山西省科技攻关计划项目(2006031087-04)
- 作品数：16 被引量：57H指数：5
- 相关作者：赵瑞君程璟侠樊宏英刘颜岗于娟更多>>
- 相关机构：山西医科大学山西省疾病预防控制中心荆州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目山西高校科技研究开发项目太原市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽促K562细胞凋亡作用及其机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽对K562细胞核和线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽是否可以影响线粒体膜电位及促进K562细胞凋亡。方法首先采用Hoechst33258荧光标记法,将家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞,用荧光显微镜检测K562细胞核荧光强度的变化;其次采用荧光探针罗丹明123标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;最后用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase-3的含量。结果采用Hoechst33258荧光标记法,用荧光显微镜观察到家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞后部分细胞核的荧光强度增强,说明其可以引起K562细胞发生凋亡;用罗丹明123标记,激光共聚焦显微镜观察发现,家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用组的K562细胞荧光强度值明显低于对照组(t1=21.30,t2=196.23,P<0.05),说明家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽可以使K562细胞线粒体膜电位降低;峰5、峰8组分作用组caspase-3的含量明显高于对照组(t1=146.92,t2=189.56,P<0.05),说明3龄幼虫抗肿瘤肽可以促进K562细胞发生凋亡。结论家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽峰5、峰8组分对K562细胞核具有损伤作用,可以引起K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,激活caspase-3,扰乱其生理功能,促使其凋亡。
- 赵瑞君樊宏英程璟侠冀霞焦丽萍贾琳
- 关键词：荧光标记法线粒体膜电位半胱天冬氨酸蛋白酶-3凋亡
- 抗菌肽的抗肿瘤作用研究进展被引量：3
- 2009年
- 抗菌肽具有广谱抗细菌、真菌、病毒、寄生虫和肿瘤的活性。不同的抗菌肽具有不同的活性谱。该文综述了不同来源的抗菌肽对肿瘤细胞的抑制和杀伤作用及其机制，展望了抗菌肽抗肿瘤的应用前景。
- 刘颜岗赵瑞君
- 关键词：抗菌肽肿瘤细胞
- 黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究被引量：2
- 2011年
- 为观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的影响,进而探讨黄粉虫抗菌肽否是影响线粒体膜电位以及是否可以引起K562细胞凋亡,本文首先采用荧光探针罗丹明123 标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;其次用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase 3的含量.实验结果显示,抗菌肽组的K562细胞荧光强度显著低于对照组（t=5.635,P〈0.05）,说明黄粉虫抗菌肽可使K562细胞线粒体膜电位降低;抗菌肽组caspase 3的含量显著高于对照组（t=43.289,P〈0.05）,说明黄粉虫抗菌肽可以诱导K562细胞发生凋亡.结果表明,黄粉虫抗菌肽可以诱导K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,扰乱其生理功能,促使其凋亡.
- 樊宏英刘颜岗赵瑞君乔丛静申金雁
- 关键词：抗菌肽线粒体膜电位CASPASE-3细胞凋亡
- 黄粉虫幼虫抗肿瘤细胞K562抗菌肽的分离纯化被引量：11
- 2009年
- 目的从黄粉虫幼虫体内分离纯化具有抗肿瘤细胞K562的抗菌肽。方法通过超声诱导黄粉虫幼虫大量表达抗菌肽。然后经过研磨、离心、固相萃取、反相高效液相色谱分离纯化黄粉虫幼虫抗菌肽,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法和光镜观察法筛选对K562有杀伤作用的抗菌肽。结果离心上清液上样固相萃取柱,经10%、30%、80%的乙腈水溶液洗脱,只有80%的乙腈水溶液分离组分有活性(P<0.01)。该活性组分经反相高效液相色谱纯化后分离出5个具有抗肿瘤活性的峰物质,这5个峰活性都较强(P<0.01),其中峰9、峰4能初步确定为抗菌肽,其他3种有待于进一步的实验证明。结论黄粉虫幼虫体内存在抗肿瘤细胞K562的抗菌肽和抗菌物质,而且不止一种。
- 刘颜岗程璟侠赵瑞君樊宏英
- 关键词：黄粉虫幼虫抗菌肽肿瘤细胞K562纯化
- 抗菌肽抗肿瘤作用机制的研究进展被引量：3
- 2011年
- 抗菌肽（antimicrobial peptide，AMPs）是天然免疫系统中的一种小分子多肽，一些具有抗肿瘤活性，毒副反应小，不易产生耐药性。近年来，深入细致的研究已经明确了抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤抑制作用及其作用机制。目前，普遍认同的抗肿瘤抗菌肽的作用机制包括以下五方面：（1）在肿瘤细胞膜上形成穿膜孔道，使肿瘤细胞死亡；（2）作用于细胞骨架使其结构紊乱；（3）抑制DNA合成，影响细胞增殖；（4）作用于线粒体引起肿瘤细胞凋亡；（5）影响免疫效应进而杀伤肿瘤细胞。该文就抗菌肽抗肿瘤细胞的作用机制作一综述。
- 樊宏英赵瑞君
- 关键词：抗菌肽肿瘤细胞
- 家蝇蛹抗菌肽对肿瘤细胞膜破坏作用被引量：11
- 2007年
- 目的观察4种肿瘤细胞在家蝇蛹抗菌肽作用下细胞表面的变化,探讨抗菌肽杀伤肿瘤细胞的机制。方法用针刺对家蝇幼虫感染大肠埃希菌,诱导其产生抗菌肽,然后至蛹期提取该抗菌肽并作用于4种肿瘤细胞(人髓样白血病细胞株K562;人淋巴瘤细胞株Daudi;人食管癌细胞株Eca109;人膀胱癌细胞株T24)。36 h后用扫描电镜观察其细胞表面变化。结果4种肿瘤细胞表面出现大小不等的创伤,且大部分创伤为孔洞型。
- 赵瑞君程璟侠代培芳罗景星于娟
- 关键词：抗菌肽肿瘤细胞穿孔
- 黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响及与羟基脲对细胞增殖抑制的比较被引量：2
- 2010年
- 目的观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响;比较该抗菌肽与羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用。方法用流式细胞仪检测黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响。黄粉虫抗菌肽与羟基脲分别设置5个浓度组,用MTT比色法分别求出2种药物不同浓度对K562的抑制率,根据浓度和抑制率用SPSS软件求出回归方程和IC50。结果细胞周期G0/G1期和G2/M期细胞比例增加,S期细胞比例下降。其中只有G0/G1期和S期与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。说明抗菌肽可使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而抑制S期DNA的合成。抗菌肽和羟基脲的IC50分别为29.98和3644.45μg/ml。结论抗菌肽可通过影响细胞周期来发挥抗K562细胞的作用。抗菌肽明显优于羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用,有较好的应用前景。
- 程璟侠刘颜岗索文莉赵瑞君樊宏英
- 关键词：抗菌肽羟基脲K562细胞周期增殖抑制
- 家蝇抗菌肽defensin基因的克隆、原核表达纯化及抑菌、抑肿瘤活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 为研究家蝇防御素融合蛋白对肿瘤细胞K562有抑制作用，在GenBank中检索家蝇defensin基因，设计特异引物，在家蝇幼虫组织中提取RNA，并通过PCR扩增defensin基因成熟肽部分（Maturedefensin，MD），将该基因与原核质粒表达载体pGEX．6P-1进行重组，构建家蝇抗菌肽重组蛋白pGEX-6P-1／MD。通过双酶切鉴定证明目的片段已稳定融合到载体pGEX-6P-1中并将其转化至BL21（DE3）感受态细胞中，经25℃IPTG诱导在大肠杆菌E．coliDH5u中表达。用GST—Sefinose亲和层析纯化蛋白，15％SDS—PAGE分析鉴定，可见相对分子量为约30kDa的特异性目的条带。运用琼脂孔穴平板扩散法测定表达产物的活性，得知纯化后的重组融合蛋白pGEX-6P-1／MD对大肠杆菌生长有一定的抑制作用，并首次证明家蝇防御素融合蛋白pGEX．6P．1／MD对肿瘤细胞K562有抑制作用。家蝇抗菌肽融合蛋白pGEX-6P-1／MD被成功克隆和表达，证明纯化融合蛋白pGEX-6P-1／MD对肿瘤细胞K562有抑制和损伤作用，这为以后研发蝇防御素抗菌肽药物提供了依据。
- 焦莉萍杨敏侯养全赵瑞君原发家杜斌王文建
- 关键词：DEFENSIN抗菌肽原核表达
- MTT比色法在弓形虫计数中应用被引量：2
- 2008年
- 于娟赵瑞君饶华祥刘颜岗
- 关键词：细胞计数法MTT比色法弓形虫计数方法MTT法同位素
- 黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响及与羟基脲对细胞增殖抑制的比较
- 目的观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞细胞周期的影响;比较该抗菌肽与羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用。方法用流式细胞仪检测黄粉虫抗菌肽对K562细胞细胞周期的影响。黄粉虫抗菌肽与羟基脲分别设置5个浓度组,用MTT比色法分别...
- 赵瑞君刘颜岗程璟侠樊宏英冀霞
- 关键词：抗菌肽羟基脲K562
- 文献传递
