国家自然科学基金(31100112)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 相关作者：冯金荣段义农庄重朱丹丹孙伟更多>>
- 相关机构：南通大学黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目南通市应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 酿酒酵母DNA损伤检查点Rad53活性的调节被引量：1
- 2013年
- 在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,Rad53作为最重要的检查点之一,对于维持细胞周期的正常运行具有重要意义。当发生DNA损伤后,细胞通过不同途径激活Rad53,进而激活下游的一些损伤修复基因,引发细胞周期阻滞从而修复损伤。当DNA损伤被修复后,Rad53需要适时失活,细胞周期才能恢复正常。对酿酒酵母Rad53的活性调节机制进行综述,将为深入研究其他生物的DNA损伤修复调节机制提供新的视角。
- 冯金荣于立权段义农
- 关键词：细胞周期检查点DNA损伤蛋白磷酸酶
- 白念珠菌蛋白磷酸酯酶CaPph3和调节亚基CaPsy2在调节菌丝发育中的作用
- 2013年
- 目的:研究白念珠菌蛋白磷酸酯酶CaPph3及调节亚基CaPsy2在调控白念珠菌菌丝发育过程中的作用。方法:利用遗传毒性试剂HU和MMS分别处理CaPPH3和CaPSY2缺失株,观察移除毒性试剂后缺失株的菌丝发育情况。结果:(1)缺失株的表型鉴定:在含有遗传毒性试剂MMS、HU以及CP平板上,与野生型菌株RM1000相比,CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双缺失株均表现出明显生长缺陷,且各缺失株间差异不大。(2)缺失株对遗传毒性试剂敏感度测定:用MMS和HU处理各菌株后,野生型菌株的存活率约95%,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株存活率明显下降,且相互之间差异不大。(3)缺失株菌丝发育实验:用0.020%MMS处理各菌株4小时后,野生型菌株RM1000还维持酵母态,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株已出芽形成菌丝;而移除MMS后野生型菌株形成菌丝,6小时后不再延长,在菌丝顶端形成酵母态细胞,而CaPPH3、CaPSY2和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株仍维持菌丝态。用40 mmol/L HU处理各菌株4小时后,各菌株都维持酵母态;而移除HU后野生型菌株仍维持酵母态,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株则会逐渐形成菌丝。结论:CaPph3和CaPsy2参与调节遗传毒性试剂诱导的白念珠菌的菌丝发育。
- 冯金荣孙伟庄重朱丹丹段义农
- 关键词：白念珠菌羟基脲
- 白念珠菌CaPSY2基因的敲除和功能研究
- 2013年
- 目的:研究人体病原真菌白念珠菌CaPsy2蛋白的功能,探讨它在DNA损伤检查点修复过程中所起的作用。方法:采用同源重组的方法构建CaPSY2双等位基因缺失株,并利用倍比稀释法探讨CaPSY2缺失株在含有遗传毒性试剂平板上的表型。结果:PCR检测结果显示CaPSY2双等位基因缺失株构建成功,而表型结果显示CaPsy2缺失会导致缺失株对遗传毒性试剂敏感,且这种敏感性表型可以被外源的CaPSY2基因互补。结论:CaPsy2蛋白参与DNA损伤修复过程,并且可能作为CaPph3的调节亚基而发挥作用。
- 冯金荣孙乐桥孙伟庄重朱丹丹段义农
- 关键词：白念珠菌基因敲除
- 日本血吸虫蛋白磷酸酶PP2C-1的原核表达及活性分析被引量：1
- 2015年
- 目的构建日本血吸虫PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析。方法从日本血吸虫基因组数据库中找到一个可能编码PP2C-1蛋白磷酸酶的基因Sj-PP2C-1,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区与pET28a表达载体连接后转化大肠埃希菌并用IPTG诱导表达,对表达产物的磷酸酶活性进行分析。结果成功构建了Sj-PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,其编码区能够在大肠埃希菌中表达分子质量单位为40ku的目的蛋白;采用V2460系统进行检测,Sj-PP2C-1具有PP2C磷酸酶活性。结论 Sj-PP2C-1基因原核表达产物具有蛋白磷酸酶活性,为研究PP2C类蛋白磷酸酶的功能打下了基础。
- 冯金荣周桥毛勇安尹西腾徐凌峰王里媛段义农
- 关键词：克隆活性分析
