相关作者：何孔旺孟祥升张雪寒夏兴霞王永山更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院扬州大学南京军区联勤部更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制被引量：9
- 2010年
- 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。
- 夏兴霞王永山孟祥升朱国强张雪寒何孔旺
- 关键词：单克隆抗体胶体金人兽共患病
- 动物粪便沙门菌PCR检测技术的研究
- 建立一种动物粪便样品中快速、特异、敏感的沙门菌检测方法。根据沙门菌肠毒素stn基因设计一对引物,对不同血清型的沙门菌和非沙门菌进行PCR检测,并对该PCR方法进行反应的灵敏度、模拟粪便样品的最低检出限测定及粪便样品的检测...
- 潘志明周延庆刘蓓蓓焦新安
- 关键词：沙门菌STNPCR粪便
- 文献传递
- 动物粪便沙门菌PCR检测技术的研究被引量：6
- 2010年
- 为了建立一种动物粪便样品中快速、特异、敏感的沙门菌检测方法,根据沙门菌肠毒素stn基因设计一对引物,对不同血清型的沙门菌和非沙门菌进行PCR检测,并对该PCR方法进行反应的灵敏度、模拟粪便样品的最低检出限测定及粪便样品的检测。运用该方法对250份粪便样品进行检测,同时用传统方法进行验证。结果表明,设计的引物特异性好,能专一性扩增出约260 bp条带;该引物灵敏度高,能进行有效检测的核酸最低起始量为43.85 pg,纯菌检测灵敏度达1 cfu/mL。接种沙门菌到粪便样品中,当粪便样本中菌量达103cfu/mL以上时,不需要增菌,沙门菌可立即检出,增菌后检出限可以达到1 cfu/mL。PCR检测250份样品共检出18份阳性,同时传统细菌培养方法证明结果正确。该方法可用于粪便样品的检测。
- 周延庆刘蓓蓓潘志明焦新安
- 关键词：沙门菌STNPCR粪便
- 大肠杆菌O157:H7实验感染动物排菌动态检测被引量：3
- 2012年
- 目的检验大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果。方法将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式实验感染大肠杆菌O157:H7,用大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基分别培养检测感染动物粪便中的O157:H7的排菌量和持续时间。结果牛在感染大肠杆菌O157:H7后的第2天开始从粪便排菌,第4～6天达到峰值,排菌时间可持续28 d;小鼠在感染O157:H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15 d。结论大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基培养计数的检测结果一致,试纸条更简便、快捷、直观,在1～5 min内可得出检测结果。
- 孙茂华孟祥升夏兴霞赵攀登张雪寒何孔旺王永山
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7粪便
- 动物粪便沙门菌PCR检测技术的研究
- 为了建立一种动物粪便样品中快速、特异、敏感的沙门菌检测方法,根据沙门菌肠毒素stn基因设计一对引物,对不同血清型的沙门菌和非沙门菌进行PCR检测,并对该PCR方法进行反应的灵敏度、模拟粪便样品的最低检出限测定及粪便样品的...
- 周延庆刘蓓蓓潘志明焦新安
- 关键词：沙门菌STNPCR粪便
- 文献传递
- 大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染牛和小鼠排菌检测中的应用被引量：3
- 2012年
- 为了检验大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果,将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式试验感染大肠杆菌O157∶H7,用大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条、细菌鉴别培养基培养计数以及PCR 3种方法检测感染动物粪便中O157∶H7的排菌量和持续时间。牛在感染大肠杆菌O157∶H7后的第2天开始从粪便排菌,第4天达到峰值,排菌时间可持续28d;小鼠在感染O157∶H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15d。大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条、细菌鉴别培养基培养计数以及PCR 3种方法的检测结果一致,但试纸条更简便、快捷、直观,1～5min可得出检测结果,便于现场检测样品中O157∶H7的快速筛查。
- 夏兴霞孟祥升王永山董晨红赵攀登张雪寒何孔旺
- 关键词：粪便
