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CPP生产副产物——CNPP酶膜耦合法制备ACE抑制肽研究被引量：1: 2010年; 采用酶解与膜分离耦合的方法,以酶膜耦合法生产酪蛋白非磷酸肽(CPP)得到的副产物——酪蛋白非磷酸肽(CNPP)为原料制备高活性ACE抑制肽.用Protease N、胰蛋白酶、Fla-vourzyme、AS1398、酸性蛋白酶等几种蛋白酶对经过酶膜耦合制备的酪蛋白非磷酸肽进行二次酶解,同时与1 K膜分离耦合,然后对二次酶膜耦合所得产物的ACE抑制活性进行比较.结果表明,Protease N比其他几种蛋白酶更适合用于酪蛋白非磷酸肽制备高活性的ACE抑制肽,其产物的蛋白质量浓度为1 g/L时的ACE抑制率达到55.60%.; 魏春燕顾瑾杨瑞金赵伟华霄张文斌; 关键词：ACE抑制活性

基于模拟酶切的酪蛋白定向酶解探究被引量：4: 2012年; 用模拟酶切软件peptidecutter提供的39种蛋白酶,对已知序列的酪蛋白进行模拟酶切,以生成的寡肽数量为指标建立酶解肽库,选择适用酶并进行真实条件下的酶解验证,获得最适用酶;以血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的抑制率和酪蛋白磷酸肽(CPP)的氮磷摩尔比来评价ACE抑制肽的活性及CPP的纯度,超滤分离酶解液获得高纯度的ACE抑制肽和CPP。结果表明:胰蛋白酶为最适用酶,超滤后ACE抑制肽的抑制活性及CPP的纯度显著升高(p<0.01),获得了高活性的ACE抑制肽和高纯度的CPP。; 彭莉娟王伟张赛赛赵春江冯凤琴; 关键词：酪蛋白

酶膜反应器水解酪蛋白连续制备ACE抑制肽的研究被引量：5: 2009年; 目的:将酶解与膜分离耦合,连续制备ACE抑制肽。方法:通过考察超滤膜包对原料蛋白质及酶的截留、膜通量以及膜包滤出液的ACE抑制活性,确定试验用膜包;通过优化的超滤条件,采用静态间歇式反应、半连续反应和连续反应3种不同的模式制备ACE抑制肽。结果:静态反应的得率、单位时间产量和单位活力酶对应的产量远小于半连续和连续反应,其中连续反应的得率达43.4%,单位时间产量为6284mg/h,单位活力酶对应的产量为0.23mg/U,产物的ACE抑制率达81.6%(1mg/mL),整个系统持续稳定反应8h以上。结论:将酶解反应与膜分离耦合来水解牛乳酪蛋白,制备ACE抑制肽,可实现连续化生产,提高原料和酶的利用率。; 张赛赛李恒星沙莎冯凤琴; 关键词：酪蛋白酶膜反应器 ACE抑制肽

A Novel Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitory Peptide from the Milk Casein:Virtual Screening and Docking Studies被引量：6: 2011年; Angiotensin I converting enzyme （ACE） plays an important physiological role in the regulation of hypertension. In this study, we applied virtual screening to discover a novel angiotensin I converting enzyme inhibitory peptides from milk casein. One potential hit was identified based on docking scores, subsequently confirmed by activity studies in vitro （IC50=20.85 μmol L-1）. The proposed peptide in this study contains a unique sequence, Lys-Val-Leu-Ile-Leu-Ala. Moreover, we performed the docking studies to understand the binding mode between the enzyme and peptide hit.; WANG Zhan-liZHANG Sai-saiWANG WeiFENG Feng-qinSHAN Wei-guang; 关键词：DOCKING

应用酶膜反应器制备酪蛋白生物活性肽被引量：2: 2011年; 研究酶膜反应器中超滤压力及循环流速对分离酪蛋白生物活性肽的影响。在截留相对分子质量为10 000切向流超滤酶膜反应器(EMRs)中,采用Alcalase 2.4FG在pH 8.5、温度为50℃条件下对酪蛋白进行连续水解。通过单因素实验研究了操作压力及循环流速对膜通量J、酪蛋白水解度DH、蛋白质回收率S、残余酶活AR、泄漏酶活AF及酶活损失AL等因素的影响,确定最佳的超滤工艺。研究结果表明:增大超滤压力会导致蛋白质回收率的大幅度提高,但会促使酶大量泄漏并对膜造成严重的污染;提高循环流量为140 mL/min时,酶泄漏较少,膜污染程度相对降低,并可获得较高的蛋白质回收率。; 徐桂敏杨瑞金赵伟张文斌华霄; 关键词：酶膜反应器膜通量酶活力

一种连续分离纯化酪蛋白磷酸肽的新工艺被引量：3: 2011年; 为建立一条制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的新工艺路线。采用酶解与超滤耦联技术初步分离制备酪蛋白生物活性肽,然后通过树脂层析将酪蛋白生物活性肽中的酪蛋白磷酸肽和非磷酸肽分离。选用碱性蛋白酶Alcalase在切向流酶膜反应器中(膜截留分子质量10kD)连续酶解3h、酶解温度50℃、pH8.5。重点研究大孔弱碱性阴离子交换树脂D303对酪蛋白生物活性肽的分离纯化工艺,并采用单因素试验优化CPPs的分离纯化工艺参数,确定D303树脂的较佳动态吸附解吸条件:上样流速1BV/h、上样量100mL、洗脱温度45℃、洗脱酸浓度0.15mol/L HCl,获得磷酸肽N/P比为7.21,P洗脱得率为93.11%。; 徐桂敏杨瑞金张文斌赵伟华霄蒋孝燕; 关键词：酶膜反应器层析分离酪蛋白磷酸肽纯化

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国家高技术研究发展计划(2008AA10Z313)