江苏省自然科学基金(BK2011151) 作品数:11 被引量:54 H指数:4 相关作者: 华欲飞 孔祥珍 丁秀臻 张彩猛 赵沙沙 更多>> 相关机构: 江南大学 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 生物学 理学 更多>>
胃蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究 被引量:11 2012年 采用胃蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解,随着酶解时间的延长,蛋白质的水解度逐渐增大,水解6h,DH为7.90%。采用分子筛凝胶过滤色谱(SE-HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对不同的酶解时间下大豆分离蛋白酶解物的分子结构进行表征,结果表明,胃蛋白酶选择性地酶解大豆11 S球蛋白。大豆分离蛋白经胃蛋白酶水解6 h后,分子量大于10 ku的部分占21.34%,其中主要是7 S球蛋白;分子量小于5 ku的部分所占比例为68.30%。对酶解物中的游离巯基和二硫键含量测定结果表明,随着酶解的进行,游离巯基的含量呈现先增大后减小的趋势,二硫键的含量总体变化不大。该研究旨在更好地了解胃蛋白酶水解大豆分离蛋白的机理,并为开发大豆分离蛋白酶解物产品提供理论依据。 庞美蓉 丁秀臻 孔祥珍 华欲飞关键词:大豆蛋白 胃蛋白酶 水解 分子量 酶法水解制备植物蛋白肽粉的研究 被引量:4 2013年 以大豆分离蛋白和谷朊粉为原料,选择碱性蛋白酶(Alcalase)酶解制备植物蛋白肽粉。考察了pH、酶解温度、酶解时间对大豆分离蛋白、谷朊粉及二者混合物分别酶解的影响。结果表明:相同的条件下谷朊粉的酶解程度比大豆分离蛋白高,所得肽粉的相对分子质量整体分布更小一些;大豆分离蛋白和谷朊粉混合物酶解制备的肽粉,其氨基酸组成比例基本满足FAO推荐的必需氨基酸模式,且肽粉中游离氨基酸含量很少;肽粉的表面疏水性远小于大豆分离蛋白和谷朊粉。研究结果为通过调节蛋白原料比例(大豆分离蛋白、谷朊粉等)来制备具有合适氨基酸配比的植物蛋白肽粉提供了理论基础。 孔祥珍 华欲飞 张彩猛关键词:谷朊粉 大豆分离蛋白 酶解 高温加热豆浆对其异黄酮成分的影响 被引量:1 2014年 对不同加热条件下处理豆浆的异黄酮成分、总酚含量以及DPPH自由基清除率的变化进行了研究。结果表明:在所设置的处理条件下,当加热时间相同时,随着加热温度的升高,异黄酮总量随之增大;在相同的加热温度下随着加热时间的延长,异黄酮总量亦呈现增大的趋势,同时,异黄酮糖苷含量、异黄酮苷元含量、3种异黄酮系列的含量(大豆苷系列、黄豆黄素系列以及染料木素系列)以及DPPH自由基清除率均呈现相似的变化趋势。总酚含量和异黄酮含量之间存在一定的正相关性。 解晚晴 吕玉翠 孔祥珍 华欲飞关键词:豆浆 异黄酮 总酚 碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对热变性大豆分离蛋白的酶解研究 被引量:13 2014年 采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对热变性大豆分离蛋白进行酶解,研究两种蛋白酶酶解温度对大豆分离蛋白酶解效果的影响。结果表明:碱性蛋白酶在60℃时比在70℃时对大豆分离蛋白的酶解更彻底,得到的相对分子质量小的肽段更多,大豆分离蛋白的水解度较高(14.73%);酶解温度对木瓜蛋白酶酶解大豆分离蛋白的效果影响不明显;与木瓜蛋白酶相比,碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白可以得到更多的小分子肽段。 李婷 赵沙沙 阮奇珺 孔祥珍 华欲飞关键词:大豆分离蛋白 木瓜蛋白酶 碱性蛋白酶 酶解 碱性蛋白酶水解大豆蛋白过程的拟合及水解产物性质的研究 被引量:2 2015年 采用Alcalase碱性蛋白酶在50、60℃下以不同酶底比(1∶100、2∶100和3∶100)分别制备水解度(DH)为5%、10%和15%的大豆蛋白水解产物。考察水解反应动力学以及水解产物的DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量,并且采用HPLC表征水解产物相对分子质量变化。结果表明:碱性蛋白酶在所考察的条件下水解大豆蛋白,符合指数形式动力学方程;水解产物水解度从5%增加到15%,DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量分别由17.07%、16.28%增加到31.84%、64.85%;大豆蛋白经碱性蛋白酶水解至相同水解度时,在同一温度下,随着酶底比的增加,水解产物的DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量增加,水解产物中相对分子质量大于10 k D的肽段比例逐渐减小,小于0.5 k D的肽段比例逐渐增大。同一种酶水解同一种蛋白质,虽然水解反应动力学均符合指数形式动力学方程,但是当大豆蛋白被水解至相同水解度时,不同条件下制备的水解产物的性质与结构均有显著性差异。 孔祥珍 叶挺 孙灵湘 丁秀臻 华欲飞关键词:碱性蛋白酶 水解 水解度 相对分子质量分布 大豆球蛋白酶解物的抗氧化性及汞离子结合特性的研究 被引量:3 2016年 以未还原大豆球蛋白水解物为对照,研究了还原大豆球蛋白胃酶酶解物的抗氧化性及汞离子结合特性。结果表明:还原蛋白酶解物巯基含量为117.5μmol/g,是未还原蛋白酶解物的76.8倍。还原蛋白酶解物分子质量更小,疏水性与未还原蛋白酶解物相差不大。还原蛋白酶解物对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基清除的IC50分别为18、20和0.7 mg/m L,当质量浓度为2 mg/m L时,Fe3+还原能力为0.557,汞离子结合量为8.02 mg/g,还原蛋白酶解物的抗氧化性和汞离子结合能力显著优于未还原酶解物。说明还原大豆球蛋白酶解物具有一定的汞离子解毒潜能。 丁秀臻 孔祥珍 陈业明 张彩猛 华欲飞关键词:抗氧化性 还原前后大豆球蛋白酶解物的性质 被引量:3 2013年 主要研究了还原前后大豆球蛋白不同酶解物的抗氧化特性,首先制备了不同的大豆球蛋白酶解物,然后对酶解物进行了表征(巯基含量、水解度、分子量等),并研究了还原前后不同酶解物的抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、铁还原能力及二价铁螯合能力)以及抗氧化活性与巯基含量的关系,结果表明还原后的大豆球蛋白具有较好的酶解特性,还原后酶解物具有较高的巯基含量和抗氧化活性,还原后酶解物的DPPH自由基清除能力和铁还原能力与巯基含量具有显著相关性,二价铁螯合能力与巯基含量也呈现一定的相关性。 王金艳 潘莹 丁秀臻 孔祥珍 华欲飞关键词:大豆球蛋白 酶解物 抗氧化性 巯基 大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析 被引量:2 2016年 建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法。首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱制备还原酶解物中的巯基肽,对共价色谱的吸附、解吸条件进行了考察和优化。研究表明:二硫键还原最佳1,4-二硫苏糖醇用量为20 mmol/L,还原之后酶解物中的巯基含量从1.8μmol/g提高到了113.8μmol/g。共价色谱的最佳条件为还原酶解物的上样量为酶解物中巯基含量占凝胶活性位点的80%,键合时间30 min;解吸时1,4-二硫苏糖醇浓度20 mmol/L,解吸时间20 min。此外,C18柱可以有效地将巯基肽中的1,4-二硫苏糖醇和2-巯基吡啶去除。MALDI-TOF-MS分析表明制备的巯基肽中可检测到45个肽段,其中36个肽段含有巯基,表明Thiolpropyl-Sepharose 6B共价色谱对巯基肽有很高的选择性。 丁秀臻 孔祥珍 陈业明 张彩猛 华欲飞不同蛋白酶和水解条件对酪蛋白酶解产物性质的影响 被引量:9 2015年 采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和胰蛋白酶分别对酪蛋白进行酶解,发现碱性蛋白酶水解酪蛋白的水解程度最大。当酪蛋白经不同的酶水解至相同水解度(DH)时,酶解物的分子量分布存在显著差异。随后选定碱性蛋白酶以考察水解条件对酪蛋白酶解产物性质的影响,采用p H-stat法控制水解过程p H恒定(8.5±0.02),制备DH8%和12%的酶解产物,分别测定其DPPH自由基清除率,TCA可溶性氮含量,采用SE-HPLC测定分子量分布。结果表明,不同酶解条件下,DH 8%和DH 12%水解产物的DPPH自由基清除率分别为32.76%-34.02%和39.87%-41.02,DH 8%和DH 12%水解产物的TCA可溶性氮含量值分别为58.98%-60.43%和69.69%-70.34%。方差分析显示水解度相同,不同产物的DPPH自由基清除率无显著性差异,TCA可溶性氮含量的结果亦如此(p〉0.05)。HPLC的结果进一步证明尽管水解条件不同,水解至相同DH时,水解产物的分子量分布一致。 叶挺 孔祥珍 孙灵湘 丁秀臻 华欲飞关键词:酶水解 水解度 大豆蛋白酶解过程中聚集行为的研究 被引量:3 2014年 主要研究了大豆β-伴球蛋白对大豆球蛋白酶解过程聚集行为的影响。在相同蛋白浓度下使用Alcalase进行酶解时,与β-伴球蛋白、大豆分离蛋白相比,大豆球蛋白聚集现象较为明显,这说明大豆蛋白酶解过程的聚集与蛋白种类有关;改变β-伴球蛋白对大豆球蛋白的添加量进行酶解时发现,β-伴球蛋白添加量越大,大豆球蛋白酶解过程的聚集程度越小,这说明β-伴球蛋白对大豆球蛋白的酶解过程的聚集有抑制作用。高效液相和SDS-PAGE结果表明上清液的分子质量大于聚集物的分子质量,聚集体主要是由分子质量小于5 ku的肽段聚集而成。 赵沙沙 孔祥珍 苏芮 华欲飞关键词:酶解 聚集体 分子质量